1楼：匿名用户
色谱法（chromatography）又称色谱分析、色谱分析法、层析法，是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。
1、色谱的起源
色谱法起源于20世纪初，1906年**植物学家米哈伊尔茨维特用碳酸钙填充竖立的玻璃管，以石油醚洗脱植物色素的提取液，经过一段时间洗脱之后，植物色素在碳酸钙柱中实现分离，由一条色带分散为数条平行的色带。由于这一实验将混合的植物色素分离为不同的色带，因此茨维特将这种方法命名为chromatography，这个单词最终被英语等拼音语言接受，成为色谱法的名称。汉语中的色谱也是对这个单词的意译。
色谱法茨维特并非著名科学家，他对色谱的研究以俄语发表在**的学术杂志之后不久，第一次世界大战爆发，欧洲正常的学术交流被迫终止。这些因素使得色谱法问世后十余年间不为学术界所知，直到1931年德国柏林威廉皇帝研究所的库恩将茨维特的方法应用于叶红素和叶黄素的研究，库恩的研究获得了广泛的承认，也让科学界接受了色谱法，此后的一段时间内，以氧化铝为固定相的色谱法在有色物质的分离中取得了广泛的应用，这就是今天的吸附色谱。
高效液相色谱分析法中为什么采用梯度淋洗
2楼：千葉雅之
梯度淋洗，就是程序洗脱，简称就是梯度。
主要就是变化流动相比例。主要目
的就是为了分离样品，其次还有减短分析时间，改善峰型，提高灵敏度等等。
比如这个梯度，流动相a是磷酸盐水相，b是乙腈保留时间（min） 乙腈（%）
01020 3030 3032 1040 10相当于这种状态
就是从0-20min这段时间，逐步往里面加入乙腈，这样的话有助于极性相似的物质分离。如果是里面有一个极性比较小的物质，那么乙腈量增大，这个物质出峰时间就会提前。减短了分析时间。
高效液相色谱分析法中为什么要采用梯度淋洗
3楼：匿名用户
当被分离组分较复杂时，等梯度洗脱难以将组分很好的分离并完全洗脱，就得考虑梯度洗脱了。液相色谱的梯度洗脱作用类似于气相色谱的程序升温，总之，为了达到更好的分离效果。
高效液相色谱分析法中为什么要采用梯度淋洗
4楼：深水◇静流
梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗提。
在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩分析间周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。
从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。
梯度洗脱的优点：1.缩短分析周期；2.提高分离能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。
梯度洗脱的原理： 流动相由几种不同极性的溶剂组成，通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性，使每个流出的组分都有合适的容量因子k'，并使样品种的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。
梯度洗脱特点： 提高柱效改善检测器的灵敏度当样品中的一个峰的k'值和最后一个峰的k'值相差几十倍至几百倍时，使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定，必须使用恒流泵，否则难获重复结果。
5楼：匿名用户
朋友，为了节省分析时间
高效液相色谱分析法中为什么要采用梯度淋洗
6楼：匿名用户
因为物质性质差别大，用单一浓度不能分离所有杂质；或时间太长，后面的峰就会变形
高效液相色谱为什么要进行purge工作?
