1楼：匿名用户
不知你的a蛋白是什么？
一般来说，五条带从（距离点样点）远到近分别是：清蛋白、.α1、α2、β、γ，后面四个都是球蛋白。
蛋白质电泳问题 50
2楼：_baby大人
我做过g-25柱，效果不错。
我所在小组也用过磷酸缓冲液做纯化，也用透析除盐，同样也遇到过和你一样的问题，洗脱峰明明有光吸收，可是就是跑胶没带，现在这个问题已经解决，呵呵，很有可能你跟我们的问题一样。
问题关键是：蛋白浓度！
我们的蛋白本身易降解，且纯化率低，蛋白浓度很低，再加上透析、除盐等复杂步骤，脆弱的蛋白又被大量稀释，那么增加初始蛋白**不就可以了么？将原始菌液扩大好几倍，最后将蛋白进一步浓缩再跑胶，于是看到了漂亮的目的蛋白带~~~
另：我不认为你的蛋白样品成分会影响电泳（除非样品含盐量过高，蛋白会跑不动）
以上叙述不是全部，蛋白纯化是比较复杂的问题，想要做好，是需要摸很多条件的。以上仅供参考。
3楼：***
那就是中间丢掉了。将中间物一起电泳，看看是哪一步出错。
包括：原液（相当于阳性对照），除盐后的样品，层析上样时流出液，洗杂蛋白时的流出液，最后收集的样品。如果中间还有操作，每一步也要检测。
你是怎么除盐的？什么层析？
4楼：我来煮稀饭
1：纯化后跑电泳，包括原液，除盐后样品，穿透，洗杂蛋白样品，洗目的蛋白样品
2：可以加大电泳样品上样量
3：蛋白可能很容易降解，可加蛋白酶抑制剂尝试一下，不过有的蛋白即使加蛋白酶抑制剂也没用处。
4：可能beads用久了，更换新beads5：按照你的说法你的蛋白应该是大肠杆菌上清表达的吧，可以加大咪唑浓度洗脱，有的蛋白必须用1m的咪唑才能洗脱下来
暂时想到这么多
5楼：在幻想与梦想中
加样浓度，配胶的质量。
你好，向你请教蛋白质电泳的问题，谢谢。
6楼：叶绿蛋白
你这个有可能是
1脱色不全 建议再脱色一会
2如果跑的是总蛋白的话，有可能会出现连续的蓝色条带。
3 蓝白相间的竖条纹？我猜这是横条纹吧……
蛋白电泳遇到的问题
7楼：
不是问题，时间一长就是这个样子。 是不是俩边的部分全变成蓝色，中间的在没干透时能看出是分带，但是干透之后就变成一整个白的了？ 这个实验的分带观察不应该在它全干透。
电泳完时应该能看出来的，不是出现一个全白的，你的如果刚做完也时这个样子，那应该是你的实验步骤有问题，还有，如果正常操作，一般都能看出有三个分带。
8楼：夷逸雅顾依
电泳是在电场作用下带电离子根据其迁移率不同进行分离的技术。该技术简单，但却是研究蛋白性质的一个非常有用的手段。蛋折的迁移率与其结构衙环境都有关系，大多数电泳都有固定介质如聚丙烯酰胺胶和琼脂糖胶中完成的，聚丙烯酰胺胶适合蛋白和小的核酸的分离，琼脂糖胶适合大到蛋白复合物的分离。
因为没有一种方法会得到全部的信息，所以根据不同的物理特性，已发展出多种电泳方法。最常用的几种聚丙烯酰胺凝胶电泳技术如下：sds-page：
在分子筛的凝胶中根据蛋白质的分量进行分离。sds变性剂与所有蛋白结合，破坏结构、使其变性，所带的负电荷与其大小成正比，因此蛋白的迁移率只与蛋白的分子有关，与电荷和形状无关。native
page:
在非变性的条件下分离蛋白质，对于任何一种分离介质，迁移率都与蛋白的大小、电荷和形状有关。电泳分离后，可进下步分析蛋白的活性和结构。ief（等电聚焦）：
在ph梯度胶中根据蛋白质的等电特点进行分离，在蛋白质等电点处，蛋白所带电荷为零。根据后续蛋白的应用，可使用变性或非变性的胶。等电聚焦电泳的分辨率非常高。
蛋白质电泳
9楼：匿名用户
你的电泳不加蛋白marker的？
你的问题就是下面的条带附件有拖带和弥散的痕迹，如果有蛋白marker一起跑就更容易判断一些。如果蛋白marker正常不拖带，那就是你样品的问题。如果蛋白marker也弥散拖带那sds胶的原因就更大一些。
最大可能一般还是溶液的原因，有可能是蛋白所在缓冲液影响，也有可能是sds溶液时间太久了，或者ap质量不好。
蛋白质电泳的目的
10楼：匿名用户
蛋白质是有各种氨基酸组成的，做电泳试验是为了区分其中的不同氨基酸，根据每一个不同的峰值和波线还可以大概估算一下一些氨基酸的含量，可以用来评价该蛋白质的性质等等。
蛋白质的电泳速度取决于
11楼：匿名用户
c. 蛋白质分子量大小
d. 所带电荷多少
e. 电场强度
12楼：匿名用户
c蛋白质电泳（一般指sds-page）一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳的驱动力靠与蛋白质结合的sds上所携带的负电荷。在sds-page中，sds将蛋白质变性成直线分子并紧密包裹于其上，使得其所携带的电荷与蛋白分子量成了一定的比例，剩下的就和核酸电泳一样了。
所以本质还是分子量
13楼：风汐若
c蛋白质分子量大小。常用的电泳为琼脂糖凝胶电泳，分子量大的在电泳中跑的慢，而分子量小的跑得较快
14楼：濯友瑶肇螺
在sds-page中，剩下的就和核酸电泳一样了c
蛋白质电泳（
一般指sds-page）一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳，sds将蛋白质变性成直线分子并紧密包裹于其上，电泳的驱动力靠与蛋白质结合的sds上所携带的负电荷，使得其所携带的电荷与蛋白分子量成了一定的比例
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