1楼：陕西英童乳业
谷物种子萌发时淀粉酶活力的测定
几乎所有植物中都存在淀粉酶,尤其是萌发的禾谷类种子,淀粉酶活性最强.主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶.种子萌发时,淀粉酶活性随萌发时间迅速增加,将淀粉分解成小分子糖类,供幼苗生长.
α-淀粉酶随机水解淀粉的α-1,4-糖苷键,作为淀粉分解的起始酶而起主要作用；其水解产物为麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原性糖；β-淀粉酶水解非还原端的第二个α-1,4-糖苷键,水解产物为麦芽糖,并能使一部分糊精糖化.本实验以萌发种子为材料,测定其中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异.
【原理】
两种淀粉酶具有不同理化特性,α-淀粉酶不耐酸,在ph3?6以下迅速钝化；β-淀粉酶不耐热,在70℃下15min则被钝化.据此,在测定时钝化其中之一,就可以测定出另一种酶的活力,本实验采用加热钝化β-淀粉酶测出α-淀粉酶活力,再与非钝化条件下测得的总淀粉酶活力比较,求出β-淀粉酶活力.
淀粉的水解产物麦芽糖及其他还原性糖能与3,5-二硝基水杨酸试剂反应,使其还原生成红色3-氨基-5-硝基水杨酸.在一定范围内,其颜色深浅与淀粉酶水解产物的浓度成正比,可用麦芽糖(或葡萄糖)浓度表示,用比色法测定淀粉生成的还原糖的量,以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力.
【仪器与用具】
分光光度计；离心机；恒温水浴器；研钵；具塞刻度试管25ml 13支,刻度吸管1ml、2ml、5ml各1支；容量瓶50ml 2支.
【试剂】
麦芽糖标准液(1mg／ml)：称取100mg麦芽糖,用蒸馏水溶解并定容至100ml.
dns试剂(3,5-二硝基水杨酸)：精确称取3,5-二硝基水杨酸1g,溶于20ml 12mol／l naoh溶液中,加入50ml蒸馏水,再加入30g酒石酸钾钠,待溶解后用蒸馏水定容至100ml.盖紧瓶塞,勿使co2进入.
若溶液混浊,可过滤后使用.
1mol／l ph5?6的柠檬酸缓冲液：a液(0?
1mol／l柠檬酸)：称取分析纯柠檬酸21?01g,用蒸馏水溶解并定容至1l；b液（0?
1mol／l柠檬酸钠）：称取柠檬酸钠29?41g用蒸馏水溶解并定容至1l；取a液55ml与b液145ml混匀,即为0?
1mol／l ph5?6的柠檬酸缓冲液.
1％淀粉溶液：称取1g淀粉溶于100ml 1mol／l ph5?6的柠檬酸缓冲液中.
dns测定还原糖请教！！！
2楼：匿名用户
不管你的dns试剂是如何配制的，
只要在绘制糖标准曲线和测定时用的dns试剂是一样的，就不会对结果有影响。
dns与还原糖共热后生成棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖含量与反映液的颜色强度成正比。利用比色法可测定样品中还原糖和总糖含量。
3楼：匿名用户
你用的是什么试剂呢？
dns法标准曲线过零点吗
4楼：go蔡依林我爱你
我做的话，一般不加0，0点，所以不是一定要过零点。
dns法就是测定还原糖的，还原糖有很多种，用哪种作曲线都行。葡萄糖最常见，又便宜，所以一般都用葡萄糖作曲线。
dns法测定葡萄糖标准曲线为什么要加浓硫酸和苯酚，还要不要加dns试剂。 测定样品还原糖时加硫酸苯酚？
5楼：匿名用户
没有加浓硫酸啊。
10mg/ml标准葡萄糖溶液：
精密称取无水葡萄糖1.0000置80ml蒸馏水中搅拌溶解，待完全溶解后定容至100ml。标记为10mg/ml的标准葡萄糖溶液，同时标记配制日期，4℃条件下保存。
dns试剂的配制
称取3,5-二硝基水杨酸31.50g缓慢加入5000ml蒸馏水中，不断搅拌，水浴至45℃，逐步加入1000ml氢氧化钠溶液（e），不断搅拌至溶液清澈透明（在加入氢氧化钠溶液过程中，溶液温度不要超过48℃）。再逐步加入四水酒石酸钾钠910.
0g、苯酚25.0 g、无水亚硫酸钠25.0 g，继续45℃水浴加热，同时补水3000ml，不断搅拌，至上述物质完全溶解后，冷却至室温，并定容到10000 ml。
用滤布过滤，将滤液储存于棕色瓶中，标识名称和配制日期，避光，室温保存7天后可以使用。有效期6个月。
分析步骤：
标准曲线的绘制：
取8支试管按下表加入相关试液后再加入1.5mldns试剂,充分摇匀，置沸水浴中反应5min。迅速冷却至室温，用水定容至5.
0ml，用0号试管试液作对照，在540nm波长下测其它各试管试液的吸光度。以吸光度为纵坐标，以葡萄糖含量为横坐标绘制标准曲线。
试管号012
3456
7缓冲液加入量（μl ）
1000
990985
980975
970965
960葡萄糖标准液加入量（μl ）010
1520
2530
3540
葡萄糖含量（μg）
0100
150200
250300
350400
dns法通过葡萄糖标准曲线测定还原糖含量的原理是什么
6楼：***
葡萄糖属于还原糖。dns法就是测定还原糖的，还原糖有很多种，用哪种作曲线都行。葡萄糖最常见，又便宜，所以一般都用葡萄糖作曲线。
用dns法测发酵液还原糖含量时，测出的吸光度值很小甚至有负值出现，是
7楼：匿名用户
我记得做标准曲线的时候,是用dns+蒸馏水做空白,不加葡萄糖溶液.你测的时候如果样品是不经过稀释,直接加dns的,就用dns做空白咯.
dns标准曲线为什么用水补足到15ml刻度
8楼：匿名用户
dns即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸（dns）与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的.因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关,而对还原糖的种类没有选择性,故dns方法适合用在多糖（如纤维素、半纤维素和淀粉等）水解产生的多种还原糖体系中. 将6.
3克dns和262ml 2mol/l氢氧化钠,加到500ml含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中,再加上5克重苯酚和5克亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加水定容到1000ml,即制成3,5-二硝基水杨酸试剂,贮于棕色瓶中备用. 编辑本段葡萄糖标准曲线的绘制别取葡萄糖标准液（1mg/ml）0、0.2、0.
4、0.6、0.8、1.
0ml于25 ml试管中,分别准确加入dns试剂2ml,加9ml蒸馏水,沸水浴加热3min,流水冷却,定容.在540nm波长下测定吸光度. 编辑本段样品的测定样品液适当稀释,使糖浓度为0.
1-1.0mg/ml,取稀释后的糖液1.0ml于15ml刻度试管中,加dns试剂2.
0ml,沸水煮沸2min,冷却后用水补足到15ml刻度,在540nm波长下测定光密度.从标准曲线查出葡萄糖mg/ml数.求出样品中糖含量.
用dns测还原糖，最大吸光值通常是多少
9楼：嘿
不管你的dns试剂是如何配制的，只要在绘制糖标准曲线和测定时用的dns试剂是一样的，就不会对结果有影响。 dns与还原糖共热后生成棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖含量与反映液的颜色强度成正比。利用比色法可测定样品中还原糖和总糖含量。
dns法测还原糖和总糖实验中可以先测还原糖再测总糖吗
10楼：
dns测总糖要先水解成单糖，苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。