紫外分光光度法测定维生素C的含量

2021-01-14 16:53:57 字数 847 阅读 2219

1楼:匿名用户

1 仪器与试剂

uv-260紫外分光光度计,vitc对照品及vitc片(规格:50mg)均由河南某药厂提供,硫酸溶液(ph=6)。   2 实验操作

2.1 标准曲线的绘制 精密称取vitc对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液,再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液(0~14μg/ml),分别测出其吸光度。

然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。

2.2 样品测定 取vitc20片,精密称定,研细,精密称出适量(相当于vitc50mg),置于100ml量瓶中,加硫酸溶液溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中,加硫酸溶液稀释至刻度,测出其吸光度a 样 。由标准曲线查出样品的浓度c 样品[3] 。

2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出c 样 。

vitc含量=c 样品 /c 样 或vitc含量=a 样 /k×c 样

注:k为标准曲线的斜率。

3 讨论

维生素c的还原能力强而易被氧化,特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此,选择硫酸溶液使成弱酸性。

测定时溶液ph的选择:维生素c的紫外最大吸收波长与溶液的ph值有着密切关系。在ph=2.

0时,溶液的最大吸收波长在245nm;在ph=12时,溶液的最大吸收波长在300nm;在ph=5~10范围时,溶液的最大吸收波长在267nm,况且在ph=6.0时吸收度值最大。所以,选择测定溶液的ph=6.

0。本方法对仪器的要求不是很高,适用于大批量样品的定量分析。但是,若仪器搬动或重新校正波长、或者更换仪器时,标准曲线必须重新绘制。