制备细胞膜是不是采用差速离心法,什么采用密度梯度离心法

2021-03-30 15:44:36 字数 5738 阅读 9618

1楼:熊咏说岚岚

差速离心法(离心法):交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法.此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离.

梯度离心法(浓度梯度):细胞内的物质具有一定的浓度,把细胞放入清水中,细胞吸水涨破.除去细胞内的其他物质,得到细胞膜.

2楼:何豪财

**dna的复制方式时,n15标记的dna放在n14标记的溶液中,培养,用密度梯度离心,分轻带,中带,重带

高手总结下高中生物差速离心法和密度梯度离心法分别用于什么?具体~如制备细胞膜

3楼:匿名用户

差速离心法(离心法):交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法.此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离.

梯度离心法(浓度梯度):细胞内的物质具有一定的浓度,把细胞放入清水中,细胞吸水涨破.除去细胞内的其他物质,得到细胞膜.

差速离心法和密度梯度离心法的区别

4楼:甜小糖

区别一:定义不同

差速离心法:差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。起始的离心速度较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。

收集沉淀,改用较高的离心速度离心悬浮液,将较小的颗粒沉降,以此类推,达到分离不同大小颗粒的目的。

密度梯度离心法:用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。

区别二:原理不同

差速离心法:物体围绕中心轴旋转时会受到离心力f的作用。当物体的质量为 m、体积为v、密度为d、旋转半径为r、角速度为(弧度数/秒)时,可得:

f=mω2r 或者 f=v.d.ω2r 。

密度梯度离心法:不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。

区别三:转速不同

差速离心法:用多个离心转速。

密度梯度离心法:只用一个离心转速。

区别四:密度不同

差速离心法:是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分。

密度梯度离心:用此方法的物质密度有一定差异的。

5楼:从小就爱玩

差速离心法,这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组分分开!而密度梯度离心则是较为精细的分离手段,这种方法的关键是先在离心管中制备出蔗糖或氯化铯等介质的浓度梯度并将细胞匀浆装在最上层,密度梯度的介质可以稳定沉淀成分,防止对流混合,在此条件下离心,细胞不同组分将以不同速率沉降并形成不同沉降带。

6楼:yn桃李醉春风

一、密度梯度离心法和差速离心法的区别

1. 差速离心法是用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离,密度梯度离心中单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的。

2. 差速离心用两个甚至更多的转速,而密度梯度离心只用一个离心转速。

3. 差速离心是适用于混合样品中各沉降系数差别较大的组分,而密度梯度离心的物质是密度有一定差异的。

二、差速离心法

差速离心法是交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。

1. 沉降系数

使用离心法时,大分子沉降速度的量度,等于每单位离心场的速度。或 s=v/ω2r,s 是沉降系数, ω 是离心转子的角速度(弧度 / 秒), r 是到旋转中心的距离, v 是沉降速度。沉降系数以每单位重力的沉降时间表示,并且通常为 1 ~ 200×10-13 秒范围, 10-13 这个因子叫做沉降单位 s ,即 1s=10-13秒,如血红蛋白的沉降系数约为 4×10 -13 秒或 4s 。

大多数蛋白质和核酸的沉降系数在 4s 和 40s 之间,核糖体及其亚基在 30s 和 80s 之间,多核糖体在 100s 以上。

2. 差速离心法的优缺点

差速离心法的优点是样品的处理量较大,可用于大量样品的初分离。其缺点是分离复杂样品和要求分离纯度较高时,离心次数多,操作繁杂。由于沉淀的多次清洗、溶解、再沉淀,容易引起中间损失,所以离心分辨力差。

实际分离时由于离心时的对流、扩散和收取沉淀时的污染,对于一些沉降系数相差不大的组分无法进行完全的分离提纯。产品的纯度和**率都达不到上述理论值。因此差速离心法主要用于大量样品的初步分离提纯。

三、密度梯度离心法

密度梯度离心法又称为区带离心法,是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。

1. 分类

( 1 )差速区带离心法:分离密度相差不大、重量和大小区分较大的样品。 将样品置于平缓的预先制好的密度梯度介质上,进行离心,较大的颗粒将比较小的颗粒更快地沉降。

通过梯度介质,形成几个明显的区带(条带)。这种方法有时间限制,在任一区带到达管底之前必须停止离心。大小相同、密度不同的颗粒(如溶酶体、线粒体和过氧化物酶体)不能用本法分离。

( 2 )等密度区带离心法:用于样品颗粒的浮力密度差,密度差越大的样品分离效果越好,与颗粒大小和形状无关。离心管中预先放置好梯度介质,样品加在梯度液面上,或样品预先与梯度介质溶液混合后装入离心管,通过离心形成梯度。

