1楼：北京索莱宝科技****
氯仿: rna脱离dna及蛋白，从混合液中层析到水相.水相中的rna可用异丙醇沉淀浓缩.
接着用异丙醇进行二次沉淀，随后用乙醇洗涤沉淀，可去除所有残留的蛋白质和无机盐. rna样品中如果含有无机盐, 有可能对后续实验操作中的一些酶促反应产生抑制作用。
2楼：夏侯雪经霜
可以。因为提取原理是用氯仿萃取rna，而rna不溶于酒精，但氯仿和酒精胡溶。可行的办法是用大量的氯仿萃取，减少酒精的干扰，最后再用异丙醇沉淀。
rna提取中加入氯仿和异丙醇的原因
3楼：demon陌
作为有机溶剂变性蛋白，使其沉淀并通过离心除去，同时也通过变性作用抑制rnase活性。rna提取试剂中通常含有苯酚，苯酚微溶于水，抽提烷之后水相里有痕量的酚，如果不除去会损伤核酸，需要通过氯仿把水相里参与的苯酚抽提掉。
rna是以dna的一条链为模板，以碱基互补配对原则，转录而形成的一条单链，主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达，是遗传信息向表型转化过程中的桥梁。
4楼：一二三
氯仿的作用有多个方面，一是作为有机溶剂变性蛋白，使其沉淀并通过离心除去，同时也通过变性作用抑制rnase活性；二是rna提取试剂中通常含有苯酚（trizol主要成分就是苯酚，很多自己配试剂提的方法也用苯酚，抽提蛋白时也会用到苯酚），苯酚微溶于水，抽提烷之后水相里有痕量的酚，如果不除去会损伤核酸，需要通过氯仿把水相里参与的苯酚抽提掉；三是作为溶剂抽提样品中的一些脂溶性杂质（比如油脂、脂溶性色素等），起到一定除杂作用
rna提取过程中氯仿萃取之后加无水乙醇析出沉淀太多，漂洗离心时，上述部分沉淀无法溶解，为什么呢？
5楼：暮秋阳光
加完氯仿是用异丙bai醇析出rna，我们
du是用75%的乙醇zhi（用depc水来配）dao洗涤，乙醇是去各版种离子的，无水乙醇不能权去除离子，洗完之后一定要完全晾干，然后加入适量的depc水，在60度中水浴，直至溶解，如果部分沉淀不能溶解，那可能是含有其他物质，你可以将溶解的部分吸到另一个灭菌的管子中，这部分应该是会有溶解有rna的。
triozl大量提取rna，该加氯仿时加成无水乙醇，还有的救吗？ 10
6楼：此时情绪
再加相比之前更多一点的氯仿试试，我觉得乙醇更容易溶在氯仿里，就算水相含有一些乙醇也应该不影响，因为后面还要加异丙醇沉淀rna。你试试看吧。
7楼：匿名用户
我有点不理解，trizol法处理，匀浆，裂解细胞后，加氯仿的作用是会使溶液分成有机相和水相。rna算离子化合物，溶于水相，所以加了氯仿后按理说应该还是在水相里。你先加的无水乙醇这种有机溶剂，对氯仿溶液的分成的影响大不大我不确定，你可以试试。
8楼：匿名用户
我觉得可以继续加氯仿试试，应该还是在上清里
triozl大量提取rna，该加氯仿时加成无水乙醇，还有的救吗
9楼：匿名用户
可以。因为提取原理是用氯仿萃取rna，而rna不溶于酒精，但氯仿和酒精胡溶。可行的办法是用大量的氯仿萃取，减少酒精的干扰，最后再用异丙醇沉淀。
提rna时加完氯仿忘记静置会怎样
10楼：匿名用户
提rna时加完氯仿忘记静置会不分层。
氯仿是分子量比较大的有机溶剂，在提取rna时氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离。提rna时加完氯仿静置时间短会导致分层不明显，忘记静置会不分层。
提rna时trizol使样品匀浆化，细胞裂解，溶解细胞内含物，同时因含有rnase抑制剂可保持rna的完整性，在加入氯仿离心后，溶液分为水相和有机相，rna在水相中，取出水相用异丙醇沉淀可**rna；用乙醇沉淀中间层可**dna；用异丙醇沉淀有机相可**蛋白质。
提取rna时，细胞裂解后加入氯仿的原因是什么
