免疫荧光和免疫酶组化的区别,细胞鉴定是免疫荧光还是免疫组化

2020-11-25 05:11:08 字数 5091 阅读 2839

1楼:南京金益柏生物科技****

免疫荧光分辨率高,免疫酶标敏感性高。如果想看清楚所染抗原的定位分布,建议用免疫荧光,如果只想检测到抗原的存在建议用免疫酶标。

一抗都一样,只有二抗偶联的荧光物质或酶的差别。当然检测方法也不一样。

细胞鉴定是免疫荧光还是免疫组化

2楼:北京索莱宝科技****

免疫组化和免疫荧光都是蛋白定位的检测(也就是确定蛋白是表达在细胞核/浆/膜)。

免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜的现像和放大作用,在细胞,亚细胞水平检测各种抗原物质,并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。免疫组织化学技术现已有:

免疫荧光组织(细胞)化学技术、免疫酶组织(细胞)化学技术、亲和组织化学技术、免疫金银及铁标记免疫组织化学技术等。免疫荧光组织(细胞)化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算抗原的含量。以达到对抗原物质定位、定性、定量测定的目的。

免疫荧光反应与免疫组织化学有什么区别

3楼:匿名用户

免疫荧光技术(immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。

免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。 免疫组化技术近年来得到迅速发展。

50年代还仅限于免疫荧光技术,50年代以后逐渐发展建立起高度敏感,且更为实用的免疫酶技术。

石蜡切片免疫荧光与免疫组化一抗浓度有区别吗

4楼:北京索莱宝科技****

免疫荧光的一抗浓度一般高于免疫组化的一抗浓度,但是也要看具体情况:

因此免疫荧光一般采取二步法,而免疫组化中有biotin放大这一步。所以建议免疫荧光的时候重新摸索浓度,要是采用三步法可能不需要摸索了。另我们免疫荧光抗体一般用推荐浓度。

免疫荧光抗体浓度要根据免疫组化结果的强弱调整,如果较强,用相同浓度即可;如果组化阳性较弱,那么做荧光时要加大抗体浓度。至于免疫组化的抗体是否能做免疫荧光,其实是由组织类型及标本的固定方式决定的。一般组化为石蜡切片,荧光为冰冻切片或细胞爬片。

如果组化和荧光用的是相同的标本,那么抗体就能通用,毕竟组化和荧光的区别在于一抗的呈现方式,而非抗原抗体的结合。

能做免疫荧光的抗体可做免疫组化实验吗

5楼:南京金益柏生物科技****

免疫荧光也是组织切片,应该也是可以的,和免疫组化相比,只是二抗不同而已。

做免疫荧光的话,单克隆抗体和多克隆抗体都可以,一般来说首选是单克隆抗体。

6楼:宏聚变

不能,因为免疫荧光和免疫组化使用的切片一般都不同,一个是冰冻切片,一个是石蜡切片,所以切片上面的目的蛋白的修饰程度都不一样,所以很多情况下是不能通用的。

免疫荧光技术(immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。

免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。

7楼:匿名用户

免疫荧光和免疫组化使用的切片一般都不同,一个是冰冻切片,一个是石蜡切片,所以切片上面的目的蛋白的修饰程度都不一样,所以很多情况下是不能通用的。齐氏生物建议 你想如果都能通用,哪个公司的抗体说明书上还区别if和ihc啊,全都写上不是更好!所以选择抗体一定要在用途那一栏找到自己需要的具体用途。

8楼:落叶无声和落叶

一般抗体说明书都有详细介绍的,建议你仔细阅读说明书或者咨询下卖家。

9楼:dac沐

亲,不能做免疫组化的

10楼:匿名用户

个人觉得应该可以的,不过建议你可以咨询一下齐氏生物,比较可信可靠。

免疫过氧化物酶染色和免疫荧光有没有很大区别

11楼:匿名用户

1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同?

参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的。

2、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?

参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:

(1)选取一抗时要**于两种不同的动物,我用的是**于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkey anti-rabbit-fitc(绿)和donkey anti-rat-tex-red(红)。

(2)我的做法是两种一抗(chi抗体)同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索,我感觉一抗4度孵育过夜比较好,背景比较清晰。

(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片,阴性对照则分别是家兔和大鼠的igg,荧光标记物对照是pbs+荧光标记物。

(4)封闭血清与二抗**动物一致,我用的是10%的正常donkey血清。

(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。

做免疫荧光怎么看蛋白是在细胞核表达还是胞浆表达

12楼:南京金益柏生物科技****

复染细胞核,常规用过的是dapi进行细胞核复染(蓝色)。目的是为了鉴别目的蛋白的位置是胞核表达,还是胞质表达或胞膜表达。

一般来讲,如果是胞核表达,会和蓝色的细胞核颜色重叠;胞质或胞膜表达则不会重合,单独看目的蛋白的表达,会看到有个黑色的空洞的,尤其细胞图像更为明显。

从楼主的**看,貌似是在胞核表达(因为红色和绿色都很弱,在胞质没有看到,相反却和胞核重合了)

染色质量需要进一步提高。

13楼:匿名用户

免疫组化和免疫荧光都是蛋白定位的检测(也就是确定蛋白是表达在细胞核/浆/膜)。

免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜的现像和放大作用,在细胞,亚细胞水平检测各种抗原物质,并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。免疫组织化学技术现已有:

免疫荧光组织(细胞)化学技术、免疫酶组织(细胞)化学技术、亲和组织化学技术、免疫金银及铁标记免疫组织化学技术等。免疫荧光组织(细胞)化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算抗原的含量。以达到对抗原物质定位、定性、定量测定的目的。

免疫组化的作用

14楼:神马

实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理切片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。

其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。 根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法最常用。

免疫组化染色mlh1(+)msh2(+)pms2(+)msh6(+)是什么意思

15楼:匿名用户

mlh1(+)、msh2(+)pms2(+)、msh6(+),即微卫星稳定型大肠癌,提示适合于含氟尿嘧啶类药物的化疗方案,并且分化差是高危因素之一。

免疫组化应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。

免疫染色包括免疫荧光、免疫组化,免疫组化又称免疫细胞化学等。

扩展资料

免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:

1、恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断。

2、确定转移性恶性肿瘤的原发部位。

3、对某类肿瘤进行进一步的病理分型。

4、软组织肿瘤的**一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织**,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的。

5、发现微小转移灶,有助于临床**方案的确定,包括手术范围的确定。

6、为临床提供**方案的选择。

16楼:空舞皋淑静

这些检查结果为阳性,可以见于胃癌,结肠癌等疾病,具体需根据伴随症状分析,如果是有胃痛,胃胀,打嗝,反酸,可以见于胃癌,需做个胃镜检查,如果是左下腹部疼痛,腹胀,排便困难,可以见于结肠癌。

为什么检测某种蛋白的表达都用免疫组化和原位杂交l呢

1楼 百浩生物 原位杂交是检测基因的,如dna或者rna,不过这个技术有些落后,误差比较大,是比较老的技术了。而免疫组化是进行蛋白定位的,这两种技术可靠性都比较差,但因为操作简单,成本也不太高,在以前是比较常用的,免疫组化只能进行半定量。elisa可以精确定量,但对抗体要求高,临床的试剂盒可信,但科...