1楼:北京索莱宝科技****
阈值指指数增长期荧光信号的临界值,一般pcr仪会自动给出阈值,而ct指就是扩增曲线达到阈值时的循环圈数。
rt-pcr里的ct值到底代表什么意思?
2楼:北京索莱宝科技****
阈值指指数增长期荧光信号的临界值,一般pcr仪会自动给出阈值,而ct指就是扩增曲线达到阈值时的循环圈数。
rt-pcr中没有溶解曲线的原因是什么?(ct值有的)
3楼:匿名用户
溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的tm值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是taqman探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的taq酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是没有荧光值变化的,自然就没有溶解曲线了。但是假如你用的分子信标探针或者sybgreen燃料,情况就不同了。
rt-pcr,做的是bdnf的mrna表达,什么代表它的表达值?是△△ct还是2(-δδct)次方? 30
4楼:匿名用户
你说的表达值应该是相对的表达值还是绝对表达值?既然说到表达值应该是表达量的值,那么就应该是2(-δδct)次方。
5楼:匿名用户
2(-δδct)代表和对照相比的相对表达量,
荧光pcr扩增的ct值是什么意思
6楼:北京索莱宝科技****
荧光定量pcr技术中,有一个很重要的概念 —— ct值。c代表cycle,t代表threshold,ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数
rt-pcr---ct值在25-27之间,内参在19-22之间,可以吗?理想的ct值是多少?
7楼:匿名用户
ct值没有问题。扩曾效率要有相对的标准曲线(等比稀释样本)才能算
请问:做荧光定量pcr时,△△ct值是什么意思,它的计算公式是什么? 20
8楼:禾鸟
△△ct是荧光定量计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差别或变化比率。
ct=-1/lg(1+ex)*lgx+lgn/lg(1+ex),其中,n为扩增反应的循环次数,x为初始模板量,ex为扩增效率,n为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。△ct(n)=ct(目的基因)-ct(内参基因);△△ct(n)=△ct(n)-△ct(1)。
起始拷贝数越多,ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代ct值。因此,只要获得未知样品的ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。
扩展资料
荧光定量pcr的原理:
荧光定量pcr技术:在pcr反应体系中加入荧光基团,通过荧光信号不断累积而实现实时监测pcr全程,然后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在实时荧光定量pcr中,对全程pcr扩增过程进行实时检测,根据反应时间和荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。
实时荧光定量常用的荧光化学分类有sybr green i法和tag man探针法。
ct值:c代表cycle,t代表threshold,ct值的含义是每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。
9楼:一生一个乖雨飞
△△ct这是相对荧光定量的一个计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差别或变化比率。
ct= -k lgx0+ b(线性方程)用这个方程可以通过ct值算出样品的起始浓度
斜率=-1/lg(1+e)
扩增效率e=1, 斜率=-3.32
扩增效率范围:90%-110%
斜率范围:-3.1和-3.59之间
例如,想看a基因和b基因在某细胞系中表达量的差别,选取18s作为内参基因,就用a基因的ct值减去18s的ct值,得到△ct1,用b基因的ct值减去18s的ct值得到△ct2,然后用△ct1-△ct2=△△ct,而a,b基因的表达量差别为2(-δδct)次方。
当然这计算方法是基于荧光定量的数学计算模型简化来的,平时使用没什么问题,如果两个目的基因的扩增效率不一样,这个计算方法是不能用的。
10楼:匿名用户
ct= -k lgx0+ b(线性方程)用这个方程可以通过ct值算出样品的起始浓度
斜率=-1/lg(1+e)
扩增效率e=1, 斜率=-3.32
扩增效率范围:90%-110%
斜率范围:-3.1和-3.59之间
△△ct这是相对荧光定量的一个计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差别或变化比率
例如,想看a基因和b基因在某细胞系中表达量的差别,选取18s作为内参基因,就用a基因的ct值减去18s的ct值,得到△ct1,用b基因的ct值减去18s的ct值得到△ct2,然后用△ct1-△ct2=△△ct,而a,b基因的表达量差别为2(-δδct)次方,当然这中计算方法是基于荧光定量的数学计算模型简化来的,平时随便用用没什么问题,如果你的两个目的基因的扩增效率不一样,这个计算方法是不能用的。
11楼:匿名用户
我这边有关于△△ct法的相关文献以及推导公式,方便的话可以给我留一下你的邮箱
pcr的ct值越高说明什么,越低说明什么
12楼:匿名用户
定量pcr吗?
ct值越高,说明模板的起始含量越低。反之,起始含量越高。
注意:是‘反向’的。
rt-pcr里的ct值到底代表什么意思
1楼 北京索莱宝科技 阈值指指数增长期荧光信号的临界值,一般pcr仪会自动给出阈值,而ct指就是扩增曲线达到阈值时的循环圈数。 rt pcr里的ct值到底代表什么意思? 2楼 匿名用户 rt pcr是将rna的反转录 rt 和cdna的聚合酶链式扩增 pcr 相结合的技术。首先经反转录酶的作用从rn...
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