请教:核酸酶对超声粉碎后样品中的核酸去除还有效吗

2020-11-26 13:15:11 字数 2809 阅读 9032

1楼:匿名用户

为什么说核酸酶的发现是是对酶是蛋白质的传统观念提出了挑战核酶(ribozyme)

是具有催化功能的rna分子.核酶又称核酸类酶、酶rna、类酶rna.

大多数核酶通过催化转磷酸酯和磷酸二酯键水解反应参与rna自身剪切、加工过程.

1982年美国科学家cech和altman发现了核酶(ribozyme).最早发现大肠杆菌rnasep的蛋白质部分除去后,在体外高浓度mg2+存在下,与留下的rna部分(mirna)具有与全酶相同的催化活性.后来发现四膜虫l19rna在一定条件下能专一地催化寡聚核苷酸底物的切割与连接,具有核糖核酸酶和rna聚合酶的活性.

核酶的发现对于所有酶都是蛋白质的传统观念提出了挑战.

核酶和核酸酶是不是一样

2楼:

核酶与核酸酶是两个完全不同的概念.

核酶是指具有催化功能的rna;

而核酸酶是指催化核酸酯键水解的酶.

蛋白纯化的样品前处理要不要用核酸酶,请有此经验的

3楼:匿名用户

你做的是什么蛋白,一般来说不用,核酸很好去掉。

什么是核酸酶?

4楼:兵兵王

凡是可以降解

核酸的酶类,很多。限制性内切酶是核酸酶的一类。作催化作用的dna降解酶、rna降解酶,均为核酸酶。

核酶:本质为rna的酶。大多数核酶通过催化转磷酸酯和磷酸二酯键水解反应参与rna自身剪切、加工过程。不是以降解为目标因此不算核酸酶。

5楼:匿名用户

去除核酸的最简单有效快速的办法就是 使用核酸酶 “非限制性核酸酶内切酶” 可以迅速 有效 彻底。该产品有进口和国产的。目前国产的 biolonase 应该适合您这方面的使用。

6楼:浙大阿米巴

各种rnase,dnase之类的。

去除核酸中的蛋白质的方法有哪些

7楼:世界

想要在已经抽提的蛋白标本中去除核酸,可以考虑以下几种方法:

凝胶过滤,这是很容易去除小分子杂质物质的方法。

如果蛋白样本和核酸的分子大小差别比较大,可以考虑用超滤的方法。

超滤是以压力为推动力的膜分离技术之一,以大分子与小分子分离为目的。

加入核酸酶消化三个小时。

比如加一定量的dnaase 和rnase酶消化。

核酸用aiex也可以除去,不过要选择合适的ph值。

使用超声把核酸降解。

用氯仿抽提之后离心。

核蛋白中的核酸是怎么去除的

8楼:匿名用户

可以在大肠杆菌裂解的时候就加入核酸酶,通过核酸酶消化胞内的核酸,当核酸变成小片段的时候就很容易被去除掉。 利用阴离子交换层析 q 来去除核酸,q柱对于核酸有很强的吸附作用,需要很高的盐浓度才能洗脱下核酸,可以很容易的去除蛋白溶液中的核酸。 利用分子筛去除核酸,核酸是大分子物质,一般会在分子筛的外水体积中被去除掉。

怎样防止核酸酶对核酸的水解作用 110

9楼:匿名用户

核酸有两类,dna和rna,一般dna较稳定,分解dna的酶较少,而且属于蛋白质类,用含蛋白酶k的溶液处理就能分解掉了;而rna不太稳定,且rna酶分布非常广泛,所以提取时要特别注意,一般的处理是用depc(焦碳酸二乙酯),可以使rna酶失活。

10楼:或成陌路

改变条件使酶失去活性,总的来说有可逆和不可逆两种方法。

11楼:闵宽开心就好

可以调ph或温度,使酶失活。或者加入蛋白酶,破坏核算酶

为什么要从蛋白样品中去除dna?脱氧核糖核酸酶与其有什么关系? 15

12楼:学无止境

因为dna会干扰蛋白质的光学测定或化学反应。

脱氧核糖核酸酶可以消化样品中的dna,提高蛋白质样品的纯度。

13楼:匿名用户

蛋白样品中如果有dna的话就会影响其化学性质及各种指标测定。比如我们一般测蛋白浓度都是看其od值,而只要蛋白样品中有少许dna污染就会引起od值得大幅度变化,从而影响后续试验。而且因为dna的载体就是组蛋白,dna往往是和组蛋白结合在一起的,严重影响了蛋白的性质,所以一定要除去蛋白样品中的dna。

dna又叫脱氧核糖核酸,脱氧核糖核酸酶可以消化也就是除去脱氧核糖核酸(dna)。

蛋白纯化怎么去除核酸

14楼:因为不懂才注册

1、根据所选蛋白的性质,选择合适的介质和条件,想办法把蛋白结合在柱子上,(有tag的话用这个方法最好了),然后用高盐(0.5-3m nacl)洗,一般会洗下来一个峰,就是被洗下来的核酸了。

2、试试在高盐条件下加mn2+,因为高盐可以让核酸和蛋白分离,而mn2+对核酸沉淀有一定的效果。

但是要十分小心的是,这类蛋白本身的天然性质就是要结合核酸的,有的时候核酸去除干净了,蛋白也沉淀了,所以没那么容易,很多小条件要结合所选的蛋白自己去摸索。

15楼:匿名用户

可以在大肠杆菌裂解的时候就加入核酸酶,通过核酸酶消化胞内的核酸,当核酸变成小片段的时候就很容易被去除掉。

利用阴离子交换层析 q 来去除核酸,q柱对于核酸有很强的吸附作用,需要很高的盐浓度才能洗脱下核酸,可以很容易的去除蛋白溶液中的核酸。

利用分子筛去除核酸,核酸是大分子物质,一般会在分子筛的外水体积中被去除掉。