1楼:栽梧桐等凤凰
质粒固化有利于保存运输,很多做研究的老师和同学需要从国外或者很远的地方将版质权粒取回来,由于路途运输不便,液体保存容易降解等原因,通常把液体质粒涂抹在滤纸上,烘干,用记号笔标出质粒位置,快递滤纸即可。收到后可将滤纸在蒸馏水中侵泡可重新得到液体质粒。详细方法请参考****
ielisa.***上的详细步骤。
2楼:匿名用户
找了很久,其实是消除质粒的意思
关于质粒的问题
3楼:
其实你的两个复问题是相同的。制
首先启动子、终止子以及你的目的基因共同构成一个表达盒,只有这样元件齐备了,才能成功合成出mrna,然后你的目的基因才能表达。此外,除了你的目的基因,质粒上可能还带有另外一套启动子、终止子,这个一般是表达抗性基因的。
复制原点,质粒进入细菌或细胞以后,需要进行复制,复制原点就是提供复制的起点,一般如果是真核表达质粒,可能分别存在一个原核复制起点和真核复制起点。
见你善于思考,加入我们团队吧!“乐研生物”团
4楼:匿名用户
第一个问题:启动子和终止子是dn**段,启动子是rna聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱专动基因属转录出mrna,终止子,相当于一盏红色信号灯,使转录在所需要的地方停止。复制原点:
dna的复制是由许多复制原点处形成的起始复制叉开始的。复制原点处的a和t特别多,相对氢键少,不稳定,dna容易解旋,因此就容易和引物结合,成为转录的起点或复制的起点。
第二个问题:质粒有时候不仅仅是将目的基因导入受体细胞,比如导入大肠杆菌中,很多目的基因就随质粒的复制而复制,随质粒基因的表达才表达!因此需要这些元件!
关于质粒转化 5
5楼:匿名用户
1.电击转化时通过瞬时高压使细胞表面出现微小的孔洞,从而使外源dna能通过孔洞进入到细胞里面,一般适用于革兰氏阳性细菌或者真核微生物;
热激转化是使用钙盐或者镁盐溶液在低温状态下处理细胞使其处于感受态状态,然后通过短时热激使其吸入外源dn**段,主要应用于革兰氏阴性细菌。
这些我想你应该懂的。我就不赘述了。
2.大肠杆菌作为革兰氏阴性细菌,使用一般的化学转化即热激转化就可以了,为何要劳神费力使用电转化?转化的目的不就是简单而方便为原则么?正所谓杀鸡焉用牛刀?
希望我的回答对你有帮助。
6楼:牧星星的风
电击转化要注意很多问题,建议查查实验步骤以及注意事项
,比如宿主菌需要养到对数期,比如连接及pcr产物与质粒的转化也不一样,前两者需要进一步纯化后再电转,质粒却不需要,但不可以加多,一般1-2微升即可。
7楼:匿名用户
果断不懂,我是打酱油的,,,
关于质粒的问题。
8楼:匿名用户
第一个问题你说的不对。(补充说明:质粒一般是细菌细胞质基质中的小型环状dna分子,应该无内显子和外显子的。
如图:第二个问题基因工程的产物是蛋白质。
如果说基因工程导入目的基因后市杂合子还算可以,因为目的基因是一个,整合到染色体上的dna上的话,算是杂合子吧。这样的遗传遵循孟德尔遗传规律。
构建质粒表达载体为什么要先连t载再连pmv261?
9楼:
先连接t载体是为了提高转化效率
一般来说市面上**的t载体都进行了优化,容易连接片段(也就是效率较高),因此构建表达载体时有时会先连接t载体。同时t载体的测序引物比较明确(商业化的缘故),因此测序也方便一些。更重要的是,t载体往往设计了蓝白斑筛选的功能,插入片段的载体会呈现白色,这样也容易区分验证,不用每个单菌落都拿去做colony pcr或提质粒酶切验证。
当然也不是绝对的,我们实验室就经常直接把片段酶切后连接表达载体,不经过t载体这一步,其实影响并不大。如果你的情况比较特殊(比如片段较大,或是对应的表达载体拷贝数较低等),可以考虑连接t载体,不然的话不是非常必要。
关于蛋白质电泳的问题,蛋白质电泳问题 50
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