高效液相色谱中分离度为0是什么原因

2020-11-22 19:03:54 字数 4785 阅读 9468

1楼:匿名用户

高效液相

要改善的条件很多,介绍几种供参考

1、色谱柱,色谱柱使用时间长了,柱效会降低,会影响到分离度的,改善方法是更换新的色谱柱。如果已经是新的色谱柱了,分离度还不好,那可以采用更长一些的色谱柱,也会增加分离度。

2、流动相的调节,通过调节流动相中各组分的比例,使流动相的极性发生变化,分离效率会不一样,这要针对要检测的成分具体情况进行分析确定。

3、改变柱温,相同条件下升高柱温,会增大色谱柱的分离能力而提高分离度。

高效液相色谱分离度不好怎么处理?

2楼:匿名用户

可以通过调整

流动相比例、调整流动相ph值、更换其他牌子的色谱柱和增加色谱柱的长度等方法尝试解决。

1、调整流动相比例:检测使用的色谱柱有较高的理论塔板数,能提供更好的分离度,从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性;可以通过同时调整流速、减少进样量来进行比例的调整;

2、调整流动相ph值:流动相ph值改变可以改变样品的保留时间和分离度;流动相ph值改变甚至可以改变某些样品出峰的先后顺序;流动相ph值改变可以改变样品的峰高,即可以调整峰形;

3、更换其他牌子的色谱柱:使用其他厂商出产的色谱柱进行使用测试;

4、增加色谱柱的长度。

高效液相色谱分离度不好该怎样处理?

3楼:匿名用户

1、减少有机相比例(反相色谱,正相色谱增大有机相比例),流速不会影响分离度

2、更换色谱柱

3、关掉柱温箱,增大柱温只能减小分离度

4,减小进样量

4楼:鸺鹠

1、流动相选择配比调整一下。

2、如果有柱温箱的话,用柱温箱加热试试。

3、以前分离的好不好,如果好现在不好,色谱柱问题比较大,换根色谱柱!

5楼:匿名用户

最好看看买的hplc是否性能可靠。

6楼:匿名用户

1.调整流动相的比例或者成分

2.适当的降低流速或者降低柱温

3.换跟厂家的柱子试试,不同厂家的柱子性能差很多的

高效液相色谱仪的分离度为什么要大于1.5

7楼:匿名用户

相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值.也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度.r越大,表明相邻两组分分离越好.

1、一般说当r<1时,两峰有部分重叠;当r=1.0时,分离度可达98%

2、当r=1.5时,称为6σ分离,裸露峰面积为99.7%.

r≥1.5称为完全分离.《中国药典》规定r应大于1.

5.通常用r=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志.

3、当r=1时,称为4σ分离,两峰基本分离,裸露峰面积为95.4%,内侧峰基重叠约2%

分离度计算公式:r=2(tr2-tr1)/(w1+w2)

所以当两峰分离程度达99.7%时,分享仪式至少应=1.5.

8楼:匿名用户

分离度达到1.5可以认为两个成分完全分离,不会互相干扰

中为什么要求色谱柱柱温稳定,而高效液相色谱柱不

9楼:匿名用户

高效液相色谱中分离度为0是什么原因

要改善的条件很多,介绍几种供参考

1、色谱柱,色谱柱使用时间长了,柱效会降低,会影响到分离度的,改善方法是更换新的色谱柱。如果已经是新的色谱柱了,分离度还不好,那可以采用更长一些的色谱柱,也会增加分离度。

2、流动相的调节,通过调节流动相中各组分的比例,使流动相的极性发生变化,分离效率会不一样,这要针对要检测的成分具体情况进行分析确定。

3、改变柱温,相同条件下升高柱温,会增大色谱柱的分离能力而提高分离度。

高效液相色谱如何计算分离度

10楼:溯风

不是很明白楼主的意思,你的意思是进了5针吗?每个都给出保留时间还是一张图上有5个峰呢?

