蛋白质组学主要包括哪些分析技术及各自特点

2020-11-26 11:02:03 字数 4953 阅读 3244

1楼:匿名用户

为**生物进程的分子机制,需要确定介导这个过程的蛋白质-蛋白质

间的相互作用。研究蛋白质间相互作用的主要技术总结如下:

一、酵母双杂交系统

酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道 基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、阵列化后则可用于大 规模蛋白质之间相互作用的研究。

在实际工作中,人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统等。angermayr等设计了一个sos蛋白介 导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。

此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。

二、噬茵体展示技术

在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的dna序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体 特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混 合物、在筛选过程中通过适当改变条件可以直接评价相互结合的特异性等优点。目前,用优化的噬菌体展示技术,已经展示了人和鼠的两种特殊细胞系的cdna文 库,并分离出了人上皮生长因子信号传导途径中的信号分子。

三、等离子共振技术

表 面等离子共振技术(su***ce pla**on resonance,spr)已成为蛋白质相互作用研究中的新手段。它的原理是利用一种纳米级的薄膜吸附上“诱饵蛋白”,当待测蛋白与诱饵蛋白结合后,薄 膜的共振性质会发生改变,通过检测便可知这两种蛋白的结合情况。spr技术的优点是不需标记物或染料,反应过程可实时监控。

测定快速且安全,还可用于检测 蛋白一核酸及其它生物大分子之间的相互作用。

四、荧光能量转移技术

荧 光共振能量转移(fret )广泛用于研究分子间的距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合,可定量获取有关生物活体内蛋白质、脂类、dna 和rna 的时空信息。随着绿色荧光蛋白(gfp)的发展,fret 荧光显微镜有可能实时测量活体细胞内分子的动态性质。提出了一种定量测量fret效率以及供体与受体间距离的简单方法,仅需使用一组滤光片和测量一个比 值,利用供体和受体的发射谱消除光谱间的串扰。

该方法简单快速,可实时定量测量fret 的效率和供体与受体间的距离,尤其适用于基于gfp 的供体受体对。

五、抗体与蛋白质阵列技术

蛋 白芯片技术的出现给蛋白质组学研究带来新的思路。蛋白质组学研究中一个主要的内容就是研究在不同生理状态下蛋白水平的量变,微型化,集成化,高通量化的抗 体芯片就是一个非常好的研究工具,他也是芯片中发展最快的芯片,而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展,比如肿瘤标志物抗体 芯片等,还有很多已经应用再眼就的各个领域里。

六、免疫共沉淀技术 免 疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术,其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于 pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白a(spa),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴 趣蛋白抗体—spa\|pansobin”,因为spa\|pansobin比较大,这样复合物在离心时就被分离出来。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物 四组分又被分开。

然后经western blotting法,用抗体检测目的蛋白是什么,是否为**蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的,符合体内实际情况,得到的蛋白 可信度高。但这种方法有两个缺陷:

一是两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;二是必须在实验前**目的蛋白是什么,以选择 最后检测的抗体,所以,若**不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。

七、pull-down技术

蛋 白质相互作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,最好通过免疫共沉淀(co-ip) 、pull-down技术或far-western法研究。pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、polyhis-或 gst-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。

通过pull-down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体 外传路或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。

蛋白质组学主要包括哪些分析技术及各自特点

2楼:匿名用户

为**生物进程的分子机制,需要确定介导这个过程的蛋白质-蛋白质间的相互作用。研究蛋白质间相互作用的主要技术总结如下:

一、酵母双杂交系统酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道 基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、阵列化后则可用于大 规模蛋白质之间相互作用的研究。

在实际工作中,人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统等。angermayr等设计了一个sos蛋白介 导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。

此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。

二、噬茵体展示技术在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的dna序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体 特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混 合物、在筛选过程中通过适当改变条件可以直接评价相互结合的特异性等优点。目前,用优化的噬菌体展示技术,已经展示了人和鼠的两种特殊细胞系的cdna文 库,并分离出了人上皮生长因子信号传导途径中的信号分子。

