1楼：匿名用户
实时定量的引物设计要求比较高，可以按普通引物设计的方法来做，但是设计时要注意扩增的片段不能太大，最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性，因为要是产生非特异性扩增的话，就不能准确的计量模板量了，这样就失去了实时定量的意义了
2楼：匿名用户
不是一回事 荧光pcr是为了检测mrna表达水平 所以只要在整条mrna上选取特异性好的一段两百bp左右的序列扩增就可以了 普通pcr是为了扩增特定的片段或者基因 设计在哪是要看你需要扩增哪部分的
3楼：匿名用户
荧光是定量判定起始模板浓度的..跟普通pcr引物是一样的 不同的只是反应中加入了探针或者燃料用于实时监控~！
普通rt-pcr与实时荧光定量pcr的引物有什么区别？
4楼：常映寒黄彦
区别http://baike.baidu.***/view/630506.htm
如果rt-pcr的扩增产物只有1,200bp，而且足够保守可以定位荧光pcr的目的基因
那就可以通用
5楼：奉俏丽奈鲸
实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间.同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能准确的计量模板量了,这样就失去了实时定量的意义了
6楼：僪文赋板惠
普通rt-pcr是半定量的。。即需要从条带的亮度判断量的相对多少。。
荧光定量pcr是定量的。。
因为两者反应体系，要求有很大区别，引物通常不能通用。除了上面提到的荧光定量pcr产物要控制在60-200nt之间，退火温度也比较高。。一般要达到60度
pcr,rt-pcr,实时荧光定量pcr的区别与联系
7楼：永恒的瞬间绽放
1、所说的pcr应该就是最常规的pcr，以dna为模板，通过上下游引物，实现dna的扩增。
2、rt-pcr一般情况下是指反转录pcr（reverse transcription），尽管有些资料上说实时荧光定量pcr也（realtime fluores-cence quantitative pcr）也简称rt-pcr，但是这是不对的，不推荐。
基本操作过程是将所提取的rna进行反转录，然后将所获得的cdna作为模板，设计引物进行扩增，是一种检测基因表达的常用方法。
3、实时荧光定量pcr也就是real-time pcr，其最大的作用是检测样品中的初始dna浓度。
至于三者的关系，rt-pcr和实时定量pcr应该都属于pcr，在rna实验中，这二者都会应用到。
例如你要比较2个组织中的某基因的表达差异，首先你要提取2个组织的总rna，然后通过rt-pcr检测该基因是否在2个组织中有表达，然后通过实时定量pcr测定该基因在2个组织中的表达量是否具有显著性差异。
扩展资料：
pcr原理
dna的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链dna在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在dna聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。
在实验中发现，dna在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制dna的变性和复性，加入设计引物，dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的体外复制。
但是，dna聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的dna聚合酶，不仅操作烦琐，而且**昂贵，制约了pcr技术的应用和发展。
耐热dna聚合酶-taq酶的发现对于pcr的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使pcr技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，pcr技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
pcr技术的基本原理类似于dna的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。pcr由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成：
①模板dna的变性：模板dna经加热至93℃左右一定时间后，使模板dna双链或经pcr扩增形成的双链dna解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板dna与引物的退火（复性）：模板dna经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板dna单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：dna模板-引物结合物在72℃、dna聚合酶（如taqdna聚合酶）的作用下，以dntp为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板dna链互补的半保留复制链，重复循环变性-退火-延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，
而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
普通rt-pcr与实时荧光定量pcr的引物有什么区别
8楼：匿名用户
实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间.同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能准确的计量模板量了,这样就失去了实时定量的意义了
实时荧光定量pcr和定量pcr有什么区别
1楼 匿名用户 实时荧光是反应荧光数值定量，普通那种是通过条带半定量，现在做半定量的已经很少了，除非是一些验证试验必须要图的 实时荧光定量pcr与普通pcr的区别是什么？结果有何异同？能说明的问题是什么？ 2楼 么破1自我 二者结果相同。都能说明生物体外的特殊dna复制的整个过程的扩增效率和溶解温度...
实时荧光定量pcr的重复性好是什么意思
1楼 为青生物 3个实验重复的ct值的标准差在0 167以内 abi的标准 ，我们一般在0 5以内就可以了 实时荧光定量pcr的重复性好是什么意思 2楼 她恨我如魇丶 实时荧光定量pcr的重复性好有两个含义 一次实验每个孔需要做3 6个重复孔 如果几个孔曲线比较一致 就是重复性好 三次不同的实验结果...