1楼:
质粒在微生物体内的稳定性?这个一般都是靠选择重组酶系统缺失的菌株来实现。
我曾经构建的一组质粒在重组酶缺失(reca1)的克隆菌株里依然不稳定,
最后只好修改质粒的dna序列,把一部分容易发生同源重组的序列替换成同样功能的其它序列。
总之,无法**质粒稳定性,只能根据实验结果(包括测序结果)修改导致不稳定的部分序列。
2楼:匿名用户
要看什么质粒,增加何种稳定性? 一般来说跟质粒本身起源有很大关系,不过可以通过增加些辅助因子或者调控因子来稳定。
3楼:匿名用户
一楼的回答很经典,一般质粒如果用te而不是水或者pbs溶解的话低温保存2-3年肯定没问题的,如果另有其他要求,要具体情况具体分析
4楼:匿名用户
1.选择合适的宿主菌
2.选择合适的载体
3.选择压力
4.分阶段控制培养
5.控制培养条件
6.固定化
如何增加液压车左右的稳定性
5楼:小生是好男人
液压车是靠三个轮子的支撑达到平衡,如果要稳定性好,那么三点的宽度要增加,这样平衡肯定会增加的。
如何提高较高质量的质粒,减少rna和dna的污染
6楼:匿名用户
严格按照质粒抽提试剂盒的说明书进行操作,一般都能获得高质量的质粒。
如何确定质粒是结构不稳定还是**不稳定
7楼:
含有质粒载体的基因工程菌
稳定基因工程菌在传代过程中常 出现质粒不稳定的现象。 质粒不稳定可分为: **不稳定 结构不稳定
**不稳定:指工程菌**时出现一 定比例不含质粒子代菌的现象。 结构不稳定:指外源基因从质粒上丢 失或碱基重排、缺失所致工程菌性 能的改变
一、质粒不稳定产生的原因
常见**不稳定的两个因素:
⑴含质粒菌产生不含质粒子代菌的 频率;
⑵这两种菌比数率差异的大小。
对同一工程菌控制不同的比生长 数率可改变质粒的拷贝数: 低拷贝质粒工程菌产生不含质粒 子代菌频率高如增加工程菌质粒拷 贝数可提高稳定性; 高拷贝质粒工程菌产生不含质粒 子代菌频率低但对稳定性不利。
菌体生长数率对质粒拷贝数和质粒稳定性 有一影响。高生长数率时质粒拷贝数下降, 但稳定性增加。
如何提高过表达质粒转染效率 plate
8楼:芥末留学
1.感受态细胞的质量,比如超级感受态比普通感受态转化效率高很多;
2.质粒浓度及质量,连接产物因为质粒浓度低,纯度低转化效率比纯的质粒低很多;
3.转化条件,如热激冷激的温度时间等;
4.活化培养的条件,soc培养基优于lb培养基;
5.涂布用的培养基及抗生素浓度等。
为了提高基因工程菌的质粒稳定性,可采用哪些主要方法
9楼:鹅子野心
可采用的方法:
1.选择合适的宿主菌
2.选择合适的载体
3.选择压力
4.分阶段控制培养
5.控制培养条件
6.固定化
怎样测定质粒的不稳定性
10楼:香蕉葡萄西瓜
质粒缺失率的检测
1 平板稀释计数法:
将单菌落纯化的菌种转接至 100ml 液体选择性培养基中, 摇瓶培养 12h 后以 1%的接种量转入 100ml 液体非选择性培养基, 开始连续摇瓶培养试验。 每 12h 转种一次,接种量为 1%。 取样进行平板稀释检测质粒的缺失程度。
检测时,取菌液lml 用无菌水逐级稀释,取三个合适的梯度,分别涂在固体选择性培养基和非选择性培养基平板
上,每个处理三个重复。 倒置在 37℃培养箱中培养 24h,计算各皿中的菌落数。 由于缺失质粒的菌在含有四环素的培养基上不能生长,因此,将选择性培养基中的菌落数与非选择性培养基中菌落数进行比较,即可计算出质粒的缺失率。
1.4.2 平板点种法:
选择几个培养时间, 随机挑取在非选择性培
养基上生长的菌落, 分别点种在对应的选择性培养基和非选择性培养基平板上, 观察两种平板中菌体生长情况,计算两种平板上生长的菌数比例,与平板稀释计数法计算的比率进行比较, 验证质粒的缺失率 。
关于质粒的问题。
11楼:匿名用户
第一个问题你说的不对。(补充说明:质粒一般是细菌细胞质基质中的小型环状dna分子,应该无内显子和外显子的。
如图:第二个问题基因工程的产物是蛋白质。
如果说基因工程导入目的基因后市杂合子还算可以,因为目的基因是一个,整合到染色体上的dna上的话,算是杂合子吧。这样的遗传遵循孟德尔遗传规律。
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