1楼:阿鲁巴星人
因为你所要检bai测的目的片段丰度du不同,zhi所以需要先做个预实验dao。
怎么做呢?
你先把版cdna进行梯度稀释,然
权后进行pcr,如果你的primer所扩增的ct值在15-25之间,那么就是很不错的稀释梯度啦~
以后实验久按照这个浓度加就好了
实时荧光定量pcr,cdna的加入量会影响结果的准确度吗
2楼:北京索莱宝科技****
两者没有必然的联系,准确度一般是仪器决定的,不同的仪器准确度都是不一样的,有的最低可以检测1个copy,有的最低可以检测10个copy
3楼:仉和璧祈曦
搜一下:实时荧光定量pcr,cdna的加入量会影响结果的准确度吗
q-pcr,关于cdna加的多少量的问题
4楼:匿名用户
这个没有明确的规定,一般用的最多的是1-100ng/ul(工作浓度)。浓度太低和太好都会影响扩增效率,但并不是绝对的。因为有一些基因表达水平极低,有一些在特殊情况下又极高。
qpcr很多时候仅仅反映的是几个样品之间的趋势,而不是绝对值。
实时荧光定量pcr加入的cdna的a260/280很低,有影响吗
5楼:匿名用户
没有bai影响,实时荧光定du量pcr (quantitative real-time pcr)是一种在zhidna扩增反应中,以荧光化dao
学物质测每次聚合版酶链式反应(pcr)循环
pcr实验中加cdna模板量是否要一致?
6楼:糟油酒丸
1。是的,一般加样量按质量算(微克),同组样品一定要加一样多,否则无法横向比较。加样体积应精确至小数点后一位。
2。不能。pcr本来就半定量了,不能再引入误差了。内参亮度不一致,没人会接受你的数据。
实时定量pcr扩增曲线怎么分析,实时定量PCR的结果是怎样分析的
1楼 南京金益柏生物科技 可能是模板浓度太低了，都没有达到阈值的，刚开始要做不同浓度梯度的，摸一下模板浓度条件 2楼 桑桑双子的老巢 你好，扩增曲线可以粗略地判断扩增效率。sybr green的双delta ct法要求目的基因和内参的扩增效率基本一致。如果不一致，需要对公式进行修正，部分qpcr仪的...
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