1楼：匿名用户
是在真核生物细胞中的基因表达载体的组件么？
如果是，组件是启动子，终止子，复制原点，目的基因，标记基因
2楼：匿名用户
启动子、核糖体结合位点、克隆位点、转录终止信号，以及dn**段复制起始位点
寻找带标签的真核表达载体！ 15
3楼：匿名用户
这个是要看你想用哪套系统了。
这个没你想象的那么简单。现在常用的真核表达系统有三种：毕赤酵母表达系统、杆状病毒-昆虫细胞表达系统、腺病毒表达系统。
每一类真核表达系统又包含不同的转染和表达方式。尤其最常用的昆虫细胞表达系统，制作重组杆状病毒就有baculogold系统、bac-to-bac系统等常用的方法。所用的最初的穿梭载体都不一样。
先多了解一下这方面信息，选一个合适的宿主和方便的方法再下手吧。
4楼：uv镜
一般情况下用真核生物作为载体不是一次性完成的
先要把目的基因接到病毒的dna，再用病毒侵染真核生物，病毒将其dna整合到真核生物的染色体上
真菌表达载体和植物表达载体的区别
5楼：匿名用户
设计引物加接头，扩增目的基因，连接到t载体上测序。
最常用的真核细胞表达载体有哪些？各在哪些细胞中表达？
6楼：匿名用户
真核细胞常见表达载体
1. pcmvp-neo-ban载体
特点: 该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对，主要由cmvp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pbr322骨架构成， 在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因。
2. pegfp, 增强型绦色荧光蛋白表达载体(enhanced fluorecent protein vector)
特点: pegfp表达载体中含有绿色荧光蛋白，在pcmv启动子驱动下，在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的sv40 origin使该载体在任何表达sv40 t 抗原的真核细胞内进行复制。
3. pegft-actin, 增强型绿色荧光蛋白/人肌动蛋白表达载体
特点: pegfp-actin表达载体中含有绿色荧光蛋白和人胞浆β-肌动蛋白基因，在pcmv启动子驱动下，在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的sv40 origin使该载体在任何表达sv40 t 抗原的真核细胞内进行复制。
7楼：匿名用户
我觉得你的问题实在是比较开放。
其一，动物里面的表达载体我不是很清楚
其二，职务表达载体相当的多，比如基础的pbi121，改造过的，比如pbin438、pcambia1301等等，
其三，真菌细胞的表达载体，比如酵母的表达载体也很多，这个我也不甚清楚
8楼：匿名用户
质粒 可以在真核细胞中找到 将目的基因导入载体 然后放进目的细胞后 在目的细胞（真核细胞）中表达
原核表达载体和真核表达载体的区别
9楼：威海博锐化机
一、表达载体不同：
原核表达载体构建重组表达载体：
1、载体酶切：将表达质粒用限制性内切酶（同引物的酶切位点）进行双酶切，酶切产物行琼脂糖电泳后，用胶**kit或冻融法**载体大片段。
2、pcr产物双酶切后**，在t4dna连接酶作用下连接入载体。
真核细胞表达载体之一为pegfp-n1载体，具有对方面的优点。pegfp-n1载体上携带有egfp蛋白表达基因。
二、表达实现方式不同：
真核表达载体具有neo基因，可以采用g418来筛选已成功转染了该载体的靶细胞。这些特殊的结构可以实现目的基因在靶细胞内的稳定表达。
三、获得目的基因方式不同：
