1楼：潇洒的热心网友
目的 优选地表水中浮游植物叶绿素a的提取方法。方法实验室制备发生水华的水样， 分别选用丙酮研磨法、冻融法、丙酮加热法、混合溶剂法4种方法提取叶绿素a， 进行叶绿素a含量的测定。结果 冻融法、丙酮加热法、混合溶剂法对样品中叶绿素a的提取效果及方法精密度优于丙酮研磨法（p<0.
05），差异有统计学意义；丙酮加热法和混和溶剂法耗时较短， 叶绿素a在丙酮和混合溶剂中稳定性差异无统计学意（p>0.05）。结论 丙酮加热法和混和溶剂法可为常用叶绿素a测量方法， 尤其适用于大批量水环境样品的测定。
影响准确测定叶绿素含量的因素有哪些
2楼：匿名用户
叶绿素a与叶绿素b含量的测定 实验目的和意义 叶绿素a与叶绿素b是高等植物叶绿体色素的重要组分，约占到叶绿体色素总量的75%左右。叶绿素在光合作用中起到吸收光能、传递光能的作用(少量的叶绿素a还具有光能转换的作用)，因此叶绿素的含量与植物的光合速率密切相关，在一定范围内，光合速率随叶绿素含量的增加而升高。另外，叶绿素的含量是植物生长状态的一个反映，一些环境因素如干旱、盐渍、低温、大气污染、元素缺乏都可以影响叶绿素的含量与组成，并因之影响植物的光合速率。
因此叶绿素含量a与叶绿素b含量的测定对植物的光合生理与逆境生理具有重要意义。 实验原理 叶绿素提取液中同时含有叶绿素a和叶绿素b，二者的吸收光谱虽有不同，但又存在着明显的重叠，在不分离叶绿素a和叶绿素b的情况下同时测定叶绿素a和叶绿素b的浓度，可分别测定在663nm和645nm（分别是叶绿素a和叶绿素b在红光区的吸收峰）的光吸收，然后根据lambert-beer定律，计算出提取液中叶绿素a和叶绿素b的浓度。 a663=82.
04ca+9.27cb （1） a645=16.75ca+45.
60cb （2） 公式中ca为叶绿素a的浓度，cb为叶绿素b浓度（单位为g/l），82.04和9.27 分别是叶绿素a和叶绿素b在663nm下的比吸收系数（浓度为1g/l，光路宽度为1cm时的吸光度值）；16.
75和45.60分别是叶绿素a和叶绿素b在645nm下的比吸收系数。即混合液在某一波长下的光吸收等于各组分在此波长下的光吸收之和。
将上式整理，可以得到下式： ca=0.0127a663-0.
00269a645 （3） cb=0.0229a645-0.00468a663 （4） 将叶绿素的浓度改为mg/l，则上式变为：
ca=12.7a663-2.69a645 （5） cb=22.
9a645-4.68a663 （6） ct=ca+cb=8.02a663+20.
21a645 （7） ct为叶绿素的总浓度 实验仪器及材料 实验材料： 菠菜或其它绿色植物 实验仪器及试剂： uv-1700分光光度计；天平；剪刀；打孔器；研钵；移液管；漏斗；量筒；培养皿；滤纸；丙酮；石英砂；caco3； 实验步骤 提取叶绿素 选取有代表性的菠菜叶片数张，于天平上称取0.
5g，（也可用打孔器打取一定数量的叶圆片，计算总的叶面积），剪碎后置于研体中，加入5ml 80%丙酮，少许caco3和石英砂。仔细研磨成匀浆，用滤斗过滤到10ml量筒中，注意在研钵中加入少量80%丙酮将研钵洗净，一并转入研钵中过滤到量筒内，并定容至10ml。将量筒内的提取液混匀，用移液管小心抽取5ml转入25ml量筒中，再加入80%丙酮定容至25ml（最终植物材料与提取液的比例为w：
v＝0.5：50＝1：
100，叶色深的植物材料比例要稀释到1：200）。 测量光吸收 利用722分光光度计或uv1700分光光度计，分别测定叶绿素提取液在645nm和663nm下的吸光度。
结果分析 将测得的数值代入到公式（5）（6）（7）中，计算出叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的浓度。最后要计算出单位叶片鲜重中叶绿素的含量： 叶绿素a含量(mg/g鲜重)＝ca×50ml（总体积数）×1ml/1000ml/l ÷0.
5g=0.1ca 叶绿素b含量(mg/g鲜重)＝0.1cb 总叶绿素含量(mg/g鲜重)＝0.