分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。

如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。

一般的液相色谱工作站都会自动给出,你可以向以前做过的人咨询一下应该怎么设置。

分离度又称分辨率,为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标.用r表示.r等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比.

  resolution,r   相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。r越大,表明相邻两组分分离越好。

一般说当r<1时,两峰有部分重叠;当r=1.0时,分离度可达98%;当r=1.5时,分离度可达99.

7%。通常用r=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。

当r=1时,称为4σ分离,两峰基本分离,裸露峰面积为95.4%,内侧峰基重叠约2%。r=1.

5时,称为6σ分离,裸露峰面积为99.7%。r≥1.

5称为完全分离。《中国药典》规定r应大于1.5。

  分离度计算公式:r=2(tr2-tr1)/(w1+w2)

11楼:匿名用户

分离度是对于两个相临峰来说的,分离度r=保留时间的差值/半峰宽之和,只要保证相邻峰分离度r>1.5就行,一般要求2最好。不相邻的峰之间的分离度就毫无意义了,引起分离度r必然》1.

5。其实一般的工作站都能给出分离度的。可以自己试试看。

12楼:匿名用户

你用的什么软件,软件上有个k'的就是分离度,一般不自己计算,你把那个添加上,软件有计算。

高效液相色谱仪的分离度为什么要大于1.5?

13楼:匿名用户

相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值.也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度.r越大,表明相邻两组分分离越好.

1、一般说当r<1时,两峰有部分重叠;当r=1.0时,分离度可达98%

2、当r=1.5时,称为6σ分离,裸露峰面积为99.7%.

r≥1.5称为完全分离.《中国药典》规定r应大于1.

5.通常用r=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志.

3、当r=1时,称为4σ分离,两峰基本分离,裸露峰面积为95.4%,内侧峰基重叠约2%

分离度计算公式:r=2(tr2-tr1)/(w1+w2)

所以当两峰分离程度达99.7%时,分享仪式至少应=1.5.

高效液相色谱中怎样改善条件达到分离度要求

14楼:禾鸟

(1)选择合适的流动相,使其流经色谱柱时,受到的阻力减小,从而能迅速通过色谱柱,且必须对载液加高压。

(2)可选择合适的固定相和流动相以达到最佳分离效果。高效液相色的分离效果比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

(3)定时清洗柱子。高效液相色谱的柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物。但是要定时清洗柱子从而分离度。

扩展资料

高效液相色谱法的特点:

高效液相色谱法有“四高一广”的特点:

(1)高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。

(2)高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。

(3)高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

(4)高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μl数量级。

(5)应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。

(6)柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物

(7)样品量少、容易**:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

15楼:匿名用户

要改善的条件很多,介绍几种供参考

1、色谱柱,色谱柱使用时间长了,柱效会降低,会影响到分离度的,改善方法是更换新的色谱柱。如果已经是新的色谱柱了,分离度还不好,那可以采用更长一些的色谱柱,也会增加分离度。

2、流动相的调节,通过调节流动相中各组分的比例,使流动相的极性发生变化,分离效率会不一样,这要针对要检测的成分具体情况进行分析确定。

3、改变柱温,相同条件下升高柱温,会增大色谱柱的分离能力而提高分离度。

16楼:匿名用户

液相色谱改善分离度的一般是:色谱柱、流动相、柱温、流速等方面。

建议你去“色谱世界”**看看,这个**在色谱方面非常专业,高手较多,应该能帮到你的。

17楼:手机用户

改变流动相或改变流速

18楼:鱼旸

1、减小固定相颗粒直径(3-10um)

2、降低流动相粘度或提高柱温

3、一定范围内减小流速(多用1ml/min)4、提高装柱技术(常采用匀浆法)

5、减小柱外死体积(减少样品在此部分的扩散)

求助:如何提高高效液相色谱仪的分离度

19楼:匿名用户

液相色谱仪实际上就是满足柱子的条件进行分离,换个好点的柱子吧,如果新柱子还是分离不高出现分离不彻底那就是仪器的问题了,可能压力不够,流速不够,导致分离不彻底,看看有没有漏液现象,没有的话可能原因就是泵不稳定,或者局部管路有挂壁堵了一半,你的是什么牌子的