为什么做了细胞HE染色后胞浆和胞核全是淡蓝色的呢

2021-02-25 09:02:03 字数 4522 阅读 5264

1楼:风风包包里

he染色主来要是为通细胞及胞核形态自、大小来区别bai各种细du胞的,并不是直接通过颜zhi色来区分dao的

苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。

炎性细胞一类人体内的免疫细胞,包括中性粒细胞、嗜酸粒细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞和浆细胞。

淋巴细胞是最容易和其它几种细胞区分的,细胞小而圆,核浆比很大,核浓染成深蓝紫色。浆细胞大小介于淋巴细胞和巨噬/多核/巨细胞之间,胞浆略嗜碱,核偏位,核染色深,高倍镜下可见核呈车轮状。多核细胞和巨细胞的概念是不是有点重叠,多核细胞故名思意是有多个核的大型细胞,如朗汉氏巨细胞,常在肺结核的干酪样坏死灶周围出现,多个核排成一圈,异物巨细胞也是有许多个核的体积巨大的细胞,这两种巨细胞胞质都偏酸。

巨噬细胞似乎在不同的组织中有不同的名称。

组织学细胞用 he染色后细胞核看起来为什么是黑色??不是蓝紫色吗?? 30

2楼:匿名用户

细胞核染色质增多,颗粒变粗就会导致颜色变深。一般**旺盛的细胞就会这样。

he染色细胞核发紫是什么原因?

3楼:22222碎心无痕

你好,he染色bai就是用苏木精du和伊红对细胞内的核zhi糖体和细胞质染dao色的方法。

h:hematoxylin,苏木版精

e:eosin,伊红权

苏木精(hematoxylin,h)是一种碱性染料,可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色,被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。

he染色的方法步骤及注意事项

4楼:匿名用户

一、实验步骤:

(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用pbs 洗涤3次。

(2)样品固定:95%乙醇固定20min,pbs洗涤2次,每次1min。

(3)染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。

(4)分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。

(5)染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。

(6)吹干或自然晾干细胞 爬片后,中性树胶封片。

若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。

二、注意事项:

1、染色时调节ph值很重要。如果组织块在****中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。

染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。

2、切片染苏木精后,分色这一步是关键,应在显微镜下控制进行,一般以细胞核染色清楚(晰)而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅,应重新染色后再行分色。

3、切片经酒精脱水后,入二甲苯时可出现白色不透明状态,此为脱水不彻底,应将切片退回无水酒精,更换酒精、二甲苯,以求彻底脱水与透明。

4、在染色过程中不要让切片干燥,以免切片收缩、变形,影响神经元形态。

5、切片从二甲苯取出或进入二甲苯前,切片周边均应擦干净或吸干多余水分。

6、最后封固时,要用中性树脂,防止日后褪色,盖片要选大于组织块的面积,如漏出一部分不久将会褪色,所用树脂浓度要适当,树脂封固时不能有气泡。

扩展资料

一、细胞核染色原理:

苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是dna,在dna的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外。

使dna双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。

二、细胞浆染色原理:

细胞浆内主要成分是蛋白质,为两性化合物、细胞浆的染色与ph值有密切关系,当ph调到蛋白质等电点4.7-5.0时,胞浆对外不显电性,此时酸或碱性染料不易染色。

当ph调到6.7-6.8时,大于蛋白质的等电点ph值,表现酸性电离,而带负电荷的阴离子,可被带正电荷的染料染色,现时胞核也被染色,核和胞浆难以区分。

因此必须把ph调至胞浆等电点以下,在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷(阳离子),就可被带负电荷(阴离子)的染料染色。

伊红y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合而使细胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织,嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。

