1楼:匿名用户
质粒是目的基因的载体啊
导入目的基因实质是导入包含目的基因的质粒
因为质粒可以稳定存在并复制
而单纯目的基因只是dn**段不能复制
2楼:匿名用户
质粒本来就是目的基因的载体
如果只用动物病毒的话那有可能是细胞融合的题目吧
将目的基因导入受体细胞的方法有那些?
3楼:听风
常用方法:基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌,枯草杆菌,土壤农杆菌,酵母菌和动内植物细胞等。其中容,对于细菌或植物细胞,常用质粒作为载体将目的基因导入细胞内;动物细胞则用显微注射的方法将目的基因导入动物受精卵的雄性原核中。
过程:用人工方法使体外重组的dna分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。例如,如果运载体是质粒,受体细胞是细菌,一般是将细菌用氯化钙处理,以增大细菌细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。
目的基因导入受体细胞后,就可以随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌的繁殖速度非常快,在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。
4楼:善解__人衣彡
导入植copy物细胞
:农杆菌转化法**基因抗虫棉用的是花粉管通道法);导入动物细胞:显微注射技术(注射入受精卵中);导入原核生物:
一般是将细菌用氯化钙处理,以增大细菌细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。
5楼:匿名用户
dna分子杂交技术
bai:
用同位素标记的目du的基zhi因片段作探针,与受体染色dao体dna进行杂交。
版近年来研究权者常采用pcr-southern杂交技术,即先对被检测的材料进行pcr扩增,然后再用目的基因的同源探针与扩增产物进行杂交。
再采用rt-pcr检测转录产物,即以受体总rna或mrna为模板进行逆转录合,然后再进行pcr扩增,如果得到特异的cdna扩增条带,则表明目的基因实现了转录。
最后还需在翻译水平上验证表达,常进行wester blotting,将经sds-page分离的蛋白质样品通过电转移到硝酸纤维素膜上,用待定蛋白质的初级抗体与膜上吸附的蛋白质进行免疫反应,再与酶标记的第二抗体反应,通过二抗上标记酶催化的显色反应,就可以鉴定目的基因表达的特异蛋白质产物。
将目的基因导入动物细胞用到的载体只能是病毒吗?质粒可以吗?
6楼:匿名用户
可以,运载体一般有三种,质粒、动植物病毒、λ噬菌体衍生物运载体有五个限制条件:
a.运载体的dna必须具有一个或多个限制性核酸内切酶的识别位点;b.有自我复制或整合到宿主细胞dna上同步复制的能力;c.
运载体dna必须带有标记基因,以便于识别;d必须对受体(宿主细胞)无害;e运载体大小必须合适
所以一般可直接用作运载体的质粒是重组质粒或改造质粒,而不是天然质粒
7楼:匿名用户
可以的。
用到病毒的方法叫感染,质粒则叫转染(化学转染或者电转染。
8楼:杨剑焕
质粒也可以~可是要看具体要导入的动物细胞是什么类型而决定哪个用哪种质粒~~一般是钙转或者电转!
目的基因导入动物细胞的方法是什么?
9楼:曼诺诺曼
目的bai基因导入
动物细胞的方du
法是显微注射法。导入zhi的介质可
dao以是质粒,也可专以是动物属
病毒侵染。显微注射法是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组、缺失、复制或易位等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。
扩展资料显微注射法转基因的方式
直接把重组过的dna注入受精卵的原核中,也就是将从胚胎提供者的输卵管中取得的受精卵移到倒置显微镜上的微量注射台上,然后利用固定吸量管固定住,之后注射针则依序穿过zonapellucida,ocytemembrane及malepronuleu**embrane后,将dna注入,注入时可以见到原核膨大。
以小鼠受精卵雄原核的显微注射为例,显微注射所使用的受精卵固定吸管(holdingpipette)及注射针制备很困难,除影响操作时间外,也是影响转基因效率及基因注入后之胚胎存活及转基因成功与否极其重要的因子。
10楼:紫嫣幽冰
动物用基因枪法将其导入,一般不用质粒,用病毒,因为病毒可以感染人体,易寄生
11楼:匿名用户
目的基因导入动复物制细胞的方法是显bai微注射法。导入的介质可du以是质粒
zhi,也可以是动物病毒dao侵染。
显微注射法是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组、缺失、复制或易位等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。
12楼:匿名用户
目的基因导入动物可以用质粒,也可以用动物病毒侵染
目的基因导入动物细胞的方法:显微注射法
13楼:匿名用户
不可以!...它们所起的作用不同,动物可用病毒,细菌等诱导,但绝对不是质粒
14楼:文森特医杰
显微注射。可以吧。不用。
生物:将目的基因导入动物细胞时,为什么先将含有目的基因的表达载体提纯,并使dna浓度保持在1~3μg/ml
15楼:阿鲁巴星人
如果你是高中生bai,先这么记着du吧,应该还没有高考考zhi这么高级的dao。
如果你回是大学生,那么是这样答
的:含有目的基因的表达载体在感染细胞之前,需要进行扩增,然后再提取载体。在这个过程中,载体经常会受到蛋白或者有机溶剂等的污染,而这些东西对于细胞是由毒害的,所以在感染细胞之前,要先除去载体中的这些杂质,就是纯化这一步。
dna(就是质粒载体)是溶解在水溶液或者buffer中的,然后与转染试剂混合,才能感染动物细胞,不然只是加入dna是没有用的。
如果你已经大学毕业,并且从事这一方面工作,那我就班门弄斧了:
不是所有的纯化试剂盒提取的质粒都可以达到很好的转染效果,需要不断地尝试和更换不同的试剂盒和抽提方法,选择最好的才行。
在动物细胞转染时,dna的浓度也是摸索出来的,dna也有细胞毒性,而且不同的转染试剂用量是不同的。
16楼:匿名用户
第一个问题:不提纯,你怎么知道哪个是目的基因,哪个是非目的基因,这会增加后续工作的困难。
第二、三个问题:对,很多分子生物学的操作只能在液体中进行,所以必须是dna溶解于液体中。
17楼:匿名用户
载体不纯会影响蛋白表达,浓度指的是dna在水溶液中的浓度,含有目的基因的载体在未导入细胞之前就是溶解在水中的。
18楼:匿名用户
具体实验要在缓冲溶液中进行,实验中目的基因与载体结合率不是100%,很低的。