蛋白纯化怎么去除核酸

1楼:匿名用户

精胺与dna结合后,达到纯化dna的目的,使dna在溶液中结构凝缩而发生沉淀,并可使单核苷酸和蛋白质杂质与dna分开

蛋白纯化怎么去除核酸

2楼:因为不懂才注册

1、根据所选蛋白的性质,选择合适的介质和条件,想办法把蛋白结合在柱子上,(有tag的话用这个方法最好了),然后用高盐(0.5-3m nacl)洗,一般会洗下来一个峰,就是被洗下来的核酸了。

2、试试在高盐条件下加mn2+,因为高盐可以让核酸和蛋白分离,而mn2+对核酸沉淀有一定的效果。

但是要十分小心的是,这类蛋白本身的天然性质就是要结合核酸的,有的时候核酸去除干净了,蛋白也沉淀了,所以没那么容易,很多小条件要结合所选的蛋白自己去摸索。

3楼:匿名用户

可以在大肠杆菌裂解的时候就加入核酸酶,通过核酸酶消化胞内的核酸,当核酸变成小片段的时候就很容易被去除掉。

利用阴离子交换层析 q 来去除核酸,q柱对于核酸有很强的吸附作用,需要很高的盐浓度才能洗脱下核酸,可以很容易的去除蛋白溶液中的核酸。

利用分子筛去除核酸,核酸是大分子物质,一般会在分子筛的外水体积中被去除掉。

核酸提取中除去蛋白质的方法主要有哪几种?

4楼:匿名用户

加入等体积的酚氯仿异戊醇(25:24:1)抽提之后乙醇沉淀核酸就可以了。

如果不想用酚也可以用核酸纯化试剂盒。

通过预习请你简单设计提取核酸过程中可用什么方法去除蛋白质,达到提纯核酸的

5楼:匿名用户

比方说硬脂酸钠,bai

可以加快du

蛋白质的溶解速率或zhi

增大蛋白质dao的溶解度。稳内

定剂是可以和蛋白质形容成不稳定络合物的试剂或是可以修饰蛋白质残基的试剂,可以防止蛋白质在接下去的实验操作中遭到破坏。析出剂(主要是无机盐类,如氯化铵等)可以让已经溶解的蛋白质析出加以提纯。缓冲剂(主要是弱酸及其盐,如nahco3/na2co3等)可以维持溶液的酸碱度。

这些是无论提取从什么原料中什么蛋白质都需要的东西达到提纯核酸。

需要大量纯化细胞表达的重组蛋白,但有dna残余,怎么去除dna影响 5

6楼:匿名用户

大多数dna水解酶都是蛋白质,,,会影响需要的蛋白

如果需要的蛋白分子量适当,凝胶色谱法就可以分离了啊。。。

7楼:后山草民

加点核酸酶溶解掉核酸,我们实验室蛋白纯化都是用柱子纯化,没有用过滤的,而且过滤的话纯化效果应该很差,杂质太多

8楼:匿名用户

不知bai道你用e.coil表达的蛋白有无

duhis标签,如果有就可zhi以考虑核酸

dao酶,降解dna后再用回imac金属螯合柱子纯答化,基本可以得到较纯的蛋白。如果没有his标签,也可以考虑其他柱子,离子交换之类的,如果怕核酸酶对你的蛋白有影响,也有核酸酶残留检测试剂盒indumy。希望对你有所帮助。