1楼：我就是n动人
说说它们的作用吧
目的基因就是能够产生
所需蛋白质的dn**段，比如抗虫棉就是植入能产生抗虫蛋白的目的基因。
启动子、终止子：启动子、终止子是目的基因dna上特殊排序的碱基。rna从启动子开始转录、翻译，到终止子结束。
整个过程完成后便产生所需蛋白质。如果不清楚rna的转录翻译过程，可以再细说。
标记基因：用于检测是否已经植入目的基因。植入的成功率其实很低，所以有必要选出已经植入的个体。
比如抗虫棉，判断是否植入，用种植后让虫子吃的方法判断周期太长。所以在目的基因前或后植入比如抗四环素基因（如果目的基因成功植入，抗四环素基因也一起植入），然后用四环素来淘汰植入失败的个体，剩下的都是还有目的基因的个体。除了抗四环素基因，还有荧光基因等，总之就是方便检测。
应该很详细了吧。。。
2楼：装子
北京鼎国生物提供载体构建实验室课题服务，包括其它实验室等课题服务，您可以咨询下
基因表达载体构建步骤
3楼：
你的问题真的不知如何回答。
超表达载体的构建：
设计引物加接头，扩增目的基因，连接到t载体上测序。正确无误，切下来，酶切载体质粒与目的基因连接，阳性克隆鉴定，测序无误后构建完毕
基因表达载体的构建所需的条件
4楼：红袖添香雨濛濛
作为重组基因的载体，
1，必须能够在宿主细胞中复制，使重组基因能够在宿主基因中复制，从而稳定保存下来，这是作为运载体的必须条件。
2.具有多个限制酶切点，从而可以使不同的粘性末端与之相连，增强实用性
3.拥有标记基因是为了方便质粒进入宿主细胞后容易被检测出来，以便检测目的基因是否导入受体。
下面说说 载体所需的序列结构
目的基因就是能够产生所需蛋白质的dn**段，比如抗虫棉就是植入能产生抗虫蛋白的目的基因。
启动子、终止子：启动子、终止子是目的基因dna上特殊排序的碱基。rna从启动子开始转录、翻译，到终止子结束。
整个过程完成后便产生所需蛋白质。如果不清楚rna的转录翻译过程，可以再细说。
标记基因：用于检测是否已经植入目的基因。植入的成功率其实很低，所以有必要选出已经植入的个体。
比如抗虫棉，判断是否植入，用种植后让虫子吃的方法判断周期太长。所以在目的基因前或后植入比如抗四环素基因（如果目的基因成功植入，抗四环素基因也一起植入），然后用四环素来淘汰植入失败的个体，剩下的都是还有目的基因的个体。除了抗四环素基因，还有荧光基因等，总之就是方便检测。
应该很详细了吧。。。
下列关于基因表达载体的构建描述错误的是（ ）a．基因表达载体的构建是基因工程的核心b．基因表达载体
5楼：幻世萌
a、基因表达载体使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用，是基因工程的核心，a正确；
b、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，b正确；
c、目的基因主要指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子，c正确；
d、由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，d错误．
故选：d．
关于基因表达载体
6楼：匿名用户
基因工程的目的就是要让一种生物的基因能够在另外一种生物体内表达，所谓的表达就是要合成蛋白质，所以目的基因要在受体细胞中转录成mrna,再由mrna翻译出蛋白质来。启动子的作用就是启动转录过程。你应该知道基因的表达是有选择性的，比如胰岛素基因只在胰岛b细胞中表达，基因之所以只在特定细胞中表达就是由基因前的启动子来调节的，所以构建的基因表达载体时，要在目的基因前加上能让这个目的基因在受体细胞中表达的启动子。
7楼：fu_娘子
当然要rna了。
首先，你要清楚。所谓【遗传信息】其实就是碱基对的排列顺序，也就是指dna分子的脱氧核苷酸的排列顺序。
所谓【遗传信息的表达】就是dna通过转录作用，将其所携带的遗传信息（基因）传给 mrna, 在三种 rna（mrna、trna和rrna）的共同作用下，完成蛋白质的合成。
而且，转录mrna还有翻译过程是为了合成蛋白质。这一步是要在细胞核外进行的。dna在细胞核内，且是双螺旋结构。
如果没有mrna把遗传信息带到核外，就只有拧成一股的dna，要怎么合成蛋白质。
8楼：梦之翼
根据中心法则，想要基因成功表达，需要mrna，mrna是rna的一种，是转录翻译必需。
请教一下 基因表达载体构建的原理和操作步骤
9楼：阿拉不知道
先回答你的问题，转入外源基因的农杆菌不能较载体，它本身是外源基因的受体，携带外源基因的质粒或者噬菌体才是载体。
你想问基因表达载体的构建，这个问题太大，而且表达载体多种多样，用处也很多，所以很难一下子概况。我只能大概说一下：
原理：将外源基因片段与载体连接（载体通常选用质粒或者噬菌体或其他病毒），将重组的载体转染受体细胞，使之整合入宿主基因组或者在稳定存在于胞质内，是宿主细胞能够表达载体上的外源基因，从而获得新性状或者新产物。
大概步骤：
1）从基因组或cdna上克隆得到完整的目的基因（至少包含cds区），通常在两端加粘性末端或重组位点
2）选择合适的表达载体（真核、原核、噬菌体、某些病毒、标记等）
3）将克隆得到的目的基因与载体连接
4）将重组载体通过某种手段转入受体，即宿主中（化学转染、脂质体、电转、显微操作等）
5）筛选阳性的宿主细胞并扩繁
如何构建一个基因的过表达载体
10楼：风翼残念
当拿到一个基因的dn**段后，就需要把它导入一个载体，一方面长期保存。另一方面也需要以载体为媒介将基因导入受体细胞中。基因表达载体的构建是基因工程的核心。
