1楼:匿名用户
如何浓缩细胞
bai培养液中可du能存在的分泌蛋zhi
白有二种可能性dao:
1.你的细胞裂解和抽提专
过程可能出了问属题,你的蛋白是分泌蛋白,所以在信号肽被切掉前(蛋白分泌出细胞前)是嵌入在膜上,如果你使用的抽提液不够强的话,胞内蛋白可能没有溶出,而是在细胞碎片上,没有加入到wb膜上. 你的阳性对照可能本来是个胞内蛋白,所以没有问题,建议选用一个膜蛋白或其他分泌蛋白作为阳性对照.
2.还有一种可能就是你的蛋白在细胞内的浓度太低,而你的抗体检测灵敏度不高.
第一种可能性要大.
细胞培养液中蛋白用elisa怎么检测
2楼:人参__苦短
是细胞分泌的蛋白的话,直接在培养皿中铺入一定量的细胞,培养3天,细胞达到80-90%时,加药的时候换无血清培养基,作用完后收集细胞培养上清液,3000rpm,4°C 离心10min,取上清液。elisa检测时,不同因子的稀释度,要事先做个预实验确定。对照组为新鲜培养液。
3楼:南京金益柏生物科技****
一般来说检测细胞内的蛋白质需要破碎细胞,非结构蛋白较易提取,破碎细胞后离心取上清即可。而结构性蛋白则需破碎脂膜提取蛋白,具体方法可参照膜蛋白提取的相关文献。提取的总蛋白需定量,然后以每mg或g的蛋白的相同浓度稀释后用于测定。
提取时注意要保持低温及加入必要蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)。
细胞培养液中蛋白用elisa怎么检测
4楼:匿名用户
是细胞分泌的蛋白的话,直接在培养皿中铺入一定量的细胞,培养3天,细胞达到80-90%时,收取细胞培养上清液,离心去除沉淀,取上清测定浓度,用于elisa检测。对照组为新鲜培养液。
细胞培养液上清和血液中的细胞因子有区别吗
5楼:我哩岁月
有区别。细胞培养液是一种含有细胞分泌蛋白和死细胞的细胞培养液,而细胞因子是免疫反应、造血和炎症反应产生和维持所必需的蛋白质类物质。
细胞培养的上清中有目的蛋白需要用来刺激其他细胞,怎么去除培养基里的血清
6楼:
有区别。细胞培养液是一种含有细胞分泌蛋白和死细胞的细胞培养液,而细胞因子是免疫反应、造血和炎症反应产生和维持所必需的蛋白质类物质。
求助,我要收集培养细胞的培养基检测其中的分泌蛋白bmp-2,想用elisa的方法做。
7楼:滚远点儿
-20度保存半年之内问题不大。如果不放心可以-80度保存。避免反复冻融
血糖调节中的反馈调节,血糖调节中有没有存在反馈调节 比如胰岛素作用到胰岛b细胞 使胰岛素分泌减少
1楼 匿名用户 存在着负反馈调节。 希望能帮助你。 2楼 乐正桂环兰 血糖调节属于负反馈！ 反馈调节是针对一个过程而言的，该术语起源与物理上的信号调节！不单单在生物方面其它方面都可以用！在生物生理方面指一个过程的产物作用于催化该过程的酶，体液和神经调节都是如此，若正反馈产物加强酶活性，若负反馈产物减...