用于重组dna技术的质粒载体在结构上有什么特点

2020-11-23 11:51:37 字数 5715 阅读 5204

1楼:北京索莱宝科技****

用于重组dna技术的质粒载体在结构上的特点:

环状dna分子能够自我复制,或整合到染色体上,随染色体复制。

有多个限制酶切点(便于切割)。

有标记基因(便于进行检验)。

有标签 便于最后分离纯化蛋白用。

上面有标记基因,便于重组后的筛选。

有复制起点,重组后可以复制让外源基因能复制。

质粒载体:

质粒载体 即,在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒dna序列中插入外源的目的基因,以质粒为载体,将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞,进行重组、筛选、扩增的过程。

质粒载体筛选特点:

选择质粒载体的要素是要了解可用到的载体的特征和**重组克隆所用于的实验。

所有的质粒载体都有三个共同的特征:一个复制子、一个选择性标志和一个克隆位点。复制子是含有dna复制起始位点的一段dna(ori),也包括表达由质粒编码的复制必需的rna和蛋白质的基因。

选择性标志对于质粒在细胞内持续存在时必不可少的。克隆位点是限制性内切酶切割位点,外源性dna可由此插入质粒内,而且并不影响质粒的复制能力,或为宿主提供选择性表型。

选择性标志:编码抗生素抗性的基因对质粒载体来说是最普遍的细菌选择性标志(如pbr322);主要的抗生素选择基因有:氨苄青霉素,氯霉素,四环素和卡那霉素四种。

转化的宿主菌一般都是抗生素敏感型的,获得质粒后,它能在有抗生素的平板上生长,从而达到筛选的要求。另一个显性的选择标志就是对λ噬菌体感染的免疫(也就是λ阻抑物)。有时也会用的一些隐性标志,如leub-(亮氨酸存在时就不能生长)。

简述质粒载体的结构特点和用途

2楼:2012_第一场雪

把一个有用的目的dn**段通过重组dna技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(vector)。细菌质粒是重组dna 技术中常用的载体。

质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。大多质粒载体带有一些多用途的辅助序列,这些用途包括通过组织化学方法肉眼鉴定重组克隆、产生用于序列测定的单链dna、体外转录外源dna序列、鉴定片段的插入方向、外源基因的大量表达等。

一个理想的克隆载体大致应有下列一些特性:(1)分子量小、多拷贝、松弛控制型;(2)具有多种常用的限制性内切酶的单切点;(3)能插入较大的外源dn**段;(4)具有两个以上的遗传标记物,便于鉴定和筛选。(5)对宿主细胞无害。

常用的质粒载体大小一般在1kb至10kb之间,如pbr322、puc系列、pgem系列和pbluescript(简称pbs)等。

3楼:士诚小人也

克隆载体要求有复制起点、有多克隆位点、有选择标记

表达载体在前者基础上要有强启动子序列和终止序列

什么是质粒,其特点是什么,有什么用途

4楼:这名也存在

质粒(pla**id)是存在于细胞质中,具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息,是闭合环状的双链dna分子。

其特点是质粒具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。

用途:细菌质粒是dna重组技术中常用的载体。载体是指把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。

将某种目标基因片段重组到质粒中,构成重组基因或重组体。

5楼:great三黑

质粒是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区dna原有的能够自主复制的较小的dna分子。

特点: 具有自我复制能力,具有标记基因,碱基互补。

用途:多用于基因工程,可用于重组dna,是一种理想的载体。

质粒有哪些特点使之在基因工程中广泛应用

6楼:匿名用户

作为载体。

质粒是载体中最重要的一种,存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状dna分子。把一个有用的目的dn**段通过重组dna技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(vector)。细菌质粒是重组dna 技术中常用的载体。

质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构。质粒还带有某些遗传信息,所以会赋予宿主细胞一些遗传性状比如标记基因。其自我复制能力及所携带的遗传信息在重组dna操作,如扩增、筛选过程中都是极为有用的。

另外,三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。

质粒的5个特点?

7楼:匿名用户

质粒(pla**id)是存在于细胞质中,具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息,是闭合环状的双链dna分子。

其特点是质粒具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。

用途:细菌质粒是dna重组技术中常用的载体。载体是指把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。

将某种目标基因片段重组到质粒中,构成重组基因或重组体。

质粒载体的四个基本特征

8楼:匿名用户

1、质粒载体

具有独立复制的能力。

2、质粒载体具有选择标记。

3、质粒载体具有独特的酶切位点。

4、质粒载体能够转化但是不扩散。

二、质粒的结构及性质

质粒是细菌染色体外的dna分子,存在于细胞质中,具有自主复制能力,使其在子代细胞中能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质,可自行丢失或人工处理而消除,如高温、紫外线等。

扩展资料质粒载体的使用:

1、基因过表达

一般是将目的片段整合到病毒或者质粒载体上,在目的基因上游加入调控元件,转染到宿主细胞中表达,使基因在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达,可以获取大量的目的基因产物,一般是蛋白质,用于研究或生产。

2、用作报告基因

质粒载体广泛应用于转录调控研究领域,包括启动子活性分析、mirna与靶标鉴定、转录调控因子鉴定及转录调控因子结合位点等实验,将转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染到宿主细胞,通过检测报告基因产物表达量,判断启动子和转录因子的结合情况。

