1楼:南京金益柏生物科技****
如果要检测的分子是在细胞膜上不需要加破膜剂。如果是胞质或分泌则需要,不加破膜剂的话荧光会很弱。
免疫荧光结果怎么表达
2楼:南京金益柏生物科技****
这个比较省事儿的是用组织芯片做免疫组化,直接打分。比单张的组织切片更有说服力。
免疫荧光的标本怎么制作
3楼:南京金益柏生物科技****
免疫荧光的标本制作的基本程序和dab显色的组化类似:
1 免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其它相同2 免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定
3 二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察4、免疫荧光在封片使用专用封片剂(如果你经费比较充足)或甘油:0.01mpbs (7:3)
5 封片后的标本4度冰箱保存,照像后可以在-70度的冰箱保存备用6 条件许可可以购买防淬灭的试剂加入封片剂中,标本可以保存更久7 荧光抗体的孵育以及后续处理需要闭光
8 荧光抗体染色假阳性可能会多,需要设定阳性和阴性对照
免疫荧光双染,为什么图像形态一模一样
4楼:南京金益柏生物科技****
主要是你检测的目的是不是一致的,如果一个是凋亡的一个是存活的话,那就肯定有问题了.如果你检测的都是存活状态下的,那自然一样了.从**看,的确染色一样.
你可以先关掉红色的激光器(559),单独扫描绿色的,反之扫描红色的,看看**是否和两个激光器同时扫描时想同,如不同则说明你染的**窜色了,这是你双标染色时抗体的浓度,浸染时间等等原因造成的,因为我不知道你的protocol,所以不好说。解决的办法你可以用sequential扫描试试,如不成只能重新做了。做的时候可以先做个预实验,把抗体的浓度降低,用两次单标的方法染色,分别看,再做对照,问题就能解决了。
还有你用共聚焦显微镜扫描的时候或是降低激光输出(laser)值调低或是调节hv和offset的值,把背景去掉,因为你的强度太高了。
求助免疫荧光的结果分析
5楼:南京金益柏生物科技****
可以用image-pro plus分析灰度
如何用流式抗体做免疫荧光
6楼:南京金益柏生物科技****
不是所有的流式抗体都适合做免疫荧光的,请查阅你的抗体说明书,看能否用于免疫荧光实验。或者查一下您的流式抗体荧光素的激发波长,是否与你荧光显微镜的激发波长一致,有时候激发波长不一致也不会出现荧光
免疫荧光和免疫酶组化的区别,细胞鉴定是免疫荧光还是免疫组化
1楼 南京金益柏生物科技 免疫荧光分辨率高,免疫酶标敏感性高。如果想看清楚所染抗原的定位分布,建议用免疫荧光,如果只想检测到抗原的存在建议用免疫酶标。 一抗都一样,只有二抗偶联的荧光物质或酶的差别。当然检测方法也不一样。 细胞鉴定是免疫荧光还是免疫组化 2楼 北京索莱宝科技 免疫组化和免疫荧光都是蛋...