11楼：匿名用户
就那植物
来说吧！原理是一致的。方法不同。
1植物组织提取基因组dna
一、材料
幼嫩叶子。
二、设备
移液器，冷冻高速离心机，台式高速离心机，水浴锅，陶瓷研钵，50ml离心管（有盖）及5ml和1.5ml离心管，弯成钩状的小玻棒。
三、试剂
1、提取缓冲液ⅰ：100mmol/l tris·cl, ph8.0, 20mmol/l edta, 500mmol/l nacl, 1.5% sds。
2、提取缓冲液ⅱ：18.6g葡萄糖，6.9g二乙基二硫代碳酸钠，6.0gpvp，240ul巯基乙醇，加水至300ml。
3、80:4:16/氯仿:戊醇:乙醇
4、 rnasea母液
5、其它试剂：液氮、异丙醇、te缓冲液，无水乙醇、70%乙醇、3mol/l naac。
四、操作步骤：
1. 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液ⅰ, 60℃水浴预热。
2. 幼苗或叶子5-10g, 剪碎, 在研钵中加液氮磨成粉状后立即倒入预热的离心管中, 剧烈摇动混匀, 60℃水浴保温30-60分钟(时间长,dna产量高), 不时摇动。
3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 颠倒混匀(需带手套, 防止损伤**)，室温下静置5-10分钟, 使水相和有机相分层(必要时可重新混匀)。
4. 室温下5000rpm离心5分钟。
5. 仔细移取上清液至另一50ml离心管,加入1倍体积异丙醇,混匀,室温放置片刻即出现絮状dna沉淀。
6. 在1.5ml eppendorf中加入1ml te。用钩状玻璃棒捞出dna絮团,在干净吸水纸上吸干,转入含te的离心管中,dna很快溶解于te。
7. 如dna不形成絮状沉淀,则可用5000rpm离心5分钟, 再将沉淀移入te管中。这样收集的沉淀,往往难溶解于te,可在60℃水浴放置15分钟以上，以帮助溶解。
8. 将dna溶液3000rpm离心5分钟, 上清液倒入干净的5ml离心管。
9. 加入5μl rnasea(10μg/μl), 37℃ 10分钟, 除去rna(rna对dna的操作、分析一般无影响，可省略该步骤）。
10. 加入1/10体积的3mol/l naac及2×体积的冰乙醇,混匀,-20℃放置20分钟左右,dna形成絮状沉淀。
11. 用玻棒捞出dna沉淀,70%乙醇漂洗,再在干净吸水纸上吸干。
12. 将dna重溶解于1ml te, -20贮存。
13. 取2μl dna样品在0.7% agarose胶上电泳, 检测dna的分子大小。同时取15μl稀释20倍, 测定od260/od280, 检测dna含量及质量。
[注意] 5g样品可保证获得500μg dna, 足供rflp、pcr等分析之用。
提rna加氯仿时为什么要剧烈**
12楼：匿名用户
加入氯仿可以剧烈**，以保证两相混合均匀。这样氯仿能充分的变性沉淀蛋白，和抽提水相中杂质。
13楼：匿名用户
不能剧烈**啊，轻微**就好。氯仿是分子量比较大的有机溶剂，在提取rna时，氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离。dna提取过程 有机相中主要是酚和蛋白结合，从而使得蛋白和dna脱离，dna进入水相。
但是在rna的提取过程就要避免蛋白和dna脱离，否则dna会释放到水相。不管有酚也好，没有酚也好，氯仿本身也对蛋白有变性作用，剧烈的**，很容易使得dna的亲水基团，与水相接触。所以不要剧烈**。
rna提取可用什么代替氯仿?
14楼：梦里笑谈梦中事
可以选下极性比较大的溶剂试试如dmf，
15楼：
做实验没有这么替的。没有就等有了再做
16楼：匿名用户
应该都是要用氯仿的。