琼脂扩散试验的类型有哪些,双向琼脂扩散实验主要用于哪些方面

2020-11-24 06:10:29 字数 3598 阅读 1495

1楼:匿名用户

扩散和双向扩散两种。

(一)双向琼脂扩散试验(double immunodiffusion test)

抗原和抗体加到琼脂板上相对应的孔中,两者各自向四周扩散,如两者相对应,浓度比例合适,则经一定时间后,在抗原、抗体孔之间出现清晰致密的白色沉淀线。每一抗原与其相对应抗体只能形成一条沉淀线,若同时含有若干对抗原抗体系统,因其扩散速度的不同,可在琼脂中出现多条沉淀线。且根据沉淀线融合情况,还可鉴定两种抗原是完全相同还是部分相同。

所以,可用此法来分析和鉴定标本中多种抗原或抗体成份,并用以测定抗原或抗体的效价。更多的详细资料可以登录生物帮,显微镜耗材 http://product.

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双向琼脂扩散实验主要用于哪些方面

2楼:渊源

双向琼脂扩散试验常

用于定性检测,也可用于半定量检测。

将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶板上相邻近的小孔内,让它们相互向对方扩散。当两者在最适当比例处相遇时,即形成一条清晰的沉淀线。根据有否出现沉淀线,可用已知的抗体鉴定未知的抗原,或用已知的抗原鉴定未知的抗体。

临床常用本方法检查原发性肝癌患者血清中的甲胎蛋白,作为原发性肝癌的早期辅助诊断。

请教做琼脂扩散实验的方法

3楼:匿名用户

琼脂扩散试验(gel diffusion test) 可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散,二者相遇,在比例合适处形成白色沉淀。基本类型有单向扩散和双向扩散两种。 (一)双向琼脂扩散试验(double immunodiffusion test) 抗原和抗体加到琼脂板上

琼脂扩散试验的注意事项

4楼:一只笔

不合宜人群:无特殊要求。 检查时的禁忌:

禁忌暴饮暴食,和剧烈运动,适宜在早晨空腹检测。  检查时要求:试验前应做预试验,确定抗体的稀释度。

加样时不要将琼脂划破,以免影响沉淀线的形成。加样时不同浓度抗体和抗原不要混淆,影响试验结果。

常用琼脂扩散试验的琼脂浓度为多少?

5楼:廖佳一

1.材料和试剂

(1)ph8.6,0.1m巴比妥——巴比妥钠缓冲液

巴比妥钠 10.3 g

巴比妥 1.84 g

硫柳汞 100 mg(防腐剂)

蒸馏水加热溶解并定容至500ml

(2)1%预复琼脂(或琼脂糖)

1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。

(3)1%琼脂糖凝胶

1g琼脂糖加50ml蒸馏水置水溶中煮沸溶解或用与波炉加热溶解(注意不要溢出且注意加入蒸发的水),然后再加入50ml上述巴比妥缓冲液混匀,置4℃保存备用。

(4)抗原及相应免疫血清。

单向琼脂扩散试验 是一种常用的定量检测抗原的方法。将适量稀释后的抗体与等量琼脂混匀,浇注成板,凝固后,在板上打孔,孔径3mm,孔间距10mm,孔中加入抗原,每孔10μl,放置湿盒中,37℃温箱,抗原就会向孔的四周扩散,边扩散边与琼脂中的抗体结合。24h-48h后观察结果,在两者比例适当处形成白色沉淀环。

沉淀环的直径与抗原的浓度成正比。如事先用不同浓度的标准抗原制成标准曲线,则从曲线中可求出标本中抗原的含量。本试验主要用于检测标本中各种免疫球蛋白和血清中各种补体成分的含量,敏感性很高。