7楼：匿名用户
这个不是绝对的。因为在液相色谱工作的时候，进入气泡是特别麻烦的事，尤其是进入检测器里，有时很难弄出去。而进气泡最容易的地方就是流动相那个过滤头，几乎99%的情况的气泡都是从那进去的，所以通过泵进入柱子前的时候，加了一个purge阀，如果有气泡的话，可以直接排出去了，还有就是有时更换系统的时候，由于如果有色谱柱的时候压力过大，柱子不能承受，所以只能用1-2ml/min的流速来冲洗系统，但如果打开purge阀的话，那流速就可以设置为2-3甚至是5ml/min，那样的话，转换系统的速度就非常快了，节约了 大量的时间。
在高效液相色谱中梯度洗脱装置的作用是什么
8楼：匿名用户
梯度洗脱装置分两种：
高压梯度：用两台高压输液泵将两种溶剂输入
低压梯度：在常压下将两种溶剂（或多元溶剂）混合，然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。
梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。
但在使用中，梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。
梯度洗脱时应注意:
1、注意各溶剂间的互溶性。
2、对溶剂的纯度要求更高（影响重现性）。
3、注意梯度变化时系统压力的变化，防止超出限度。
4、梯度结束后，用初始流动相冲洗，使柱子平衡一段时间（再生），使系统回复到初始状态。（梯度周期）
5、低压梯度要注意脱气，混合后容易产生气泡。
6、容易出现鬼峰，应作空白试验。
7、梯度选择时尽量几相之间相变化要小,否则不易平衡。
8、梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器（如紫外吸收检测器或荧光检测器），而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器（如示差折光检测器）。
9、要注意水相中盐的浓度，防止在有机相提升过程中盐的析出。
高效液相色谱**率怎么做
9楼：demon陌
相同的样品取两份，其中一份加入定量的待测成分标准物质；两份同时按相同的分析步骤分析，加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果，其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标**率。
加标**率的测定, 是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术.对于它的计算方法, 给定了一个理**式：
加标**率= (加标a测定值－a测定值)÷加标量×100%.
以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
10楼：那个啥仰望
可以采用
加标**的方法来测**率。
1、a加标**：
相同的样品取两份，其中一份加入定量的待测成分标准物质；两份同时按相同的分析步骤分析，加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果，其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标**率。
2、加标**率的测定, 是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术.对于它的计算方法, 给定了一个理**式：
加标**率= (加标a测定值－a测定值)÷加标量×100%.
扩展资料：
加标**注意事项：
1、加标物的形态应和待测物的形态相同。
2、加标量应和样品中所含待测物的测量精密度控制在相同的范围内，一般情况下作如下规定：
（1）加标量应尽量与样品中待测物含量相等或相近，并应注意对样品容积的影响；
（2）当样品中待测物含量接近方法检出限时，加标量应控制在校准曲线的低浓度范围；
（3）在任何情况下加标量均不得大于待测物含量的3倍；
（4）加标后的测定值不应超出方法的测定上限的90%；
（5）当样品中待测物浓度高于校准曲线的中间浓度时，加标量应控制在待测物浓度的半量。
3、由于加标样和样品的分析条件完全相同，其中干扰物质和不正确操作等因素所导致的效果相等。当以其测定结果的减差计算**率时，常不能确切反映样品测定结果的实际效果。
11楼：匿名用户
做加标**
a加标**：相同的样品取两份，其中一份加入定量的待测成分标准物质；两份同时按相同的分析步骤分析，加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果，其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标**率。
加标**率的测定, 是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术.
对于它的计算方法, 给定了一个理**式： 加标**率= (加标a测定值－a测定值)÷加标量×100%.
12楼：匿名用户
**率是检验方法准确度的，**率的范围要包含待测样品的含量范围，还要在你的限行范围之内。
如果你的a是存在于一个混合物里的，比如a+b+c，且b+c为已知并可获得的（比如一个混粉a为活性成分，b+c为混合辅料），可以做普通**率，a在混合物里的含量是多少，基本可以知道，我们以这个含量或者理论量作为100%的含量，然后用80%的a和100%的b+c混合，做3份，100%的a和100%的b+c混合，做3份，120%的a和100%的b+c混合，做3份，一共是9份样品，分别测**率，然后算平均**率，最后求rsd%
如果在混合物里，除a外的组分无法获得（比如中药提取物，猪脑提取物等）或者a为纯品没有其他混合物，那就要做加样**率，用一份已知含量的a+a对照品使加标后的总a含量80%.100%.120%）计算方法，同上面了。
13楼：匿名用户
精密称取已知a含量的样品5份，精密加入a对照品，按“供试品溶液的制备”进行操作测定a，计算**率。加标**率= (加标a测定值－a测定值)÷加标量×100%.
14楼：匿名用户
soucang。。。
高效液相色谱梯度时间设置问题
15楼：匿名用户
只用设一个b泵（0.5%冰醋酸）的流动
相梯度：
0到15nin,b泵用15min流动相配比从90%降到80%；
15nin后到30min,b泵15min流动相配比保持80%不变；
30nin后到40min,b泵用10min流动相配比从80%降到70%；
程序结束。（a泵随着b泵配比自动调整）