为什么使用30的甘油保存菌种?请求指教

2021-03-04 10:27:48 字数 1908 阅读 2170

1楼:禾鸟

微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理从而达到保藏目的。而且,甘油管冷冻保藏法适用于一般细菌的保存,同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种,适用范围广,操作简便,效果好,无变异现象发生。

甘油-生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液,其原因是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用,且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分,从而更好地保护了待保存的菌株。

扩展资料

1、冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥),其中真空冷冻干燥法最常见。

2、寄主保藏法

寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。

无论采用何种保藏方法,首先应该挑选典型菌种的优良纯种来进行保藏,最好保藏它们的休眠体,如分生孢子、芽孢等。其次,应根据微生物生理、生化特点,人为地创造环境条件,使微生物长期处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。

2楼:匿名用户

1. 20%甘油保存菌种是指甘油:菌液=20:80,800ul菌液加200u灭菌l甘油后的甘油后,充分混匀后,-70度保藏.(注意甘油要慢慢吸)

2. 将一般细菌的菌种纯化后接种于普通肉汤管,4~6h增菌后,加入适量甘油一生理盐水保存液,-20℃冰箱保存;链球菌属和奈瑟氏菌属的菌株纯化后接种于血清肉汤管,在5%~10%co2中经8~10h增菌后,加入适量保存液,80℃低温冰箱保存;真菌菌种纯化后直接取菌洗入肉汤,不做培养,加入保存液后,-20℃冰箱保存。结果 在连续3年实验期内,各菌种保存效果良好,且其形态结构、染色特性、生化反应等与标准株相符。

结论 使用甘油生理盐水保存法来保存菌种,各菌种保存时间长,方法简便,特别是使链球菌、奈瑟氏菌和弧菌等需特殊保存方法保存的菌株在一般实验室得以保存。

3. 常用的是终浓度 10-30% 的甘油。

由于纯甘油十分粘稠,很难定量,一般配成终浓度 50% 的水溶液,高压灭菌后室温保存即可。使用时按 50% 甘油:菌液 = 1:1 混合均匀,然后迅速冻结。

a. 先把甘油稀释成50%,然后灭菌

这样20%的终浓度用400微的菌体加600微的50%甘油混合不就可以啦

纯的甘油太粘稠啦,用枪不好吸的

b 终浓度15%。甘油配成80%的浓度,到时候加800微升菌体,200微升甘油就好。】

为什么用甘油保存菌种?原理是什么?干燥?隔绝空气????

3楼:匿名用户

1、冷冻保存时菌液会被冻起来,内部产生的“冰晶”会使细胞破裂等,加入如甘油后可以防止对细胞的伤害。

2、简单来说就是抗冻,原理是甘油能够提高水体的黏稠度,使其冰点提高,防止细胞内部产生冰晶造成细胞的损害,通常使用甘油的终浓度在10%~20%,该范围外的浓度会对细胞产生毒性,质粒会很容易丢失。

3、高浓度甘油保存菌种据说会影响菌种的表达活性,如果该菌只用一次怎么化都没关系,甘油浓度太高质粒就很容易丢失。

4楼:匿名用户

甘油保存菌种的条件是需要冻存。主要靠低温来降低微生物活性,达到保存的目的。加甘油是为了避免水结冰产生冰晶损伤细胞。

5楼:多1°c热爱

在细胞和病毒的冻存过程中,会形成冰晶损伤和溶质损伤,加入甘油和dmso的目的就是为了防止这两者对细胞和病毒的损伤!

另外还可以保持湿润,锁水。有点类似女生做的**呦

6楼:匿名用户

楼主注意,并非是用甘油保藏菌种,甘油只是一种介质,并非是一种方法,使用甘油有隔绝空气、衡湿、调节渗透压、并在冷冻过程中起冷冻保护剂的作用。

7楼:此名我注册

隔离空气,调节水分活度,调节渗透压

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