1楼:魅尊狼王
od值一般都是几,取10的对数会出现负值啊 但要看你负多少了
怎样测细菌的生长曲线
2楼:du知道君
用od值必须注意,只有透光率在20%~80%之间,浓度与od值的关系才是呈线形的。2、由于用比浊法不能分辨死菌活菌,所以要防止在生长后期死菌与活菌相混合导致od值假增高,我们采用的方法是:第一次测定生长曲线的时候,在测定od值的时候,同时采用台盼蓝染色法作活细胞计数,从而得到一个修正数据。
以后在发酵时就可以只测od值来监测生长状况了。另外,也有人采用同时接种平板的方法得到修正值的,我觉得太麻烦花时间的说。
生长曲线怎么测定?
3楼:匿名用户
一:细菌生长曲线的测定
1 目的
1.1 了解细菌生长曲线特点及测定原理
1.2 学习用比浊法测定细菌的生长曲线
2 原理
将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中,在适宜的条件下进行培养,定时测定培养液中的菌量,以菌量的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,绘制的曲线叫生长曲线。它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。依据其生长速率的不同,一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。
这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。因此通过测定微生物的生长曲线,可了解各菌的生长规律,对于科研和生产都具有重要的指导意义。
测定微生物的数量有多种不同的方法,可根据要求和材料
3.1菌种
大肠杆菌
3.2培养基
肉膏蛋白胨培养基
3.3 仪器和器具
721分光光度计,比色杯,恒温摇床,无菌吸管,试管,三角瓶。
4 流程
种子液→标记→接种→培养→测定
5 方法
5.1种子液制备
取大肠杆菌斜面菌种1支,以无菌操作挑取1环菌苔,接入肉膏蛋白胨培养液中,静止培养18h作种子培养液。
5.2标记编号
取盛有50ml无菌肉膏蛋白胨培养液的250ml三角瓶11个,分别编号为0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20h。
5.3接种培养
用2ml无菌吸管分别准确吸取2ml种子液加入已编号的11个三角瓶中,于37°C下振荡培养。然后分别按对应时间将三角瓶取出,立即放冰箱中贮存,待培养结束时一同测定od值。
5.4生长量测定
将未接种的肉膏蛋白胨培养基倾倒入比色杯中,选用600nm波长分光光度计上调节零点,作为空白对照,并对不同时间培养液从0h起依次进行测定,对浓度大的菌悬液用未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定,使其od值在0.10.~0.
65以内,经稀释后测得的od值要乘以稀释倍数,才是培养液实际的od值。
6 结果
6.1 将测定的od值填入下表:
时 间(h) 对照 0 1.5 3 4 6 8 10 12 14 16 20
光密度值(od600)
6.2 以上述**中的时间为横坐标,od600 值为纵坐标,绘制大肠杆菌的生长曲线。
细菌的生长曲线如何确定,有何意义
4楼:匿名用户
细菌生长曲线(bacterial growth curve)是专指单细胞微生物的。它是将少量的单细胞微生物接种纯种到一定容积的液体培养基后,在适宜的条件下培养,定时取样测定细胞数量。以细胞增长数目的对数做纵坐标,以培养时间做横坐标,绘制的一条曲线,这条曲线称为细菌的生长曲线。
生长曲线一般包括了细菌的生长繁殖的4个时期:迟缓期,对数期,稳定期,衰亡期,反映了细菌数量、生长状况和代谢情况等多种重要指标,可以参照生长曲线,根据需要控制微生物的生长,来达到你需要的效果。
5楼:人生如夕阳
细菌的生长曲线有4个时期:调整期,对数期,稳定期,衰亡期.它表示了细菌生长过程中各个过程的情况,每个时期都有自己特定的优势微生物.
你可以参照生长曲线,根据你的需要控制微生物的生长,来达到你需要的效果.
6楼:呃呃呃呃这个嘛
确定方法:
将少量的单细胞微生物接种纯种到一定容积的液体培养基在适宜的条件下培养
定时取样(至少有5-6个时间点),用od600(optical density)测定细胞数量
以细胞增长数目的对数做纵坐标,以培养时间做横坐标,绘制一条曲线.
