1楼：紫电
flag标签一般不影响细胞定位的，这个蛋白本身的细胞定位是**，融合之后还是**啊。
2楼：匿名用户
flag标签是重组蛋白的纯化标签，非定位标签
用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时，能用目的蛋白本身的抗体进行检测，但用flag抗体确无法
3楼：匿名用户
看你的flag抗体是否有问题，我是做抗体生产的，原来开发flag抗体时就会对其进行c端、n端、m端的qc检测，正常情况下三端都需要有识别，我担心你的抗flag抗体有可能不识别n端，还有一种可能就是你的融合蛋白不含flag标签。你可以从这两个方面入手解决，至于你运用什么实验设计，我想你应该完全没问题。预祝你能够顺利解决此疑问。
4楼：匿名用户
你能确定你的flag标签管用吗？如果flag标签失效了，什么都白搭。
5楼：快乐
做western时候 导致失败的因素太多了 楼主能再说的详细些吗？站内吧
flag标签作用 5
6楼：
可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的基因和flag-tag基因序列连接起来，可以连接在目的蛋白的c端或n端， 然后将整合后的基因转入细胞中或胚胎干细胞抑或受精卵中。
后续检测主要通过flag-tag这段肽链形成的免疫决定簇与其单克隆抗体的特异性结合来实现。 检测手段有免疫荧光(immunofluorescence)， 免疫印记(western blotting)等。
随着生物技术的发展，科研人员可以通过dna重组技术，构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白，进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化，以达到研究的需求。
扩展资料
flag-tag类别：
1、flag抗体-抗flag标签抗体
融合标签，如flag、gst等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。
2、gst抗体-抗gst标签抗体
随着越来越多的新基因的发现，基因融合蛋白表达体系以其在新发现蛋白研究中的显著优势已得到广泛应用。其中gst标签体系具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便，以及利于gst抗体制备等特点。
3、ha抗体-抗ha标签抗体
融合标签，如ha、his等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。常用的标签包括myc、ha、flag、his、gst等。
7楼：春素小皙化妆品
可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽（dykddddk）融合到目标蛋白。
flag-标签指一段由8个氨基酸残基组成的。flag标签可位于蛋白质的c端或n端，该系统已广泛应用于各种细胞类型，包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等，相应的flag标签抗体也被广泛应用。
由于flag标签系统的纯化条件是非变性的，因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。flag标签可以通过加入肠激酶处理去除，肠激酶专一识别该肽序列c末端的5个氨基酸残基。
扩展资料
在蛋白表达和定位研究中, 可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的基因和flag-tag基因序列连接起来，可以连接在目的蛋白的c端或n端，然后将整合后的基因转入细胞中或胚胎干细胞抑或受精卵中。
后续检测主要通过flag-tag这段肽链形成的免疫决定簇与其单克隆抗体的特异性结合来实现，检测手段有免疫荧光(immunofluorescence)，免疫印记(western blotting)等。
8楼：s小作者
flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（dykddddk），同时载体中构建的kozak序列使得带有flag的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。 flag作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：
· flag作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
· 融合flag的目的蛋白，可以直接通过flag进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白，并且纯化效率高。
· flag作为标签蛋白，其可以被抗flag的抗体识别，这样就方便通过western blot、elisa等方法对含有flag的融合蛋白进行检测、鉴定。
· 融合在n端的flag，其可以被肠激酶切除（dddk），从而得到特异的目的蛋白。因此现flag标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。
希望对你有帮助哦～＾＾～
我用flag单抗做western blot， 检测不到含flag标签的目的蛋白，你觉得是为什么呢？
9楼：匿名用户
这个flag标签抗体能检测到其他带flag标签的蛋白吗？
例如空载对照。如果空载也不行，那基本抗体就歇了。
如果有，就要看flag标签是不是正确表达了，如果表达不正确也会影响到检测的。