1楼:欧阳侠
比浊法只能测定比较浓的菌液,通过吸光度值大概估算菌悬液中的菌量,并不是非常准确。活菌计数是通过培养后,计数细菌的菌落形成个数,要求菌液中的菌量比较低,否则培养后菌落长成一片就无法计数了。
活菌计数法和比浊法的比较 5
2楼:叶宸
活细胞计数法
常用的有平板菌落计数法,
是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。
取一定容量的菌悬液,
作一系列的倍比稀释,
然后将定量的稀释液进行平板培养,
根据培养出的菌
落数,可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高,是一种检测污染活菌数的方法,
也是目前
国际上许多国家所采用的方法。
使用该法应注意:
①一般选取菌落数在30~
300之间的平板
进行计数,过多或过少均不准确;②为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入o.
001%2,
3,5一氯化三苯基四氮唑
(ttc)
;③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验,是最常用的活菌计数法。
比浊法比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。
细菌悬浮液的浓度在一定范围内
与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度
(od值)表
示样品菌液浓度。
此法简便快捷,
但只能检测含有大量细菌的悬浮液,
得出相对的细菌数目,
对颜色太深
的样品,不能用此法测定。
3楼:彭山槐友颀
比浊法只能测定比较浓的菌液,通过吸光度值大概估算菌悬液中的菌量,并不是非常准确。活菌计数是通过培养后,计数细菌的菌落形成个数,要求菌液中的菌量比较低,否则培养后菌落长成一片就无法计数了。
平板计数法和比浊法测定绘出的生长曲线的有何差异
4楼:匿名用户
平板法得到的曲线比比浊法的位置低。
因为比浊法测的是细菌总量,其中包括死掉的细菌。但是平板法中只有活的细菌长成菌落。而且平板法中,虽然通常来讲一个菌落代表的是一个细菌细胞长成的,但是也可能有多个细胞长成一个菌落的。
所以平板法测出来的细菌数要比比浊法小。
如果用活菌计数法制作生长曲线,你认为会有什么不同?两者各有什么优缺点
5楼:匿名用户
应该是还有光电比浊法
6楼:永安当景天
什么两者啊,你才说了一个啊……
如何利用比浊法测定细菌的生长曲线,应注意哪些问题
7楼:听风
(一)实验目的
了解细菌生长曲线的持点及测定原理,学会用比浊法测定细菌的生长曲线。
(二)实验原理
将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定期及衰亡期四个时期,各时期的长短同菌种本身特征、培养基成分和培养条件不同而异。
比浊法是根据细菌悬液细胞数与混浊度成正比,与透光度成反比关系,利用光电比色计测定细胞悬液的光密度(即od值),用于表示该菌在本实验条件下的相对生长量。
实验设正常生长、加酸抑制和加富培养等三种处理,以了解细菌在不同生长条件下的生长情况。
(三)实验器材
1. 活材料:大肠杆菌(e.coli)。
2. 培养基和试剂:牛肉膏蛋白胨液体培养基14支(每支10 ml),浓缩5 倍的牛肉膏蛋白胨培养基1支。无菌酸溶液(甲酸:乙酸:乳酸=3:1:1)。
3. 器材:1 ml无菌吸管、摇床、冰箱、光电比色计、标签等。
(四)实验方法
方法一1. 接种:取13支装有牛肉膏蛋白胨培养液的试管,贴上标签(注明菌名、培养处理、培养时间、组号)。
按无菌操作法用吸管向每管准确加入0.2 ml的大肠杆菌培养液,接种后,轻轻摇荡,使菌体混匀。另一支不接种的培养管注明ck(对照)。
2. 培养:将接种后的培养管置于摇床上,在37 ℃下振荡培养。
其中9支培养管分别于培养的0、1.5、3、4、6、8、10、12和14 h后取山,放冰箱中贮存,待测定。加酸处理。取出经4 h培养的另二支培养管,按无菌操作法加入l ml无菌酸溶液,摇匀后放回摇床上,继续振荡培养,于培养8 h和14 h后取出放冰箱中贮存,待测定。
加富营养物处理。余下的二支培养管于培养6 h后取出,按无菌操作法加入浓缩5倍的牛肉膏蛋白胨培养液1 ml,摇匀后,继续进行振荡培养,于培养8 h和14 h后取出,放入冰箱中贮存,待测定。
3. 比浊:将培养不同时间、形成不同细胞浓度的细菌培养液进行适当稀释,使光密度值在0.
0-0.4范围内,以未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基调零点,在光电比色计上,选用400-440 nm波长的滤光片进行比浊,从最稀浓度的菌悬液开始,依次测定。
方法二将大肠杆菌接入装有牛肉膏蛋白胨培养液的小试管中(试管要能插入放比色杯的比色槽内)。37 ℃下振荡培养,分别在0、1.5 、3、4、6、8、10、12和14 h取出,以未接种培养液调零点,在光电比色计上比色。
比色时应自制一个暗盒将培养管和比色槽罩住,以形成一个暗室。
(五)绘制曲线
以细菌悬液的光密度值(od)为纵坐标,培养时间为横坐标,给出大肠杆菌在正常生长、加酸处理和加富培养三种条件下的生长曲线。
如果我们将上述培养0,1.5,3,4,6,8,10,12,14 h的细菌悬液用稀释平板测数法进行测数,测出不同时间的含菌数,以菌悬液比浊的光密度值为横坐标,以细菌的数量为纵坐标,绘制一标准曲线,这样在测得了任一培养时间的菌悬液光密度值后,就可以在此标淮曲线上查出含菌数。这种方法已在工业上广泛采用,它可以节省许多稀释平板测数的时间, 直接用比浊法测得的光密度值查标准曲线以了解各个培养时期的菌数消长情况。
比浊测死菌数还是活菌数
8楼:匿名用户
也不能完全说是死菌数还是活菌数,它测的是菌培养后生长的密度,所以很难说一定是死菌还是活菌,管碟法就是肯定测定对活菌的抑菌性。
9楼:匿名用户
可同时测出,若想测出活菌数,目前为止有三个办法,血球计数板法、稀释涂平板以及荧光定量pcr。