pegfp-n1载体从结构上看，质粒具有很强的复制能力，可以满足随宿主细胞**时跟随胞质遗传给新生的子细胞，这是真核细胞表达载体保证目的基因稳定表达的因素之一。
原核表达载体获得目的基因：
1、通过pcr方法：以含目的基因的克隆质粒为模板，按基因序列设计一对引物（在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点），pcr循环获得所需基因片段。
2、通过rt-pcr方法：提取总rna，以mrna为模板，逆转录形成cdna第一链，以逆转录产物为模板进行pcr循环获得产物。
10楼：匿名用户
区别主要在表达重组元件还有基因标记。promoter，terminater是宿主识别的的,真核可能还需要enhancer,重组到基因组中的话，需要介导重组的序列。筛选标记绝大多数不一样。
真核表达载体在宿主中以质粒形式存在的，可以复制。哺乳动物细胞里没有质粒，外源基因整合到基因组中的，所以不能扩增。由于整合多个位点而产生多拷贝。
如果说载体的重组，没区别，都是一样的酶切加连接。细菌转化也一样。真核载体在细菌中也可以进行增值。
表达的话，一般原核是直接转化细菌通过ispg诱导进行表达，蛋白表达后的形式一般是通过包涵体或者是分泌型蛋白存在，这种蛋白如果是真核基因**，不一定拥有相应的蛋白生物活性，因为原核表达缺少真核转录后的蛋白修饰机制。但是原核表达的蛋白容易纯化，很容易获得纯化蛋白做为免疫原等进行使用。
而真核表达则是通过脂质体或者是pei的等转染试剂在体外通过和质粒形成复合体， 将质粒导入细胞后进行瞬时表达。称为瞬时表达的原因是因为质粒在真核细胞中不能扩增。并且不断被细胞所降解，这种表达在一定的时间后就会消失。
除非质粒被整合进入细胞的基因组，通过质粒上带的筛选标记，如g418等，通过筛选得到一株稳定表达你的目的蛋白的细胞克隆。但是这种细胞克隆的表达量相比瞬时表达会非常低甚至于检测不到。真核表达的特点是所表达的蛋白一旦表达即拥有相应的生物学活性，因此真核瞬时转染往往用于研究单个基因在细胞中的功能。
而不能用于纯化蛋白。
此外，真核表达还有用于昆虫细胞的杆状病毒表面展示系统，其本质也是通过转染含有目的基因的重组质粒（特殊质粒，专用于杆状病毒表面展示系统）给昆虫细胞，然后使用野生型的杆状病毒或者是人工改造过的杆状病毒来感染相应的细胞，来是病毒和质粒在昆虫细胞体内发生重组，获得目的基因，并且最终表达于病毒子的表面，所以成为表面展示系统。
11楼：匿名用户
原核载体可以将真核基因表达，但是表达出来的蛋白是没有活性的，因为缺少翻译后修饰系统。。。真核的表达载体呢 由于比较大 不适合大量快速扩增，所以要在其载体上构建可以在原核生物 如大肠杆菌中复制的所需的复制原件 。。。。综上 在应用的时候 要构建 穿梭质粒 可以穿梭于 原核和 真核 呵呵 还有就是 原核表达载体的基本元件和真核的有不同的地方 。。。。。
总觉得不够正确答案 。。。。。有些人缘的蛋白在原核里没有蛋白翻译后修饰，表达后没有活性，这时候就得在真核里表......
12楼：匿名用户
主要是因为原核和真核表达系统所需的表达元件不同。
比如说启动子，终止子在两种表达系统中是不一样的。
带有真核表达元件的是真核载体，能在真核生物内表达；
带有原核表达元件的是原核载体，能在原核生物内表达。
两者都具有的为穿梭载体。
1)真核表达载体和原核表达载体就是能在真核生物或原核生物中表达的载体,它们一般都带有能在真核生物或原核生物中表达的必需表达元件;
2)真核表达和原核表达的目的都是为了能够大量获得自己所需要的目的基因的表达产物,最好有生物活性,以便下一步的实验需要.
3)原核表达载体一般只能在原核生物中表达外源基因,但有些穿梭载体可以分别在真核和原核生物中表达它们的表达元件.