离心时,样品的不同颗粒向上浮起,一直移动到与它们的密度相等的等密度点的特定梯度位置上,形成几条不同的区带,这就是等密度离心法。离心所需时间以最小颗粒到达等密度点(即平衡点)的时间为基准,有时长达数日。

等密度区带离心法所用的梯度介质通常为氯化铯 c s cl ,其密度可达 1.7 g/cm3。此法可分离核酸、亚细胞器等,也可以分离复合蛋白质,但简单蛋白质不适用。

2. 密度梯度离心法的优缺点

优点是:①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;②适应范围广,能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度差的颗粒;③颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性。

缺点是:①离心时间较长;②需要制备惰性梯度介质溶液;③操作严格,不易掌握。

7楼:匿名用户

差速离心是每次用不同的转速将混在一起但是比重不同的结构或物质分开(某速度离心一次分离出一个),比如细胞器的分离;

密度梯度离心一般是一次离心让混合物中比重不同的分成不同的层。比如dna半保留复制的实验证据就是用这个方法

8楼:华

区别在于差速利用速度不同,而密度利用比重。

差速离心是每次用不同的转速将混在一起但是比重不同的结构或物质分开(某速度离心一次分离出一个),比如细胞器的分离;

密度梯度离心一般是一次离心让混合物中比重不同的分成不同的层。

9楼:风辰平

两者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮扔中的颗粒进行分离的技术.差速离心是一种较为简便的分离法,常用于细胞核和细胞器的分离.因为在密度均一的介质中

请问噬菌体侵染细菌实验用到差速离心法还是密度梯度离心法?请解释一下,谢谢。

10楼:manman大魔羯

是离心,不是差速离心,差速离心用于分离细胞器

11楼:实打实结婚

那噬菌体实验的离心方法是什么,是差速离心吗

差速离心与密度梯度离心方法?要200字左右。。谢谢大家

12楼:胖辉原版

差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。起始的离心速度较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。收集沉淀,改用较高的离心速度离心悬浮液,将较小的颗粒沉降,以此类推,达到分离不同大小颗粒的目的。

密度梯度离心(density gradient centrifugation)

用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。

分离活细胞的介质要求:1)能产生密度梯度,且密度高时,粘度不高;2)ph中性或易调为中性;3)浓度大时渗透压不大;4)对细胞无毒。

高中生物实验哪些用到差速离心法,哪些用到梯度离心法。

13楼:匿名用户

差速离心法:分离各种copy细胞器,(教科书必修一第三章第二节里有说明)

梯度离心法:教科书必修二噬菌体侵染大肠菌实验差速离心法是用来分离不同密度的结构,如线粒体和叶绿体梯度离心法是用来分离不同密度的物质,如蛋白质和dna

14楼:匿名用户

差速离心法主要用来分离不同密度的结构,如线粒体、叶绿体等

梯度离心法主要用来分离不同密度的物质,如14n标记的dna、15n标记的dna

高中生物里面,什么用到了差速离心法?什么用到了梯度离心法?

15楼:爱笑的任玉杰

观察线粒体、叶绿体、蛋白质的结构时用到了

差速离心法。

利用同位素标记法观察dna时用到了梯度离心法。

密度梯度离心中单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的;差速离心法是用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离。

密度梯度离心只用一个离心转速,而差速离心用两个甚至更多的转速。密度梯度离心的物质是密度有一定差异的,而差速离心是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分。

16楼:匿名用户

差速离心法(离心法):交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。

梯度离心法(浓度梯度):细胞内的物质具有一定的浓度,把细胞放入清水中,细胞吸水涨破。除去细胞内的其他物质,得到细胞膜。

密度梯度区带离心法(简称区带离心法),是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。此法的优点是:①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;②适应范围广,能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度差的颗粒;③颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性,并防止已形成的区带由于对流而引起混合。

此法的缺点是:①离心时间较长;②需要制备惰性梯度介质溶液;③操作严格,不易掌握。

17楼:汝州人

分离细胞器用差速离心

dna半保留复制的证据那一节,用了氯化铯密度梯度离心------在必修二课本上,属于选学内容

18楼:匿名用户

分离细胞中的细胞器用差速离心法;**dna的复制方式用梯度离心法。

19楼:这不知足的满足

差速离心:膜的制备,分离细胞器。

梯度离心不知

20楼:像自由一样飞翔

其实高中并不涉及他们的区分

21楼:匿名用户

分离不同重量的物质,比如分离细胞中不同的细胞器。

22楼:牛腿康

分离单细胞生物?分离哈哈哈哈哈哈哈哈哈哈哈

差速离心法的密度梯度离心法和差速离心法

23楼:手机用户

1:密度梯度离心中单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的;差速离心法是用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离

2:密度梯度离心只用一个离心转速,而差速离心用两个甚至更多的转速。

3:密度梯度离心的物质是密度有一定差异的,而差速离心是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分