1ct 讨论： 1． 叶绿素在兰光区的吸收峰高于红光区的吸收峰，为何不用兰光区的光吸收来测定叶绿素的含量。 2． 计算叶绿素a与叶绿素b含量的比值，可以得到什么结论？
3． 比较阳生植物和阴生植物的叶绿素a和叶绿素b的含量以及比例，可以得到什么结论
测定植物叶片叶绿素含量有什么意义
3楼：防风网皇冠假
叶片叶绿素含量与光合速率、作物营养状况密切相关。
科研上常测定叶绿素含量以表征作物生长
状况, 生产上也往往依据叶色变化作为看苗诊断和肥水管理的重要指标。
主要功能为以下三点：
一,测定该植物的光合作用能力,也即健康状况二,用以辨别植物叶绿素含量的高低方便提取
三,作为数据研究以提高植物生存能力
植物叶绿素含量的测定, 大致可分为分光光度计法和活体叶绿素仪大类。
长期以来,人们都应用人rnon法测定叶绿素含量,利用叶绿素垮于有机溶剂的特性,将叶片在80界丙酮溶液中研磨提取,经过滤或离心后,用分光光度计测定叶绿素提取液的光密度值(od),根据定律计算叶绿素含量阁。但arnon法由于需要研磨和去残渣心过滤或离心,对于田间试验大量样品的测定带来很大的困难。
而且,由于研磨和过滤耗费时间较长,客观上又难以做到避光操作,会引起提取液中离体叶绿素的光分解、造成误差。
4楼：黑暗贝斯特
可以提高辨别植物利害的能力
测植物叶片内叶绿素含量的方法是什么？
5楼：匿名用户
用不同提取介质(丙酮、丙酮一乙醇混合液、95 乙醇)浸提不同植物材料，采用分光光度法测定提取液叶绿素含量，其吸收光谱在长光波段基本相同，因此可用amorl法公式计算叶绿素含量综合前人及本试验结果，选用丙酮和无水乙醇(2：1)混合提取液浸提叶绿素效果较好，沸水浴中可快速提取叶绿素，但也会破坏叶绿素．若能结合提取介质的选择，也可减少对叶绿素含量的影响，例如采用丙酮一乙醇混合液并加热，这可快速提取大批量植物样品,光会使提取液叶绿素水平下降，所以在浸提过程中要尽量避免光照。
6楼：匿名用户
用丙酮，滤纸，原理一样
叶绿素的提取液和层析液分别是什么
7楼：春素小皙化妆品
提取液：丙酮5ml。
层析液：石油醚。
在做叶绿体色素分离时用到,将叶片碾碎，浸出绿色液体，将液体与层析液（石油醚）混合，将滤纸一段进入混合液体，四种色素在层析液中的溶解度不同，在滤纸上留下4条色素带。由此观查出各种色素的相对含量和种类。
纸层析法一般用于叶绿体中色素的分离，叶绿体中色素主要包括胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，它们在层析液中的溶解度不同，溶解度大的随层析液在滤
纸上扩散地快，反之则慢；含量较多者色素带也较宽。最后在滤纸上留下4条色素带，所以利用纸层析法
能清楚地将叶绿体中的色素分离。
叶绿素提取后的色素带分布：最上端橙黄色为胡萝卜素，其次黄色为叶黄素，再下面蓝绿色为叶绿素a，最后的黄绿色为叶绿素b。
扩展资料
叶绿素含量的测定方法主要有紫外分光光度法、荧光分析法、活体叶绿素仪法、光声光谱法和高效液相色谱法。不过目前应用最为广泛的还是分光光度法。
叶绿素提取液的吸收光谱表明：有两个强吸收峰，分别在红光区和蓝紫区，不同提取溶剂和原料所得的叶绿素溶液的吸收光谱比较相似。
叶绿素a、叶绿素b的红区最大吸收峰分别在663nm、645nm附近，在蓝紫区分别为429nm、453nm附近。由于提取溶剂和原料不同，对叶绿素提取液进行光谱扫描后，所得的最大吸收值可能有较小范围的浮动。
高效液相色谱(hplc)定量检测叶绿素含量准确率较高，效果很好。用甲醇和丙酮作为流动相，体积比为80：20时，同时在流动相中加入质量分数为0.