双向琼脂扩散试验 测定时将加热溶化的琼脂或琼脂糖浇至玻片上,等琼脂凝固后,打多个小孔,将抗原和抗体分别加入小孔内,使抗原和抗体在琼脂板上相互扩散。当二个扩散圈相遇,如抗原和抗体呈特异性的结合且比例适当时,将会形成抗原抗体复合物的沉淀,该沉淀可在琼脂中呈现一条不透明的白色沉淀线。如果抗原与抗体无关,就不会出现沉淀线,因此可以通过该试验,用特异性抗体鉴定抗原,或反之用已知抗原鉴定抗体。

另外沉淀线的特征与位置不仅取决于抗原,抗体的特异性和浓度,而且与其分子的大小及扩散速度有关,当抗原体存在多种成分时,将呈现多条沉淀线以至交叉反应线,因此可用来检查抗原和免疫血清的特异性、纯度或浓度比较抗原之间的异同点,因而应用范围较广。

影响琼脂扩散试验结果的因素有哪些

6楼:匿名用户

⑴配抗菌药物

原液前要清楚抗菌药物原粉的百分含量、批号和生产厂家。   ⑵配制抗菌药物原液时,可能会遇到抗菌药物难溶的现象,这就要求用相应的助溶剂溶解。   ⑶抗菌药物原液的终体积要用容量瓶定容。

  ⑷单位的换算(如 强力霉素,含量887iu/mg,计算配制1280mg/ml 的强力霉素50毫升,需要多少克强力霉素原粉?)   抗生素的效价通常以重量或国际单位(iu)来表示。   青霉钠1mg=1667 iu或1 iu=0.

6 mg   青霉素钾1mg=1559 iu或1 iu=0.625 mg   制霉菌素1mg=3700 iu   其他抗生素多以重量为单位或1mg=1000 iu   ⑸抗菌药物原液的终浓度可增大到5120mg/ml,这可缩减加入纸片中的抗菌药物原液的体积。   ⑹根据标准,有时要求纸片的抗菌药物含量较低,加入的抗菌药物原液的量过少,不足以将50片纸片全部润湿时,应将抗菌药物原液用相应的灭菌pbs稀释到0.

5ml,混匀后再加入西林瓶内。   ⑺制作纸片时,要多做几份进行高压,以备试验失败重做时,节约时间。   ⑻药敏纸片在37℃烘干,可能需要一到两天的时间,切勿将纸片放入高温中烘干,以防药物失效。

  ⑼密封纸片后,可放入4冰箱保存或置阴暗干燥处保存,切勿受潮。

7楼:王拔沃尔云

单相琼脂扩散试验原理,

一种定量试验,将一定量的抗体混合于琼脂内,倾注于玻片上,凝固后,在琼脂层上打孔,再将抗原加入孔中,使其向四周扩散。抗原抗体复合物形成的沉淀环直径与抗原的浓度成正比。如事先用不同浓度的标准抗原制成标准曲线,则未知标本中的抗原含量即可从标准曲线中求出。

本试验主要用于检查标本中各种免疫球蛋白和血清igg含量。

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沉淀反应的类型有:a。电泳 b。琼脂扩散实验 c.环状沉淀实验 d.elis 多选求解

8楼:匿名用户

沉淀反应的种类有环状沉淀、絮状沉淀、荚膜膨胀、琼脂扩散及免疫电泳等。此外还有放射性同位素标记、酶标记等测定法。应该abc都选。

琼脂扩散试验的检查过程

9楼:砿鄿

双向琼脂扩散试验是在含有电解质的半固体琼脂板上,将可溶性抗原和抗体分别加入具有一定距离和孔径的小孔内,使其在一定条件下相互扩散,两者在比例合适处相遇,形成白色沉淀线(带)。当存在多种抗原抗体系统时可出现多条沉淀线,然后可根据沉淀线的数目、位置、形状对抗原抗体系统进行分析。单向琼脂扩散又称单向环状免疫扩散,是一种定量测定抗原的方法。

常用来检测标本中各种免疫球蛋白及血清中各种补体成分的含量。灵敏度高,可对免疫性疾病作辅助诊断。