为什么构建的真核表达载体在真核细胞中不表达
13楼：匿名用户
有的时候在不同的表达体系里面对蛋白的表达量是有影响的。当构建完成后携带有信号肽的时候，一些蛋白在真核表达体系中表达量极低。去除信号肽序列值后，直接表达成熟肽，表达水平明显提高。
所以说构建的真核表达载体高表达mrna却检测不到目的蛋白是完全有可能的。
14楼：匿名用户
是在真核生物细胞中的基因表达载体的组件么？如果是，组件是启动子，终止子，复制原点，目的基因，标记基因
如何采用一个真核表达载体中表达多个蛋白
15楼：阿鲁巴星人
方法有好多的：
分开表达，装不同的promoter，启动不同的蛋白转录。
融合蛋白，就是把两个蛋白融合在一起表达。如果要用酶切开，可以在中间加入一段link。
加入ires--内部核糖体进入位点，虽然两个蛋白是用一个promoter启动的，但是蛋白石分开翻译的。
等等~不多举例啦~
16楼：广州源井生物
目前主要有三种方式，直接把2个蛋白序列连接进行融合表达；两个蛋白之间通过2a肽的方式连接；两个蛋白之间通过ires连接，3种方式各有优劣，可以根据实验目的进行选择
真核表达载体能在大肠杆菌中表达吗
17楼：我们飞哈
这要看载体是否具有原核启动子了。
一般的真核表达载体都是穿梭载体，载体上的氨苄青霉素等抗性基因就是可以再原核生物中表达的。但是你连接在载体上的真核基因是不会在原核生物中表达的，因为基因前边只有载体上的真核启动子，而且可能基因里面也会有内含子。
18楼：匿名用户
绝大多数真核
真核表达载体和原核载体是不一样的，涉及到一些修饰的地方原核是没有的。不过生化实验无绝对的事情，也许有的时候用真核表达载体去做原核表达也有可能会有一点表达。但应该不会出现很高的表达量。
所以说绝大多数真核表达载体是不能在大肠杆菌中表达的
真核过表达质粒，原核过表达质粒的区别~急求~~
19楼：學雅思
一、指代不同
1、真核过表达质粒：真核细胞表达载体之一为pegfp-n1载体，具有对方面的优点。pegfp-n1载体上携带有egfp蛋白表达基因。
2、原核过表达质粒：能携带插入的外源核酸序列进入原核细胞中进行表达的载体。
二、特性不同
1、真核过表达质粒：该质粒具有很强的复制能力，可以满足随宿主细胞**时跟随胞质遗传给新生的子细胞，这是真核细胞表达载体保证目的基因稳定表达的因素之一。
2、原核过表达质粒：启动子是dna链上一段能与rna聚合酶结合并起始rna合成的序列，它是基因表达不可缺少的重要调控序列。没有启动子，基因就不能转录。
由于细菌rna聚合酶不能识别真核基因的启动子，因此原核表达载体所用的启动子必须是原核启动子。
三、载体构建不同
1、真核过表达质粒：，由238个氨基酸组成，分子量约为27kd。gfpgfp在包括热、极端ph和化学变性剂等苛刻条件下都很稳定，用甲醛固定后会持续发出荧光，但在还原环境下荧光会很快熄灭。
2、原核过表达质粒：以含目的基因的克隆质粒为模板，按基因序列设计一对引物（在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点），pcr循环获得所需基因片段。
20楼：匿名用户
所有的质粒都是在细菌（原核）中构建和扩增的，但要在真核细胞中表达需要真核表达载体，要在原核细胞中表达需要原核表达载体。这两种载体主要的区别是启动子和polya加尾信号的不同，一个适合在原核细胞中表达，一个适合在真核细胞中表达。
你需要哪种质粒取决于你最终需要在哪种细胞中表达目的蛋白，如果你要直接在大肠杆菌中表达目的蛋白，然后用纯化的蛋白去处理黑色素瘤细胞，那你就应该用原核载体；如果你要在大肠杆菌中构建质粒，然后把质粒转染到哺乳细胞中表达目的蛋白，你就应该用真核载体。但无论哪种载体，构建和扩增质粒都是在大肠杆菌中进行的。
至于抗性基因，因为所有质粒都要在大肠杆菌中扩增，所以都带有大肠杆菌的某种耐药基因。至于真核耐药基因则不一定，原核表达载体肯定不需要真核耐药基因，真核表达载体则有些有真核耐药基因，有些没有。另外，原核细胞的kana耐药基因和真核细胞的neo耐药基因是同一个基因。