1楼：手机用户
清洗，5个100ml锥形
瓶，1个50ml锥形瓶，6副培养皿，3个小试剂瓶，接种环，涂布棒准备专100ml超纯水
溶液:lb300ml(液体50ml+50ml，固体100ml)，0.1mol/l cacl2 10ml， 100mg/mlamp 1 ml，
20mg/mlx-gal 1 ml， 200mg/ml iptg 1 ml。
大肠杆菌菌液1ml 感受态细胞 连接产物 4管 4 x 5 = 20ul 做4份 目的基因 t载体 t4连接酶 10x冲液 4 x 4ul 4x1ul 4x0.5ul 4x1ul 灭菌：5个100ml锥形瓶（外加1个小的），6副培养皿，3个小试剂瓶，接种环，涂布棒，10ml超纯水，lb培养基，1.
5mlep管，大小枪头，过滤用具2副，，属0.1mol/l cacl2
为什么可以利用t载体对pcr产物进行克隆
2楼：匿名用户
t克隆的原理是基于常规pcr反应中所使用taq聚合酶能够在pcr产物的3‘末端非特异版性添加一个a,这样实际上
权常规pcr产物都含有3端突出一个a的粘性末端.基于这个原理,常规的线性t－克隆载体（puc18和puc19等）在其3’末端添加一个t,这样的载体能够和任何pcr产物进行连接克隆,并不需要添加任何特异性的粘性末端位点.这个就是t克隆的原理了.
t载体克隆的介绍
3楼：手机用户
实验原理重组质粒的构建t质粒载体重组的dna分子是在dna连接酶的作用下，有mg2 、atp存在的连接缓冲系统中，将分别经酶切的载体分子与外源dna分子进行连接。
t载体克隆的试剂配制
t载体克隆为什么要用cdna
4楼：匿名用户
你是通过提rna来得到基因的吧。cdna是rna逆转录成的dna序列，与基因组相比没有内含子，就是说它是可以表达或者在表达的基因。
5楼：匿名用户
t载体可以克隆任何dn**段。
它的目的是后续测序，以便连接到表达载体表达蛋白，所以多数情况下用cdna。
但是也可以基因组测序分析用，扩增16srrna就是基因组扩增后t载体克隆测序。。
6楼：匿名用户
？ t载体克隆是连接pcr产物的吧？没有什么cdna不cdna的，你扩出来就行，因为普通pcr会在产物末端加上一个“a”，t载体末端有一个t,这样的话就能连成一个环，就能转到大肠杆菌里了，