1楼:叶宸
活细胞计数法
常用的有平板菌落计数法,
是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。
取一定容量的菌悬液,
作一系列的倍比稀释,
然后将定量的稀释液进行平板培养,
根据培养出的菌
落数,可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高,是一种检测污染活菌数的方法,
也是目前
国际上许多国家所采用的方法。
使用该法应注意:
①一般选取菌落数在30~
300之间的平板
进行计数,过多或过少均不准确;②为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入o.
001%2,
3,5一氯化三苯基四氮唑
(ttc)
;③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验,是最常用的活菌计数法。
比浊法比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。
细菌悬浮液的浓度在一定范围内
与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度
(od值)表
示样品菌液浓度。
此法简便快捷,
但只能检测含有大量细菌的悬浮液,
得出相对的细菌数目,
对颜色太深
的样品,不能用此法测定。
2楼:彭山槐友颀
比浊法只能测定比较浓的菌液,通过吸光度值大概估算菌悬液中的菌量,并不是非常准确。活菌计数是通过培养后,计数细菌的菌落形成个数,要求菌液中的菌量比较低,否则培养后菌落长成一片就无法计数了。
比浊法测生长曲线与活菌计数法有什么区别
3楼:欧阳侠
比浊法只能测定比较浓的菌液,通过吸光度值大概估算菌悬液中的菌量,并不是非常准确。活菌计数是通过培养后,计数细菌的菌落形成个数,要求菌液中的菌量比较低,否则培养后菌落长成一片就无法计数了。
微生物计数方法有哪些
4楼:匿名用户
测定微生物计数的方法有很多,主要有以下几种:
1.血细胞计数法
将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数.
①此法的缺点是不能区分死菌和活菌.
②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数.
③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化
2.稀释涂布平板法
原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落.培养基表面生长的一个菌落,**于样品稀释液中的一个活菌.
①这一方法常用来统计样品中活菌的数目
②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落.因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定.但不适于测定样品中丝状体微生物,例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等.
④此法若不培养成菌落,可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上,经固定染色后在显微镜下计数,这样又称涂片计数法.染色可用台盼蓝,台盼蓝能使死细胞染成蓝色,可分别计数死细胞和活细胞.
3.滤膜法
滤膜法是当样品中菌数很低时,可将一定体积的湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器.然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上(或一定面积上)的细菌数.
此法也可以通过培养观察形成的菌落数来推算样品中的菌数.例如测定饮用水中大肠杆菌的数目:将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养.
在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色,可根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数目.
此法也是统计样品中活菌的数目.
4.比浊法
原理是在一定范围内,菌是悬液中细胞浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可借助与分光光度计,在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度表示菌量.实验测量时一定要控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确.
5.显微镜直接计数法
在课本生物选修1生物技术实践p22中“除了上述活菌计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法.”这里说的显微镜直接计数,我认为应该是在稀释涂布的基础上不培养成菌落而通过染色的方法在显微镜下直接计数.再如滤膜法也一样,可以有两种情况.
另外,微生物计数法发展迅速,多种多样的快速、简易、自动化的仪器和装置等方法可以用来统计微生物的数目.
5楼:
膜转移法,在微生物计数的膜转移法中,关键是将滤膜转移到琼脂培养基上,它可能是二次污染的源头,从而导致假阳性结果。可通过德国赛多利斯的microsart @filter与microsart @media实现一次性无菌过滤单元与免触式膜转移,即在盖子中设有一个一体式胶圈,因此可以轻松地贴合滤膜并将其正确放置在琼脂平板上。转一圈,将其锁定,准备培养。
测定微生物的生长有哪些方法?各有何优缺点
6楼:句月听风
常用测定
微生物生长的方法有:
1)、称干重法.可用离心法或过滤法测定.优点:可适用于一切微生物,缺点:无法区别死菌和活菌.
2)、比浊法.原理:由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.优点:比较准确.
3)、测含氮量,大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致,根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量.
4)、血球计数板法.优点:简便、快速、直观.缺点:结果包括死菌和活菌.
5)、液体稀释法.对未知菌样作连续的10倍系列稀释,经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查mpn表,再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量.优点:
可计算活菌数,较准确.缺点:比较繁琐.
6)、平板菌落计数法.取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基,经培养后计算原菌液的含菌数.优点,可以获得活菌的信息.
缺点:操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素的影响.
比浊法测生长曲线与活菌计数法有什么区别
1楼 欧阳侠 比浊法只能测定比较浓的菌液,通过吸光度值大概估算菌悬液中的菌量,并不是非常准确。活菌计数是通过培养后,计数细菌的菌落形成个数,要求菌液中的菌量比较低,否则培养后菌落长成一片就无法计数了。 活菌计数法和比浊法的比较 5 2楼 叶宸 活细胞计数法 常用的有平板菌落计数法, 是根据每个活的细...
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