常用的载体有细菌质粒，噬菌体和动植物病毒。其中质粒载体最常用。所谓载就是一个很长的环状dna，携带一些基因，可以导入细菌中自我复制，也可以从细菌中提取出来改造。
现在我们就需要把sun片段连到一个载体，用vectornti打开，研究一下用哪个酶处理，这个载体需要用**a1这个酶切开，然后用sun连上，替换切下来的ccdb，这里要用到两个酶，一个**a1限制性内切酶切开，一个dna连接酶把新片段连上，植物转基因载体和这些酶都是非常常用的试剂。
载体构建好之后需要把它们导入大肠杆菌中复制，这里就要用到大肠杆菌的感受态了，十把构建好的载体和感受态混合，然后放到42度热水处理个1分钟，再冰上放个3分钟。
这时需要一些培养细菌的培养基来培养菌们，大肠杆菌这种菌很好养活，唯一需要注意的是，灭菌过后的培养基要小心保存。把在冰上处理过的大肠杆菌放到培养基中培养一天，为了防止没有转入载体的菌也混进来，我们在载体上加入了一个抵抗抗生素的基因。
这样我们在培养基中加入这种抗生素，在里面就只有需要的大肠杆菌能生长了。最后得到了上亿个携带着含有我们的sun基因的载体的大肠杆菌，这时就需要把质粒再提出来。
实验室里提质粒需要用专门的试剂盒，也可以简化一下，先把菌液离心让菌沉淀，然后再用水把菌打散，然后煮沸1分钟再离心，取上清，上清中加乙醇让dna析出，再离心让dna沉淀，最后用水把dna溶解。这样提出来的dna会有很多杂质以及细菌的基因组dna。
11楼：匿名用户
用限制酶分别切割目的基因两侧及运载体，然后在dna连接酶的作用下就形成了基因表达载体。
12楼：紫耀星之轨迹
首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同
一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键，再加入适量dna连接酶，催化两条dna链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组dna分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒dna分子结合，形成重组dna分子（也叫重组质粒）的。
构建基因表达载体的原因
13楼：臭粑耙
如果我没记错的话应该是生物选修三的内容吧，基因工程部分表达载体是必须构造的，一般为质粒（小型环状dna）如果没有表达载体你想要植入基因是不能实现的，先用限制性内切酶切开质粒，然后将基因插入，在用dna连接酶连接上，记住连接酶和限制酶作用的部位是相同的
然后植物的就用花粉管通道法，动物就用显微注射法，然后就等目的基因表达吧应该会产生所需的蛋白质等产物
纯手工，望采纳！
14楼：匿名用户
单独的基因片段转进细胞里面是没法进行表达的 质粒上有其表达所需的启动原件
基因表达载体如何构建
15楼：匿名用户
用限制酶分别切割目的基因两侧及运载体，然后在dna连接酶的作用下就形成了基因表达载体。
16楼：行路天霞英
首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同
一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键，再加入适量dna连接酶，催化两条dna链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组dna分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒dna分子结合，形成重组dna分子（也叫重组质粒）的。
17楼：尉原阮心诺
构建表达载体首先取决于你的实验目的，例如你的实验是否要求你的蛋白表达出来
必须可溶性蛋白，载体上面的标签决定了你的纯化方法，当然也决定了实验成本，等等一系列需求。
拿带标签的载体为例，因为带标签后可以增加蛋白质的可溶性，也为纯化带来了方便，一般都会采用。标签一般都是在目的蛋白的n端，这样就需要考虑读码框的问题，一定要与前面的读码框保持一致。
利用酶切连接的方法连入目的载体这个应该都知道，或者用gateway系统，非常方便，我就经常用gateway载体，构建起来速度呼呼的。
基本就是这些了吧，主要就考虑选择什么标签和读码框别错了。
有什么问题可以直接发信给我
载体的抗生素抗性基因有什么作用,基因表达载体上的抗生素抗性基因是怎么来的，有什么作用?
1楼 具有 基因就说明能够 产生 物质，比如 具有 抗生素基因 的微生物就能生产 抗生素 ，而具有 胰岛素基因 的细胞就能分泌 胰岛素 。 。。 具有 抗性基因就说明能够 抵抗 物质。 首先， 抗生素 是一种是由微生物 包括细菌 真菌 放线菌属。 基因表达载体上的抗生素抗性基因是怎么来的，有什么作用...
基因工程常用运载体是什么,基因工程中的运载体到底是指什么，是质粒，还是
1楼 南宫默言 现在所用的运载体主要有两类 一类是细菌细胞质的质粒，它是一种相对分子质量较小 独立于染色体dna之外的环状dna 一般有1 200 kb左右，kb为千碱基对 ，有的一个细菌中有一个，有的一个细菌中有多个。质粒能通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移，可以独立复制，也可整合到细菌染...
基因工程载体应具备的几个主要特征是什么
1楼 糖糖 基因工程对载体的要求 1 在宿主细胞内能独立复制。 2 有选择性标记。 3 有一段多克隆位点。外源dna插入其中不影响载体的复制。 4 分子量小，拷贝数多。 5 容易从宿主细胞中分离纯化。 2楼 匿名用户 最好有标志基因 而且能在宿主内稳定存在 基因工程中载体需要具备哪些特点 3楼 靠名...