9楼:匿名用户

1.具有复制起点。携带易于筛选的选择标记。具有多种限制性内切酶的切割位点。具有较小的相对分子质量和较高的拷贝数。

2.获得目的基因--目的基因与运载体结合--导入受体细胞--表达和鉴定

3.步骤一:从一只白面母绵羊(姑且称为a)的乳腺中取出乳腺细胞,将其放入低浓度的营养培养液中,细胞逐渐停止**,此细胞称之为“供体细胞”;步骤二:

从一头苏格兰黑面母绵羊(b)的卵巢中取出未受精的卵细胞,并立即将细胞核除去,留下一个无核的卵细胞,此细胞称之为“受体细胞”;步骤三:利用电脉冲方法,使供体细胞和受体细胞融合,最后形成“融合细胞”。融合细胞也能像受精卵一样进行细胞**、分化,从而形成“胚胎细胞”;步骤四:

将胚胎细胞转移到另一只苏格兰黑面母绵羊(c)的子宫内,胚胎细胞进一步分化和发育,最后形成小绵羊--多莉。

4.(有利的多了,随便写几个,下面是负面的)现代生物技术在带给人类新的社会、经济效应的同时,也可能带来潜在的负面影响。一方面,由于生物技术的对象是生命,使其因在人、动物、植物和微生物之间进行人为的相互转移,目前人类对这种基因调整后的结果尚无十足的把握’,因而其负面影响可能会超越以往任何一种技术,可能危及生命或环境;另4方面则与人类自身的问题有关,社会存在敌对势力和犯罪分子,很难确保他们对生物技术成果进行正确合理的操作和运用,进而危害人类和社会安全。

10楼:匿名用户

条件:①要具有限制酶的切割位点②要有标记基因(如抗性基因)以便于重组质粒的筛选③能够在宿主细胞中稳定存在并复制④是安全的对细胞无害

11楼:匿名用户

1,有多个限制酶切割位点;具有标记基因;能在宿主细胞中自主复制;不损害宿主细胞

2,不知道什么是基因克隆..这个是基因工程的步骤....

获取目的基因;把目的基因导入载体;把载体导入受体细胞;目的基因的检测与表达

3,4 123来不及回答的很好`

我只是补充一下,1,2条是在生物书上的..自我感觉比他的稍准确点..嘿嘿``

12楼:123来不及

1 具有自我复制的能力;有1到多个限制酶切割位点;有标记基因(抗药性基因);对宿主细胞无害

2 获取目的基因;构建表达载体;导入受体细胞;对目的基因的检测和鉴定

3 一个羊的体细胞的细胞核取出,放入另一只羊去核的卵细胞中,将这个新组建的细胞放入第三只羊的子宫内,生出的小羊就是“多莉”。这是利用核移植技术进行的克隆。

4 比如转基因技术培育的抗虫棉,可以提高棉花对害虫的抵抗能力,这是对人类有利的;但如果将克隆技术滥用的话,可能产生很多社会法律方面的纠分。

学文的不需对这一部分做深入了解。必修二中对基因工程有一些初步介绍,只把那个搞清楚就行了。

用于重组dna技术的质粒载体在结构上有什么特点

13楼:北京索莱宝科技****

重组dna技术的质粒载体的结构特点:

环状,具有多个限制酶切点,便于限制酶切割。

复制起点,重组后可以复制让外源基因能复制。

环状dna分子能够自我复制,或整合到染色体上,随染色体复制。

有标记基因(便于进行检验)。

有标签 便于最后分离纯化蛋白用。

载体dna分子大小应适合,以方便操作。

对受体细胞无害,不影响受体细胞正常的生命活动。

载体大小:

大的质粒(大于15kb)不会很好转化而且dna产量通常很低。在设计实验时要考虑到加入插入片段的最终载体大小,尽量用更小的载体。

兼容性当多于一个质粒载体必须同时存在于同一个细菌细胞中,这两个质粒的复制子必须是兼容的。当他们不能稳定地共存时,则认为这两个质粒是不兼容的。

选择/检测插入片段:

为了鉴别质粒中是否含有插入片段,对一些载体进行了工程改造,这样产生的多位点接头的分离会引起可见的表型。例如:lacz基因的应用(多位点接头的分离会引用白细胞的生长而抑制蓝细胞的生长,如pu19)和cccdb基因(调控细胞死亡)的应用(分离会促进细胞存活)。

筛选特征:

选择质粒载体的要素是要了解可用到的载体的特征和**重组克隆所用于的实验。

所有的质粒载体都有三个共同的特征:一个复制子、一个选择性标志和一个克隆位点。复制子是含有dna复制起始位点的一段dna(ori),也包括表达由质粒编码的复制必需的rna和蛋白质的基因。

选择性标志对于质粒在细胞内持续存在时必不可少的。克隆位点是限制性内切酶切割位点,外源性dna可由此插入质粒内,而且并不影响质粒的复制能力,或为宿主提供选择性表型。

选择性标志:编码抗生素抗性的基因对质粒载体来说是最普遍的细菌选择性标志(如pbr322);主要的抗生素选择基因有:氨苄青霉素,氯霉素,四环素和卡那霉素四种。

转化的宿主菌一般都是抗生素敏感型的,获得质粒后,它能在有抗生素的平板上生长,从而达到筛选的要求。另一个显性的选择标志就是对λ噬菌体感染的免疫(也就是λ阻抑物)。有时也会用的一些隐性标志,如leub-(亮氨酸存在时就不能生长)。