怎样防止核酸酶对核酸的水解作用,怎样防止核酸酶对核酸的水解作用 110

2020-11-26 13:15:12 字数 2918 阅读 4044

1楼:匿名用户

核酸有两类,dna和rna,一般dna较稳定,分解dna的酶较少,而且属于蛋白质类,用含蛋白酶k的溶液处理就能分解掉了;而rna不太稳定,且rna酶分布非常广泛,所以提取时要特别注意,一般的处理是用depc(焦碳酸二乙酯),可以使rna酶失活。

2楼:或成陌路

改变条件使酶失去活性,总的来说有可逆和不可逆两种方法。

3楼:闵宽开心就好

可以调ph或温度,使酶失活。或者加入蛋白酶,破坏核算酶

核酸为什么可以水解?

4楼:sky荒草萱

核酸的基本组成单位是核苷酸,核苷酸脱水缩合形成核酸。

5楼:匿名用户

初步水解为核苷酸,彻底水解为磷酸、碱基、五碳糖。

在dna的提取时如何避免dna被水解

6楼:匿名用户

在dna的提取过程中,主要是防止dna酶对dna的作用,而dna酶很不稳定在空气中很少稳定存在,唾液中也同样如此,所以不用过分小心,只要把提取dna时用到的器械提前灭菌,一般就可以了。此外,可以在提取时加一些dna酶抑制剂,可以有效的防止dna的水解。

7楼:老孟

戴手套操作,防止手上的分泌物污染;

戴口罩或者少说话,防止唾液里的东西污染;

所用的器械都要是干净的。

一般dna的提取比较容易,条件不是很苛刻,比rna的提取简单。

核酸酶抑制剂是什么?

8楼:匿名用户

是用来抑制核酸酶(即rna酶)的活性的。例如:

1.焦磷酸二乙酯 是一种强烈但不彻底的rna酶抑制剂。它通过和rna酶的活性基团组氨酸的眯唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性。

2.异硫氰酸胍 目前被认为是最有效的rna酶抑制剂,它在裂解组织的同时也使rna酶失活。它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来,又对rna酶有强烈的变性作用。

3.氧钒核糖核昔复合物由氧化钒离子和核昔形成的复合物,它和rna酶结合形成过渡态类物质,几乎能完全抑制rna酶的活性。

4.rna 酶的蛋白抑制剂(rnasin) 从大鼠肝或人胎盘中提取得来的酸性糖蛋白。rnasin是rna酶的一种非竞争性抑制剂,可以和多种rna酶结合,使其失活。

5.其他 sds、尿素、硅藻土等对rna酶也有一定抑制作用

要获取完整核酸需要采取什么措施

9楼:立而躁嶮

在dna的提取过程中防止脱氧核糖核酸酶的水解作用,应采取哪些措施

相同点:都能以dna为模板,从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。

不同点1、作用底物不同。rna聚合酶底物是ntp;dna聚合酶底物是dntp。

2、rna聚合酶作用不需要引物,而dna聚合酶作用需要引物。

3、rna聚合酶本身具有一定的解旋功能,而dna聚合酶没有,当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。

4、rna聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性,而dna聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性,还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证dna复制时候校对,所以复制的忠实性高于转录的。

5、rna聚合酶通常作用于转录过程;dna聚合酶通常作用于dna复制过程

酶切的的水一定要用无核酸酶水吗

10楼:

酶切后片段直接用无水乙醇沉淀的方法

把酶切体系先加入等体积氯仿抽提,然

版后离心去权掉氯仿,取水层,加入2倍体积的冷乙醇,混匀放入低温冰箱进行醇沉。然后再离心吸掉乙醇晾干,用纯水溶解就行了

需要注意的就是醇沉之后的离心,因为连接体系一般都是很小的10ul左右,所以沉淀下来的dna是肉眼根本看不到的,所以可以在离心的时候记住ep管放的方向,那样就能猜出沉淀在管的什么位置.吸乙醇的时候要小心避开。

为什么说核酸酶的发现是是对酶是蛋白质的传统观念提出了挑战

11楼:匿名用户

为什么说核酸酶的发现是是对酶是蛋白质的传统观念提出了挑战核酶(ribozyme)

是具有催化功能的rna分子.核酶又称核酸类酶、酶rna、类酶rna.

大多数核酶通过催化转磷酸酯和磷酸二酯键水解反应参与rna自身剪切、加工过程.

1982年美国科学家cech和altman发现了核酶(ribozyme).最早发现大肠杆菌rnasep的蛋白质部分除去后,在体外高浓度mg2+存在下,与留下的rna部分(mirna)具有与全酶相同的催化活性.后来发现四膜虫l19rna在一定条件下能专一地催化寡聚核苷酸底物的切割与连接,具有核糖核酸酶和rna聚合酶的活性.

核酶的发现对于所有酶都是蛋白质的传统观念提出了挑战.

核酸的提取,水解与鉴定实验有什么临床意义

12楼:青柠

一、肝组织中 dna 的分离与鉴定【 实验目的】1 .掌握 dna 分离纯化的原理和方法。2 .熟悉台式离心机 的使用。3.

掌握 dna 定量技术。【 实验原理】细胞内的核酸多以核蛋白的形式存在

核酸酶的介绍

13楼:手机用户

核酸酶是在核酸分解的第一步中,作用于水解核苷酸之间的磷酸二酯键的一种蛋白质。在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的。1不同**的核酸酶,其专一性、作用方式都有所不同。

有些核酸酶只能作用于rna,称为核糖核酸酶(rnase),有些核酸酶只能作用于dna,称为脱氧核糖核酸酶(dnase),有些核酸酶专一性较低,既能作用于rna也能作用于dna,因此统称为核酸酶(nuclease)。根据核酸酶作用的位置不同,又可将核酸酶分为核酸外切酶(exonuclease)和核酸内切酶(endonuclease)。

请教:核酸酶对超声粉碎后样品中的核酸去除还有效吗

1楼 匿名用户 为什么说核酸酶的发现是是对酶是蛋白质的传统观念提出了挑战核酶 ribozyme 是具有催化功能的rna分子 核酶又称核酸类酶 酶rna 类酶rna 大多数核酶通过催化转磷酸酯和磷酸二酯键水解反应参与rna自身剪切 加工过程 1982年美国科学家cech和altman发现了核酶 rib...