1楼：匿名用户
溶解曲线是在正常的pcr反应基础上加一个溶解曲线的反应条件，其中当温度由60℃升至95℃时，pcr仪每隔一定的温度检测一次信号。最后将收集的信号绘制出溶解曲线，然后将溶解曲线一次微分就会得到我们平时看到的峰性图。每一条线代表着某个孔里的反应体系里产物的单一情况，某一条线如果为单峰且在一定合理的温度范围内（一般为80~90℃）则认为正常，如果为双峰则可能有非特异性扩增。
由此可以判断产物是否为目的基因且是否单一。内参有内参的线，目的基因有目的基因的线，同一条线不会出现两个基因的峰。你可以看一下溶解曲线的横、纵坐标。
2楼：乌冬蛋白
内参量多，循环数少吧，我也不熟
谁能具体解释一下荧光定量pcr中溶解曲线的意思以及作用
3楼：奔马的香香猪
溶解曲线分析可以用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物。溶解曲线分析可以用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物。扩增反应完成后，通过逐渐增加温度同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线，随着反应中双链dna变性，荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图，在扩增产物的溶解温度上有一特征峰（tm，dna双链解链50%的温度），用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开，因为它们在不同的温度溶解.
这个一般是用syby green作为荧光染料的时候需要做的工作！我们实验室用bioghc elitefast sybr kit检测dna,熔解曲线是为了验证扩增产物特异性的，要是熔解曲线是单峰说明产物只有一条，结果较好；要是双峰说明产物不特异，可能存在引物二聚体或非特异性扩增，有可能你的引物设计有问题。
4楼：匿名用户
溶解曲线是判断扩增产物是否单一的曲线，顾名思义，其跟模板（或其浓度）没有关系，扩增什么基因就应该有其相对应的溶解曲线，类似于电泳。那么你扩增几种基因就应该有几种对应的峰（一般sybr法的目的基因在80~90℃之间），我说的是一般情况，这个跟扩增片段长短有关系。出现其他峰就该考虑是否为引物二聚体（一般为60~75℃之间）视引物长度而定，而基因组dna污染的峰会在90℃以后。
出现引物二聚体可能是引物设计、引物加量等原因（也有可能是从加完反应液到上机开始pcr这之间的时间过长）所致；基因组dna那么考虑设计跨内含子引物或者实验之前做gdna的消除工作。而阴性对照有目的峰那可能就是模板污染，注意实验操作等避免模板污染。
详细请见我的回答：http://zhidao.baidu.***/question/548001369.html?from=pubpage&msgtype=2
5楼：表咏蒿乐蓉
用syber
green方法做完pcr后，用来判断产物是否相对专一。反应结束后，逐渐加温。和syber
green分子结合的pcr产物随温度升高逐渐变为单链，就不能在和syber
green结合。一般每加温一度，读一次信号。当温度到达pcr产物的tm时，产物解离一下增多。
曲线的横坐标是温度，而纵坐标是荧光信号的变化！开始加热，信号变化不大，所以几乎是平的，接近tm时，突然变化加大，所以出现峰值。再升温，产物全部解离，就又是一条直线了。
如果有非特异性产物，在加热过程中就会出现一些比较矮，宽的峰。
荧光定量pcr扩增曲线，开始有个下降的曲线
6楼：匿名用户
从你这个图上看，这是非特异性的扩增。信号非常弱，而且都超过40个循环还没有信号。
之所以前面有下降，其实都是背景噪音信号。你看纵坐标的数值都非常的小。所以不是真正的扩增信号，都是背景噪音干扰而已。没有任何扩增产物。
荧光定量pcr中溶解曲线的温度大概是多少
7楼：祝您每天开心
一般染料法定量pcr在进行完pcr后都要运行熔解曲线,一般设定先94度几分钟,然后骤冷到65度（假定65度为退伙温度）.在65度时,pcr产物是以双链的形式存在的。