5楼:南京金益柏生物科技****

zt一 取材和固定

取材后经固定24小时(4%pa灌注取材的后固定6~8小时)以后,流水冲洗24小时,置于70%~80%乙醇中,可长期保存。

二 脱水和包埋

1、95%alc(二道) i 2~4h

ii 2h

2、无水alc(二道) i 1.5h

ii 1h

3、二甲苯+无水乙醇(1:1) 20min

4、二甲苯(二道) i 10min

(注:脱水透明esp.透明时间可适当延长) ii 10min

5、浸软蜡(50~52°C)(二道) i 30min

ii 1h

6、浸硬蜡(58~60°C)(二道) i 30min

ii 30min

7、包埋:注意温度、切面。

三 切片

修、切、展、贴、烤(烤片55~60°C) 3~10h

四 he染色

1、二甲苯脱蜡 五道,每道5~10分钟

2、无水乙醇 i 5min

ii 5min

3、95%乙醇 i 5min

ii 5mn

4、80%乙醇 5min

5、70%乙醇 5min

6、d.w. 3~5min

7、harris苏木素液 5min(冬天可适当延长,eg.20min)

8、水洗

9、0.5%盐酸酒精分色 3~10seconds,镜下观察

10、水洗蓝化 15~30min(注意换水)

11、70%乙醇 5min

12、80%乙醇 5min

13、伊红液(95%乙醇溶液) 3~30seconds

14、95%乙醇 i 1min

ii 5min

15、无水乙醇 i 5min

ii 5min

16、二甲苯+乙醇(1:1) 5min

17、二甲苯 i 5min

ii 5min

iii 5min

18、中性树胶封片。

he染色注意事项:

1. 染色时调节ph值很重要。如果组织块在****中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。

因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。

2. 切片染苏木精后,分色这一步是关键,应在显微镜下控制进行,一般以细胞核染色清楚(晰)而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅,应重新染色后再行分色。

3. 切片经酒精脱水后,入二甲苯时可出现白色不透明状态,此为脱水不彻底,应将切片退回无水酒精,更换酒精、二甲苯,以求彻底脱水与透明。

4. 在染色过程中不要让切片干燥,以免切片收缩、变形,影响神经元形态。

5. 切片从二甲苯取出或进入二甲苯前,切片周边均应擦干净或吸干多余水分。

6. 最后封固时,要用中性树脂,防止日后褪色,盖片要选大于组织块的面积,如漏出一部分不久将会褪色,所用树脂浓度要适当,树脂封固时不能有气泡。

苏木精—伊红染色法简称he染色法,它是最常用的普通染色方法。苏木精(hematoxylin)是阳离子染料,将细胞核内的嗜碱性物质染成蓝紫色。伊红(eosin)是阴离子染料,将细胞质和胶原纤维等染成粉红色。

6楼:tcoo_阿西

he染色步骤:

1、脱蜡,脱蜡二甲苯i、ii各10分钟,事先准备好盖玻片。

2、覆水,100%(i、ii)、90%、80%、70%酒精各5分钟,自来水冲洗5分钟×3。

3.、苏木精染色5分钟,根据染色情况,可以适当增加或减少染色时间,流水冲洗。

4、5%乙酸分化1分钟,流水冲洗,用吸管滴加乙酸,布满玻片上的组织即可,分化后颜色变浅了一些,成为蓝色。

5、返蓝:返蓝液,实验室没有,也可不用。

6、伊红染色1分钟,根据染色情况,可以适当增加或减少染色时间,流水冲洗。

7、脱水:70%、80%、90%、100%酒精各10秒,二甲苯1分钟,可以在通风橱自然晾干再封

片,约5分钟左右。

8、滴上中性树胶,封片,用吸管滴上一滴即可,尽量少滴,但压片后要将组织全部覆盖完,避免中间有气泡。

肿瘤he染色为什么有些细胞核染色很深

7楼:匿名用户

he染色是病理上最常用的染色技术,几乎每个病理都要经过he染色后才能成片不管是不是癌变的病人,都需要经过染色这一步至于原理,比较复杂,细胞浆和细胞核的染色都有其原理,有兴趣可以找病理技术的书看一看

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