PCR技术扩增目的基因中的引物有什么作用

2021-03-05 09:59:13 字数 4660 阅读 1423

1楼:曜血

引物的功能是作为核苷酸聚合的起始点,引导dna的合成。

能设定循环次数,及控制复制次数。pcr循环次数主要取决于模板dna的浓度。一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多。

2楼:匿名用户

1.与dna复制中的作用类似,但是在细胞内有其他的酶进行这项工作。在pcr技术中,只加入了四种底物和taq酶,模板。dna聚合酶只能在有3‘端时才能复制下去。

2.决定扩增片段。扩增目的基因,就要根据目的基因两侧序列设计引物,这样只有目的基因扩增了,得到大量目的基因。这是pcr技术的一项重要应用。

3楼:霍文宣

没有引物,dna复制的起点就不确定了,用于dna复制的dna单链是很长的,不光是目的基因(和其他你所需要的),而在基因工程中我们需要的dn**段比较起来是很短的,也就是说只要一对引物(这个寡聚核苷酸片段)之间所夹的这一部分的dn**段,为了准确地合成这段所需基因,我们需要一对引物的参与。

4楼:匿名用户

引物可以做为dna复制开始时dna聚合酶的结合位点,在细胞外的条件下,只有通过引物,dna才可以开始进行复制。引物是已知序列的dna小片段。

利用pcr技术扩增目的基因,引物是什么?

5楼:耽寂

引物本来就是单链的。书上画成双链才怪。

pcr所用的dna聚合酶只能顺着已经存在的一小段dna的尾巴来接着合成,它不会自己起头。引物就是这么一小段用来起头的dna。

dna本身很长很长,我们扩增时,只能扩增其中一小段基因。如何确定扩增哪一小段呢?就需要引物来帮忙了。

引物具有特殊的核苷酸序列,使它正好能与dna中某个特定的部位结合起来。你想一想,从直线上截取线段时是不是需要一左一右两个点呢?引物就相当与这两个点,所以pcr需要两个引物。

这两个引物,我们通常称之为一对引物,一个叫上游引物,一个叫下游引物。

6楼:匿名用户

一小段寡聚的dna,一般有两个(一对),分为上游引物和下游引物,分别指导dna两条链的聚合。它们主要作用有两个,一个是和模板特异性结合来指导taq聚合酶合成所要的片段。一个是提供一个3‘端的-oh末端,只有拥有一个-oh末端,dna聚合酶才能合成dna。

在体内是由小段的rna来提供的,在体外pcr试验中则用dna,因为dna比rna稳定易于储存。

利用pcr技术扩增目的基因,引物是什么?引物是什么

7楼:匿名用户

引物是人工设计合成的一对(两个)小片段dna,具有和目的基因两端互补的序列和人工设计的酶切位点,用于定位复制的起始位置和后续连接操作。

8楼:匿名用户

引领dna单链结合互补

pcr技术中“引物”是什么?有什么作用?引物需要复制吗?

9楼:90阿

引物是一段短的单链rna或dn**段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合内作用容的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。

引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条dna模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条dna模板链互补。

在pcr(聚合酶链式反应)技术中,已知一段目的基因的核苷酸序列,根据这一序列合成引物,利用pcr扩增技术,目的基因dna受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在dna聚合酶作用下进行延伸,如此重复循环,延伸后得到的产物同样可以和引物结合。   pcr引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板dna序列。如前述,引物的优劣直接关系到pcr的特异性与成功与否。

对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保pcr的成功,但遵循某些原则,则有助于引物的设计。

10楼:匿名用户

pcr技术中“引物”是一小段dna,其作用是:作为dna复制的起点,当一次复制完成后,引物也不到了一条链上,下次复制时,引物也需复制。

11楼:大地君

引物就是一段dna啊,能让dna聚合酶识别并在引物后进行碱基互补配对。需要的

为什么用pcr技术扩增目的基因不是用含碱基的核苷酸而是用引物,引物是什么东东,我高中的不要说的太复杂

12楼:孤独的雪人

首先,我们来说一下pcr技术所用的酶。所用的酶是taq dna聚合酶,现在已知的所有的dna聚合酶在使单个的脱氧核苷酸聚合的时候都有一个共性,它无法从头开始,只能在一段序列的末尾续接。在生物体内dna自行复制的时候也是如此,只不过那个引物是生物体内rna聚合酶合成的一段rna,在pcr的时候引物是人们合成的一段dna。

pcr技术大致有三步:第一步94°c使dna变性,双链变单链;第二步65°c退火;第三步72°c延伸 依次循环。taq dna聚合酶是从极端微生物体内提取的,可以耐受高温,所以用它。

