如何能制备出高分辨显带染色体标本

2020-11-21 21:45:37 字数 4635 阅读 9652

1楼:匿名用户

小鼠(或蟾蜍)中期染色体标本的制备  (1)称出小白鼠或冬眠复苏后青蛙(蟾蜍)的体重,然后按每克体重4μg的剂量腹腔注射秋水仙素溶液(注意用0.9%生理盐水配制成0.8g/l)。

  (2)间隔3~4h后处死小白鼠,迅速取下2块股骨,去两端骨头,用2ml注射器冲洗出骨髓细胞(2ml在37℃下预热的含肝素生理盐水)。  (3)静置片刻,待大块物质沉底后,小心地用滴管将骨髓细胞悬液移至刻度离心管中,以1000r/min离心10min。  (4)弃去上清液,留下0.

5ml,加入预热37℃的蒸馏水2~4ml。37℃水溶低渗10~15min,以1000r/min离心10min。  (5)弃去上清液,留下0.

5ml,加入新配固定液2ml,固定30min,离心(1000r/min)10min。  (6)重复步骤五1~2次(固定15~20min)。  (7)用剩下的0.

5ml固定液制成细胞悬液,空气干燥法制片,吉姆沙(giemsa)染色(40ml磷酸缓冲波加1ml吉姆沙染液)15~30min。蒸馏水冲洗,晾干后镜检,最后在油镜头下观察。可看到小白鼠有40条,20对染色体。

中期染色体是由两条染色单体组成。两条单体在着丝点处相连。由于着丝点区染色较浅故称内缢,也叫做主缢痕。

在细胞**期间,纺锤丝与着丝点相连,有助于染色体向两极移动。着丝点将染色体分为两臂:短臂和长臂。

在染色体臂上有时也能看到浅染内缢的节段,叫次缢痕(次缢痕与核仁形成有关,所以又叫做核仁形成区)。在染色体的一端,有时能看到次缢痕连一球形小体,叫随体。 根据着丝点位置的不同,可将染色体分为三种类型,即中着丝点染色体:

着丝点的位置在染色体的中部或近中部,染色体长、短两臂几乎相等;亚中着丝点染色体:着丝点位置偏于一端,染色体的两臂有明显的差别;近端着丝点染色体:着丝点的位置几乎位于染色体的顶端,染色体短臂极小,有的几乎不易观察到。

小鼠的染色体全部为端着丝点

什么是高分辨显带染色体?有什么意义?

2楼:匿名用户

细胞核内[1]由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体,是遗传物质基因的载体。 在生物的细胞核中,有一种易被碱性染料染上颜色的物质,叫做染色质。染色体只是染色质的另外一种形态。

它们的组成成分是一样的,但是由于构型不一样,所以还是有一定的差别。染色体在细胞的有丝**间期由染色质螺旋化形成。用于化学分析的原核细胞的染色质含裸露的dna,也就是不与其他类分子相连。

而真核细胞染色体却复杂得多,由四类分子组成:即dna,rna,组蛋白(富有赖氨酸和精氨酸的低分子量碱性蛋白,至少有五种不同类型)和非组蛋白(酸性)。dna和组蛋白的比例接近于1:

1。 正常人的体细胞染色体数目为23对,并有一定的形态和结构。染色体在形态结构或数量上的异常被成为染色体异常,由染色体异常引起的疾病为染色体病。

现已发现的染色体病有100余种,染色体病在临床上常可造成流产、先天愚型、先天性多发性畸形、以及癌肿等。染色体异常的发生率并不少见,在一般新生儿群体中就可达0.5%~0.

7%,如以我院平均每年3000新生儿出生数计算,其中可能有15~20例为染色体异常者。而在早期自然流产时,约有50%~60%是由染色体异常所致。染色体异常发生的常见原因有电离辐射、化学物品接触、微生物感染和遗传等。

临床上染色体检查的目的就是为了发现染色体异常和诊断由染色体异常引起的疾病。 染色体检查是用外周血在细胞生长刺激因子——植物凝集素(pha)作用下经37℃,72小时培养,获得大量**细胞,然后加入秋水仙素使进行**的细胞停止于**中期,以便染色体的观察;再经低渗膨胀细胞,减少染色体间的相互缠绕和重叠,最后用甲醇和冰醋酸将细胞固定于载玻片上,在显微镜下观察染色体的结构和数量。正常男性的染色体核型为44条常染色体加2条性染色体x和y,检查报告中常用46,xy来表示。

正常女性的常染色体与男性相同,性染色体为2条xx,常用46,xx表示。46表示染色体的总数目,大于或小于46都属于染色体的数目异常。缺失的性染色体常用o来表示。

人体内每个细胞内有23对染色体.包括22对常染色体和一对性染色体. 性染色体包括:

x染色体和y染色体。含有一对x染色体的受精卵发育成女性,而具有一条x染色体和一条y染色体者则发育成男性。这样,对于女性来说,正常的性染色体组成是xx,男性是xy。

这就意味着,女性细胞减数**产生的配子都含有一个x染色体;男性产生的精子中有一半含有x染色体,而另一半含有y染色体。精子和卵子的染色体上携带着遗传基因,上面记录着父母传给子女的遗传信息。同样,当性染色体异常时,就可形成遗传性疾病。

男性不育症中因染色体异常引起者约占2%~21%,尤其以少精子症和无精子症多见。 哺乳动物雄性个体细胞的性染色体对为xy;雌性则为xx。 鸟类的性染色体与哺乳动物不同:

雄性个体的是zz,雌性个体为zw。 鸭嘴兽有5对性染色体,25种性别。 都不好,或者说都很糟糕,那将会得一种或几种病,麻烦且无法**的病.

