1楼:匿名用户
原代动物细胞培养: 1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验. 2、无菌操作.
操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素. 3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间. 贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组织块边缘尽量平整有利于细胞游离.
4、培养液的选择.不同的细胞有对培养液中营养的要求不同,根据所分离细胞的特性选择. 传代细胞培养:
1、无菌操作 2、控制消化时间 3、及时关注细胞生长状态
细胞培养液中蛋白用elisa怎么检测
2楼:人参__苦短
是细胞分泌的蛋白的话,直接在培养皿中铺入一定量的细胞,培养3天,细胞达到80-90%时,加药的时候换无血清培养基,作用完后收集细胞培养上清液,3000rpm,4℃ 离心10min,取上清液。elisa检测时,不同因子的稀释度,要事先做个预实验确定。对照组为新鲜培养液。
3楼:南京金益柏生物科技****
一般来说检测细胞内的蛋白质需要破碎细胞,非结构蛋白较易提取,破碎细胞后离心取上清即可。而结构性蛋白则需破碎脂膜提取蛋白,具体方法可参照膜蛋白提取的相关文献。提取的总蛋白需定量,然后以每mg或g的蛋白的相同浓度稀释后用于测定。
提取时注意要保持低温及加入必要蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)。
怎样检验感受态细胞转化是否成功,转化之后复苏感受态细胞能用加了氨苄的LB培养基吗
1楼 匿名用户 转化后铺含有相应抗生素的平板,如果有菌落长出,基本就是转化成功了。 怎样检验感受态细胞转化是否成功 2楼 匿名用户 当然是利用筛选平板了。 经典的就是蓝白斑实验。不过我们上学期做的红绿荧光蛋白的,直接用普通平板,到时观察有无荧光就行了。 3楼 匿名用户 将空载体转化上去,平板筛选,看...