1楼:匿名用户
细胞免疫
荧光,copy破膜哪个好些
细胞免疫荧光的详细操作步骤
1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,pbs洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。
2,4%多聚甲醛固定20分钟,pbs洗三遍。
3,0.2%triton x 100通透10分钟,pbs洗三遍。
4, 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,pbs洗三遍。
5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,pbs洗三遍。
6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,pbs洗三遍。
7,最好用dapi染核,然后直接照荧光片。
8,蒸馏水洗掉pbs,甘油封片,指甲油封**的四周。
2楼:南京金益柏生物科技****
我们一般用0.2%的tritonx100,效果还不错
细胞鉴定是免疫荧光还是免疫组化
3楼:北京索莱宝科技****
免疫组化和免疫荧光都是蛋白定位的检测(也就是确定蛋白是表达在细胞核/浆/膜)。
免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜的现像和放大作用,在细胞,亚细胞水平检测各种抗原物质,并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。免疫组织化学技术现已有:
免疫荧光组织(细胞)化学技术、免疫酶组织(细胞)化学技术、亲和组织化学技术、免疫金银及铁标记免疫组织化学技术等。免疫荧光组织(细胞)化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算抗原的含量。以达到对抗原物质定位、定性、定量测定的目的。
细胞爬片做免疫荧光用什么封片
4楼:南京金益柏生物科技****
甘油不会凝固
bai,**不易长时
du间保
zhi存。指甲油、树脂对荧光dao有影响,而且指内甲油所含有容机溶剂对物镜不好。最好用专门的荧光封片剂。
aqua-poly/mount (polysciences, inc.) #18606 20ml $37.65
*histotec permanent aqueous mountant(serotec,immunological excelence)
(his002b)30ml $89
这两个是现成的,买来就可以用,但**较贵。
sigma mowiol 4-88 是颗粒,需自己配制,量大,**很便宜。
做细胞膜的免疫荧光要破膜吗
5楼:南京金益柏生物科技****
如果要检测的分子是在细胞膜上不需要加破膜剂。如果是胞质或分泌则需要,不加破膜剂的话荧光会很弱。
免疫荧光和免疫酶组化的区别,细胞鉴定是免疫荧光还是免疫组化
1楼 南京金益柏生物科技 免疫荧光分辨率高，免疫酶标敏感性高。如果想看清楚所染抗原的定位分布，建议用免疫荧光，如果只想检测到抗原的存在建议用免疫酶标。 一抗都一样，只有二抗偶联的荧光物质或酶的差别。当然检测方法也不一样。 细胞鉴定是免疫荧光还是免疫组化 2楼 北京索莱宝科技 免疫组化和免疫荧光都是蛋...