意义:生长曲线反映了细菌数量、生长状况和代谢情况等多种重要指标
怎样用分光光度法测菌体的生长曲线?要具体过程
7楼:华重楼
我们做过这个实验,我给你说点具体的(大肠杆菌为例):
1 配置培养基,就是牛肉膏蛋白胨培养基,要液体的。
2 按一定量分装到试管里(需要13*3支,3支一组),灭菌。
3 冷却后取大肠杆菌悬液,用移液枪分别接种到试管培养基中4 把12组放入37度摇床培养,取一组马上测od值,三个值取平均数,偏差太大者舍去
5 在2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24小时后分别测其他组。如果无法在特定时间测,也要在那一时间将该组在摇床取出冷冻保存,能测时取出测量即可
6 将得到的值换算后画图即可
我做过了不是很难,数据比较**,但图作出来还是有正确的走势的,是个时期都能显示出来
8楼:匿名用户
细菌生长曲线的测定
一、目的要求
了解细菌生长曲线的特点及测定的原理
学习用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
二、基本原理
少量的细菌,接种到一定体积的、合适的新鲜液体培养基中,在适宜的条件下进行培养,定时测定培养液中的菌量,以菌量的对数作纵坐标、生长时间作横坐标,绘制的曲线为生长曲线。一般生长曲线可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期(图8-4-1),生长曲线是微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。不同的微生物其生长曲线不同,即使是同一种微生物,在不同的培养条件其生长曲线也不同,测定在一定条件下培养的微生物的生长曲线。
在科学研究及生产上是非常有意义的。
大肠杆菌是微生物学教学和科研常用菌种,也是某些生物制品的生产菌种,常需要了解在一定条件下其生长曲线的特征。测定微生物的数量如本章实验1-3所介绍有多种不同的方法,可以根据要求和实验室的条件选用。本实验用光电比色计进行比浊,测定od值的方法、此法所需仪器不多,操作简便、迅速。
三、实验材料
(一)仪器
光电比色计、试管、锥形瓶、移液管
(二)培养基和菌种
肉膏蛋白胨培养液、大肠杆菌菌种
四、实验内容
(1)预先将大肠杆菌接种到肉膏蛋白胨培养液中,37°C振荡培养18h备用。
(2)把光电比色计的波长调至420 nm,开机预热10-15min。
(3)以未接种的肉膏蛋白胨培养液校正比色计的零点(以后每次测定都要重新校正零点)。
(4)取盛有150 ml无菌肉膏蛋白胨培养液的500 ml锥形瓶6个,分为两组,分别编号为1、2、3号和4、5、6号。各瓶加入培养18h的大肠杆菌培养液10 ml,37°C下振荡培养。
(5)于接种后的第0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20 h,分别用无菌移液管从各瓶中吸取培养液5ml,在光电比色计上测定od420值。若菌液太浓时,作适当稀释,使od420值在0.0-0.
4之间较好。经稀释后测得od420值要乘以稀释倍数,才是培养液实际的od420值。
(6)于培养第8h取样测定后,向其中一组(1-3号)每瓶加入肉膏胨培养液的5倍浓缩液10 ml作补料;另一组(4-6号)每瓶加入10 ml无菌水。继续振荡培养和定时测定。
放线菌的生长曲线怎么测定
9楼:匿名用户
由于放bai线菌是丝状细du菌,好氧,在摇
床液zhi体培养过程容易形dao成菌丝球,而呈回不均匀分布,所以不能用单细答胞细菌的测od值的方法绘生长曲线。
可直接测细胞干重。即设多个三角瓶,装量一样如250毫升三角瓶装20毫升,每个时间高三个平行。每隔一小时取样测放线菌细胞干重。
可用过滤法也可以用离心法,无菌水清洗再离心。重复两次。之后于摄氏105度干燥一小时或以上,重量不再改变为止。然后以细胞干重为y轴,培养时间为x轴绘曲线。
可测蛋白含量。用凯氏定氮法检测菌丝含氮量,折算成蛋白含量。菌丝收集与处理同上。
供参考。
10楼:匿名用户
1.心称其菌丝体干重
2孢子悬浮液进行计数,比浊法和平板计数法
什么是细菌的生长曲线有何意义
11楼:匿名用户
将少量细菌接种在恒定容积的液体培养基中,并置于适宜的条件下培养,然后定期取样测定培养基里的细菌群体的生长情况。如果以时间为横坐标,以细菌数目的对数为纵坐标作图,便可以得到反映细菌生长规律的曲线,这就是细菌生长曲线。
在生产实践中,细菌生长曲线有很重要的意义 。例如:处于对数期的细菌,生长繁殖速率快,代谢旺盛,因此,生产上常用这个时期的细菌作为菌种,以缩短生长周期。
如何利用比浊法测定细菌的生长曲线，应注意哪些问题
1楼 听风 一 实验目的 了解细菌生长曲线的持点及测定原理，学会用比浊法测定细菌的生长曲线。 二 实验原理 将一定数量的细菌，接种于适宜的液体培养基中，在适温下培养，定时取样测数，以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标，作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一...
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