1楼：南京金益柏生物科技****
1. 我试过增加重叠区域的长度，但结果看起来却不尽然，80bp的重叠区域比200bp的扩增效果要好一些。我想原因有可能是重叠区域太长，可能会引起更多非特异的退火。
2. 通过改变热循环，能够起到些许作用。我的做法是先在50-60c扩增10次，延伸时间设为ac及bd的延伸时间；接下来将退火温度直接升至72c，用两步法扩增30次，延伸时间设为ad的延伸时间。
虽然仍然未得到理想的结果，最多的片段仍是ac及bd，长片段非常非常弱。
3. 像mybbff版主所说的，调整引物浓度我也试过。曾看到过韩健的专利技术tem-pcr，其中比较核心的一点就用到了调整引物浓度来实现片段的富集。
与温度改变相结合，将b和c的浓度降至极低，我做到了a,d与b,c相差50倍。我的设想是，将bc的浓度调至极低，让它在对数扩增期之前耗尽，接下来的72c，只允许tm很高的引物进行延伸。
4. 目前，我并没有得到理想的结果，长片段的量远不及ac及bd的浓度。我的想法是，在设计引物及重叠区域时，需要多加注意，引物必须要在tm值是有较大差距，a，d>b，c，而且a,d引物稍微长一点。
配合这些改变，再调整程序，我相信肯定能成功。
请教一个overlapping pcr方面的问题
2楼：南京金益柏生物科技****
因题干不完整,缺问题,不能正常作答。
3楼：涛涛涛
pcr技术交流，可以的啊 没问题
请教一个overlapping pcr方面的问题
4楼：南京金益柏生物科技****
具体点是要问什么呢？这个请教，得有具体问题才能回答吧
5楼：涛涛涛
多重pcr的相关问题 还是什么呢？
请教一个担保方面的问题
6楼：催天下
1、如果你朋友没有钱还或者名下也没有资产的话那就是得由你们几个去还；
2、所以你得要找到你的朋友跟他协商，毕竟你们当时也是出于好意帮他，这样反而害了你们几个；
3、所以如果跟你朋友协商不行的话那就只能是走法律程序，让债务人去起诉你们担保人。
7楼：楠
如无特别要求，默认为连带责任担保，借款人还不了，银行有权向你追要。
8楼：浅叹声凉
看是一般担保责任，还是连带担保责任，但是一般借款都是连带担保责任，你朋友不还，而且法律程序下无法执行借款人，法院会支持债务人对你们的执行请求，如果你们三个担保人协调好各自承担的还款义务，比如一人替他还10万，这样还好说，如果没有协调好，法院对你们三个进行执行，能执行谁就执行谁，直至该欠款结清
9楼：匿名用户
还了没有法律责任，借的人不还担保人要还的。
请教高人留学方面的问题。
10楼：朗阁教育
同学，您好~加拿大的不列颠海角大学的酒店管理及商科硕士是可以直接录取专科毕业的学生，但要求学生有至少毕业后1年以上的工作经验。
请教oppo维修方面的问题！
11楼：oppo客服
您好，请问您对oppo维修方面有什么疑问呢，我们会在第一时间为您解答。
若您还有其他的问题咨询，您可以进入oppo企业平台向客服咨询提问喔！
12楼：祖国和花朵
我现在用的是u529的，如果你的oppo用得差不多了就换了吧，只有有一点问题都会要求你花几百块把主板换掉的，不单独换配件
请教oppo维修方面的问题！
13楼：oppo客服
请问客服有什么可以帮到您的吗？
14楼：刘裕
建议拿到oppo售后服务中心去修理，有保障，而且也不贵，服务态度也挺好的！
15楼：躲在角落里哭涕
手机坏了，给手机店修修不就行了吗
请教oppo维修方面的问题！
16楼：oppo客服
请问您具体是指咨询哪方面的呢？能否详细说明下呢？
请教oppo维修方面的问题！
17楼：oppo客服
您好，请问您对oppo维修方面有什么疑问吗，我们会在第一时间为您解答哦。
若您还有其他的问题咨询，您可以进入oppo企业平台向客服咨询提问喔！
18楼：匿名用户
您的那个机器的屏幕就是200块！不过也奇怪您怎么会隔着后便的金属外壳还有主办把显示屏的排线搞断的！匪夷所思！
服你了老大！200大洋是全国统一的长沙售后没有乱收费，您那个不好更换排线也没有那种排线！
请教Overlapping PCR方面的问题
1楼 南京金益柏生物科技 因题干不完整 缺问题 不能正常作答。 2楼 涛涛涛 pcr技术交流，可以的啊 没问题 请教一个overlapping pcr方面的问题 3楼 南京金益柏生物科技 1 我试过增加重叠区域的长度，但结果看起来却不尽然，80bp的重叠区域比200bp的扩增效果要好一些。我想原因有...
请教关于西方经济学的问题
1楼 匿名用户 即使他的利润为零，他从耕作中的收益也弥补了他的这些机会成本 ，这里的零利润指的应该是经济利润，即总收益 总成本 机会成本 ，所以总收益与总成本相等也就是弥补了机会成本。需要注意的是，实际的会计利润并不为零。 机会成本的概念是为说明经营选择而引出的概念，用个广为人知的例子 盖茨上班路上...
请高人回答一下这个面试问题,面试问题 请高人指教
1楼 不感爱 公司的荣誉和集体利益上 2楼 匿名用户 请问 《一对按照有关规定招用的临时 工，转为企业劳动合同制工人的，其最后一次在本企业从事临时工的工作时间与被招收为劳动合同制工人后的工作时间一可合并计算为连续工龄。在当地实行养老保险社会统筹前的临时工期间的连续工龄可视同缴费年限 》该工人已经转为...