什么是高分辨显带染色体有什么意义

3楼:匿名用户

是染色体核型分析技术的一种,可以看到亚带等的情况。此种技术一般用于遗传学分析,临床上长用于血液病的辅助诊断、遗传性疾病等的辅助诊断等方面。

人体哪些细胞可以制备人类染色体标本

4楼:匿名用户

自主复制dna序列:自主复制dna序列具有一个复制起始点,能确保染色体在细胞周期中能够自我复制,从而保证染色体在世代传递中具有稳定性和连续性.

着丝粒dna序列:着丝粒dna序列与染色体的分离有关.着丝粒dna序列能确保染色体在细胞**时能被平均分配到2个子细胞中去.

端粒dna序列:为一段短的正向重复序列,在人类为ttaggg的高度重复序列.端粒dna功能是保证染色体的独立性和遗传稳定性.

(1)人类精子或卵细胞所含全部染色体为一个染色体组,即22条常染色体+x染色体或22条常染色体+y染色体,即②;

(2)人体细胞共有23对染色体,前1~22对为常染色体,每对常染色体所含的基因种类一般相同,只需测定其中一条染色体即可;第23对为性染色体,男性的性染色体为x和y,这两条性染色体具有不同的基因和碱基序列,因此都需要测定.所以,人类基因组的研究对象为22条常染色体+x、y染色体,即③.

为什么染色体标本的制备一般取自细胞**旺盛的组织

5楼:匿名用户

(1)观察有丝**主要观察**期染色体形态和数目.因此应选取**期细胞所占比例大的材料,即卵巢.

(2)由结果二可看出,注射质量分数为4×10-3的秋水仙素既能保证染色体形态正常,又使处于中期的细胞比例最高.

(3)在制备青虾染色体标本过程中,用秋水仙素固定细胞.

(4)由结果三可看出,四分体数为52的细胞数目最多,可确定青虾体细胞染色体数为104,四分体数多于或少于52的原因可能是染色体数目变异.

(5)既能发生有丝**,又能发生减数**的器官精巢或卵巢.在观察染色体时,应用碱性染料龙胆紫或醋酸洋红液染色,以便于观察.

制备染色体标本时为什么用秋水仙素处理

6楼:匿名用户

秋水仙素常被用作多倍体诱导剂,经处理的萌发种子或幼苗细胞染色体数会发生加倍。用秋水仙素处理**的细胞,虽然纺锤体被破坏了,但是两条姐妹染色单体照样分开。总之,秋水仙素虽然破坏了细胞中微管组装,阻止了纺锤体正常生成,使细胞**失去了动力**,从而在染色体复制后期细胞不能一分为二,但是染色体数却加倍了。

秋水仙素是**急性痛风第一线用药,但过量服用可能中毒。

动物染色体标本中造成染色体标本制作不佳的可能原因有哪些

7楼:

1)动物的选择,一般用小鼠,其繁殖能力强,易于饲养.我们常用的是它们的骨髓细胞和精巢,因其**指数较高,不用体外培养就可以得到**中期的细胞.

2)秋水仙素用量要注意,太多或处理时间过长,会导致染色体的过分凝缩或着丝点裂解,最终会引起染色体形态不正常,甚至被破坏或溶解.

3) 低渗处理很关键.低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关.低渗过度,细胞会破裂;低渗不足则染色体在一起,分散不开.

4) 离心速度或离心时间也能影响染色体标本的制备.离心速度过大或离心时间过长,则会引起细胞破裂;反之,离心速度过小或离心时间过短,则细胞沉降不下来,则会引起大量细胞的丢失.

5) 固定液要随用随配,固定彻底后再打散细胞团块,否则细胞容易破碎,染色体分散亦受到影响.

6) 载玻片要预冷.冷却不够,则会影响染色体的附着和铺展.

7) 用吸管吹散细胞时用力必须尽量轻柔,用力过大则会造成细胞破裂,而染色体也会弥散在溶液中,在随后的离心中将会丢失.

8) 滴片时的高度很重要,高度过低细胞不会破裂;过高则染色体过于分散甚至丢失,无法辨别出染色体的准确数量.

什么样的动物细胞可直接用于染色体标本制备 5

8楼:随风在风中

直接制备的话,就算是真皮层**旺盛的细胞,得到的**相也可能太少了,要制备比较多的染色体**相出来的话,可以对外周血液进行增殖后制备起来多一点的,你可以取大鼠或者兔子静脉血,肝素钠抗凝,用细胞培养基(1640培养基混合小牛血清、抗生素、植物凝集素)37摄氏度进行48小时增殖。

当然要是您的条件不成熟的话,可以用小鼠的骨髓进行直接的染色体制备,效果比真皮层细胞好的多。

9楼:匿名用户

染色体标本制备?不天理解你的具体意思,你可以采用果蝇的唾腺染色体

10楼:梦颖蓝嫣

必然是**旺盛的细胞啊,比如说表皮细胞。