三、等离子共振技术表 面等离子共振技术(su***ce pla**on resonance,spr)已成为蛋白质相互作用研究中的新手段。它的原理是利用一种纳米级的薄膜吸附上“诱饵蛋白”,当待测蛋白与诱饵蛋白结合后,薄 膜的共振性质会发生改变,通过检测便可知这两种蛋白的结合情况。spr技术的优点是不需标记物或染料,反应过程可实时监控。

测定快速且安全,还可用于检测 蛋白一核酸及其它生物大分子之间的相互作用。………………

详细资料请参考:on

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蛋白质组学主要包括哪些分析技术及各自特点

3楼:安徽新华电脑专修学院

主要是看自己学对哪方面感兴趣,比如电脑方面,发展的都是比较火热的。仅代表个人意见!!!

基因质组学主要包括哪些分析技术及各自特点

4楼:匿名用户

传统技术是针对单个单个的蛋白啦,基因啦来研究的。好比面试选人,一个一个来。 组学的特点就是量大,批量基因,批量蛋白比较性的研究,好比选人时一个班一个班来比较挑选,效率高,容易发现新分子。

对功能解释、新功能、新药物等提供可靠的指标。

蛋白质组学的研究特点有哪些?蛋白质组学的研究内容有哪些?目前在蛋白质组学的研究中主要采用了哪些技术 10

5楼:落沙无痕

因为不太了解也不知道楼主想要回答的侧重点是什么,就去知网上找了三篇文献,pdf格式的

嗯,楼主可以稍花时间看一下,肯定我比简单复述有收获

蛋白质组学的研究特点有哪些

6楼:匿名用户

蛋白质组学是研究蛋白质组或应用大规模蛋白质分离和识别技术研究蛋白质组的一门学科,是对基因组所表达的整套蛋白质的分析。

包括蛋白质的表达水平,翻译后的修饰,蛋白与蛋白相互作用等,由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生,细胞代谢等过程的整体而全面的认识。

从整体的角度,分析细胞内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律的一个新的研究领域,也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。

7楼:船家摆渡

蛋白质是组**体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质的参与。一般说,蛋白质约占人体全部质量的18%,最重要的还是其与生命现象有关。[1-2]

蛋白质(protein)是生命的物质基础,是有机大分子,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。

它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的16%~20%,即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.

6~12kg。人体内蛋白质的种类很多,性质、功能各异,但都是由20多种氨基酸(amino acid)按不同比例组合而成的,并在体内不断进行代谢与更新。

什么是蛋白质组学?在技术上有何特点?

8楼:糟油酒丸

蛋白质组学二楼解释过了。技术上面,核心的是质谱技术,大致就是将一个纯蛋白质用胰酶消化之后,得到多肽片断根据其在电场中的偏转和位移确定其分子量与所带电荷,再综合所有多肽片断的特性与数据库中已知蛋白质进行对比,能对上的,就能够确认蛋白质身份。如此再检测过某个样本中的所有蛋白质之后,能够得到这个样本蛋白质组的详细信息。

当然在使用质谱分析之前还有将样本中不同蛋白质进行分离的关键步骤,我听过常用的是二维电泳。

9楼:匿名用户

一个细胞、组织、生物体基因组表达的全部蛋白质成为蛋白质组。而研究蛋白质组的学问成为蛋白质组学。这是一门庞大的学科系统!

基因组学与蛋白质组学,它们的特点和优势与传统的技术相比有哪些

10楼:莫彷徨

传统技术是针对单个单个的蛋白啦,基因啦来研究的.好比面试选人,一个一个来.

组学的特点就是量大,批量基因,批量蛋白比较性的研究,好比选人时一个班一个班来比较挑选,效率高,容易发现新分子.对功能解释、新功能、新药物等提供可靠的指标.

蛋白质组学主要包括哪些分析技术及各自特点

1楼 安徽新华电脑专修学院 主要是看自己学对哪方面感兴趣,比如电脑方面,发展的都是比较火热的。仅代表个人意见!!! 蛋白质组学的技术方法主要有哪些?哪些公司专业,急。 2楼 成都新东方烹饪学校 现在这个社会,学门技术是不错的。但是选择的时候要谨慎一些,毕竟很多行业还是不适合的,学技术看中的是能不能找...

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