说到引物,就可以说说一些在引物上做文章的技术。定点突变技术,在pcr的时候把引物的某一个核苷酸换成需要的突变核苷酸,pcr之后的产物就是在人为突变引物的后面续接而成的,就可以得到突变的目的dna。这里只是举一个典型例子,具体的在你今后学《分子生物学》和《生物化学》会逐步学到。

13楼:i就是爱问

引物是一小段单链dna或rna(一般用单链dna),作为pcr扩增的起始点,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,在引物的3′-oh上,核苷酸以二酯链形式进行合成,简单地说,引物就像是一个“向导”,引导4类脱氧核苷酸。模板dna、引物和4种脱氧核苷酸是必要条件。

pcr引物是什么?

14楼:点点星光带晨风

聚合酶链式反应简称pcr(polymerase chain reaction) (又称:多聚酶链式反应) pcr是体外酶促合成特异dn**段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的dna得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。

它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有dna,rna的地方。pcr又称无细胞分子克隆或特异性dna序列体外引物定向酶促扩增技术。

15楼:暴走少女

pcr引物又称为寡核苷酸引物,也就是rna,是由人工合成的,分为两种,引物1和引物2。由于dna聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制,也就是只能识别3'的尾端。

而且只能把核苷酸连到已经和dna模板互补产生的多核苷酸链上,所以引物1和2分别于双链dna的两条链的尾部(就是末尾是3'端的那一边)结合,为那些脱氧核苷酸提供3'的末端,就相当于开了个头。然后在dna聚合酶的作用下合成两条新链。而那段引物就成了新链的一部分。

16楼:白色的妖精

通俗的讲,引物就是为了增幅目的dna而导入的短小dn**断,在pcr反应中,新合成的dna是要接在引物上才能继续按照模版dna复制。引物的设计因需要增幅的序列而不同。举个例子来说,你要增幅如下序列:

accctcccgccccccccgtat

(互补碱基不写了)

那么一般来说,你就要导入以accctc结尾的引物使得增幅继续下去,具体方法和注意事项楼主可以看gee_an大侠的资料。

查了一下测序公司的网页,如果要同定微生物,楼主需要准备如下东东:

1、待测菌体。试管或培养皿都可以,但必须是纯粹的待测菌体,不能含有其他的微生物。

2、提纯的dna。如果1有致病性或传染性,那么楼主就得自己提纯dna再交给测序公司。dna纯度要求可以做pcr。

ps:很佩服楼主充足的经费,我们这里同定一次要2800人民币……

17楼:匿名用户

pcr的目的是大量扩增你所需要的片断。换句话说,就是用人工的方法大量复制dna。而dna的复制是以一条链为模板,新合成链按照碱基互补配对进行的。

可是有一个问题,dna的合成必须是前端有一小段序列,他接着这段序列合成,而不能从无到有,凭空合成。它前面这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是dna也可以是rna,一般20多bp.

需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物

pcr反应原理中引物是什么,从**来,有什么作用

18楼:匿名用户

引物是一段短的单链rna或dn**段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。

引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条dna模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条dna模板链互补。

在pcr(聚合酶链式反应)技术中,已知一段目的基因的核苷酸序列,根据这一序列合成引物,利用pcr扩增技术,目的基因dna受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在dna聚合酶作用下进行延伸,如此重复循环,延伸后得到的产物同样可以和引物结合。   pcr引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板dna序列。如前述,引物的优劣直接关系到pcr的特异性与成功与否。

对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保pcr的成功,但遵循某些原则,则有助于引物的设计。

参考资料:http://baike.baidu.***/view/352480.htm

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