因为染料是插到双链dna的小沟里然后发荧光的,所以这个时候检测到很强的光信号,随着温度升高,双链逐渐打开,荧光信号逐渐减弱。
8楼：匿名用户
realtime pcr的溶解曲线的出峰温度一般在85度——90度，溶解温度是指核酸片段解链一半时的温度。哪些因素影响熔解温度呢？pcr产物大小，gc含量等，一般的熔解温度是要大于80度的。
我们实验室用bioghc -pcr检测了dna,溶解曲线是为了验证扩增产物特异性的
实时荧光定量pcr，溶解曲线怎么判断是否为目的产物
9楼：南京金益柏生物科技****
根据曲线初步判断，整个实验设计还可以！你做相对定量吗，将样品结果与对照看看基因表达量分析就可以了！ 如果绝对定量，需要进一步实验吧！
10楼：为青生物
溶解曲线的单峰明显，横坐标在80度以上，一般就是pcr产物
荧光定量pcr溶解曲线怎么判断是否为目的产物
11楼：南京金益柏生物科技****
根据曲线初步判断，整个实验设计还可以！你做相对定量吗，将样品结果与对照看看基因表达量分析就可以了！ 如果绝对定量，需要进一步实验吧！
12楼：梦屿千寻_之歌
sybre green做溶解曲线特异性产物二聚体溶解曲线温度低峰宽
探针做信号
什么是realtime-pcr溶解曲线
13楼：匿名用户
如图所示，这就是一个标准的real time-qpcr溶解曲线。下面从几个方面来解读：1、随着温度的升高，dna双链断裂；接着温度降低，到达退火温度的时候，dna双链复性，荧光分子绑定在dna双链上，所以荧光信号值到达最高点。
上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着dna双链分子由退火温度约60度，继续升温，双链断开，dna分子溶解。请注意溶解曲线的纵坐标，表示单位时间内荧光信号的变化量。
当扩增产物特异，是单一产物的时候，这个纵坐标峰值所对应的横坐标应该是一致的，即呈现单一的溶解峰，这个时候，在同样的温度下，可以认为是产物相同；如果溶解峰不单一，就意味有非特异性扩增。
14楼：匿名用户
溶解曲线分析可以用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物。扩增反应完成后，通过逐渐增加温度同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线，随着反应中双链dna变性，荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图，在扩增产物的溶解温度上有一特征峰（tm，dna双链解链50％的温度），用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开，因为它们在不同的温度溶解.
这个一般是用syby green作为荧光染料的时候需要做的工作！
因为syby green染料是非特异的染料，只要有扩增，染料就可以镶嵌在双链中发出荧光。我们做溶解曲线是为了观察我们扩增发出荧光的片段是不是我们需要的产物。如果溶解曲线做出来只有单峰，且出锋位置是你的退火温度，那么这个是你的产物发出的荧光，实验结果有效。
如果出现多锋或退火温度不对，那么这个实验结果是不可信的！你需要再次调整！
荧光定量PCRTm值代表啥意思,荧光染料定量PCR熔解曲线Tm值过高对结果有什么影响
1楼 满意请采纳哟 tm值和溶解曲线是为了检测pcr反应特异性的， 主峰前的一个小峰可能是非特异性扩增， 也可能是引物二聚体，可以降低引物浓度试试 荧光染料定量pcr熔解曲线tm值过高对结果有什么影响 2楼 谁说我不好哎 用syber green方法做完pcr后，用来判断产物是否相对专一。反应结束后...
荧光定量pcr中溶解曲线的温度大概是多少
1楼 祝您每天开心 一般染料法定量pcr在进行完pcr后都要运行熔解曲线 一般设定先94度几分钟 然后骤冷到65度 假定65度为退伙温度 在65度时 pcr产物是以双链的形式存在的。 因为染料是插到双链dna的小沟里然后发荧光的 所以这个时候检测到很强的光信号 随着温度升高 双链逐渐打开 荧光信号逐...
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