1%的冰醋酸，流速为1.0ml/min。利用每一种色素的色谱峰面积进行定量，叶绿素a、叶绿素b的定量可通过外标法由工作曲线求得。
8楼：匿名用户
提取液：无水乙醇（体积分数为95%的也可以，但要加无水碳酸钠除水），或丙酮。 层析液：
由20份在60~90度下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成。93号汽油也可以代用。
低温下叶绿素含量减少的原理
9楼：墨陌沫默漠末
在低温中，酶促反应下降，故限制了光合作用的进行。
光合作用在高温时降低的原因，一方面是高温破坏叶绿体和细胞质的结构，并使叶绿体的酶钝化；另一方面是在高温时，呼吸速率大于光合速率，因此，虽然真正光合作用增大，但因呼吸作用的牵制，表观光合作用便降低。
植物本身对光抑制有一定程度的保护性反应。例如，叶子运动，调节角度去回避强光；叶绿体运动以适应光照强弱。
一些研究表明，叶绿素提取液在不同受热温度下，其降解速率曲线有明显的拐点，叶绿素在80℃以下，降解速度较慢，90℃以上降解速度急剧加快。总体而言，随着温度的升高，叶绿素降解的速率是逐渐加快的，只是较低的温度下降解速率不明显。
叶绿素酶是以叶绿素作为底物的，它是一种酯酶。脱镁叶绿素也是叶绿素酶的底物，酶促反应的产物是脱镁脱植叶绿素。叶绿素酶的最适反应温度在60～80℃范围，实验证明，叶绿素酶在80℃以上其活性下降，100%时已完全失活。
10楼：匿名用户
低温胁迫下叶绿素含量减少的原因很多，有科学家认为低温下叶绿素含量的降低不是由于色素合成的障碍，而是由于原有叶绿素受到破坏的结果。但是还有科学家则认为叶绿素含量的下降,可能是由于低温限制了叶绿素的合成而不是引起叶绿素的破坏。
1. 低温对叶绿素的合成的影响在叶绿素的生物合成进程中，需要一系列的酶促反应，故温度对其有很大的影响。一般叶绿素形成的最低温度为2~4℃，最适温度为30℃，最高温度约为40℃。
由于不同植物在系统发育过程中适应不同温度等自然条件，所以其叶绿素合成的温度范围也有所差异，低温抑制酶的活性，因而影响原叶绿素酸酯的形成。例如早春寒流过后秧苗发白、秋天叶子变黄等现象，都有低温抑制叶绿素的合成有关。氮和镁是叶绿素分子的组成成分，其缺乏时会影响叶绿素的合成。
同时，mg2+的浓度影响镁离子螯合酶的活性。另外，铁、铜、锰、氧等也影响叶绿素的生物合成。有研究证实，随着处理温度的降低，辣椒幼苗叶片氮含量逐渐降低。
随着辣椒幼苗叶片氮含量的增加(28℃/18℃和22℃/12℃处理)，叶绿素含量也相应增加；氮含量降低，叶绿素含量也降低(15℃/9℃和10℃/5℃的处理)。叶片氮含量与叶绿素含量之间呈正相关。而低温主要通过降低根系的细胞呼吸有关酶的活性来减弱细胞呼吸强度，进而影响根系细胞对矿质元素的主动吸收。
2.低温对叶绿素降解的影响
温度影响与叶绿素降解有关的酶的活性，目前研究较多的是叶绿素酶。叶绿素酶可以催化叶绿素的分解。但fiedor等曾报道叶绿素酶具有叶绿素合成和降解双重功能。
有研究证实，不同季节的银杏叶片中都存在叶绿素酶活性，不仅是叶片衰老时期。春季随着叶绿素含量的增加叶，绿素酶活性呈上升趋势，叶绿素含量达到最高值后，叶绿素酶活性逐渐下降，秋季活性最低。在银杏叶中春季酶的最适温度为30℃，秋季酶为30℃和40℃。
在秋季银杏叶中可能有2种同工酶存在，而春季仅有1种。春季时酶参与叶绿素的合成，秋季时酶活性下降，导致总活性下降；而另外1种同工酶催化叶绿素的降解，秋季时酶活性上升。可能由于同工酶的存在，从而促成了叶绿素合成与降解的动态平衡。
另外，小麦叶绿素酶在35~50℃之间活力较高，该酶催化叶绿素进行脱植基反应的最适温度为45℃，在温度低于35℃时，该酶也表现出较高的催化活力。在20℃左右叶绿素酶就能表现出一定的催化活力，仅为最高活性的45%。李远华等对茶树的研究发现，各季茶树新梢中，春茶新梢叶绿素酶活性最高，夏茶新梢次之，秋茶新梢的酶活性最低。
由此得出，如果说低温是通过降低叶绿素酶的活性来促进叶绿素的降解是相互矛盾的。另外，对于叶绿素酶的生理功能的争论主要表现在：一方面幼嫩的叶片和组织中存在较高的叶绿素酶活性，随着叶绿素的自然降解的发生，酶活性下降或维持低水平；另一方面在植物衰老促进剂作用下，叶绿素酶活性的增加伴随着绿色的消失。
有科学家等提出叶绿素酶是一种潜伏态酶，它在叶片衰老过程中仍可处于潜伏态，这种潜伏态也许就是叶绿素酶与其底物叶绿素在空间位置上的隔离造成的。在衰老叶片中保持脱镁螯合酶的活性需要不断有新的蛋白质合成。已有多位学者通过不同方法对该酶进行了分离纯化鉴定。
研究发现，叶绿素酶主要定位于叶绿体膜上，与底物叶绿素分子存在着空间隔离。另外，温度影响叶绿体的超微结构。低温可能破坏叶绿体的结构从而促进叶绿素降解
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