荧光显微镜本身具有哪些作用,荧光显微镜的用途

2020-11-25 19:00:33 字数 5629 阅读 5038

1楼:jane简

荧光显微镜是显微镜中的一种,主要是用来研究和看荧光标本的,是利用紫外线作为光源,然后来照射标本,来观察标本的形状和位置。有些物质是专门受到紫外线的照射下可以发出荧光的,有些物质是需要带荧光的抗体,经过紫外线的照射才能发出荧光。荧光显微镜的存在就是专门对这两类物质进行研究的。

今天,小编就给大家介绍一些荧光显微镜本身都具有哪些作用呢?

第一:荧光显微镜对于物质的检出能力是非常高的,具有放大的作用;而且对于被检测物质的细胞的刺激也是非常小的,可以检测活体的染色体;还有就是可以进行多个步骤的染色。

第二:对于荧光素的构造观察是非常好的,一般的显微镜是看不出来的。而且对于一些物质是否有荧光,荧光是什么色调的进行判断,还能看出是不是抗体的荧光。

此款显微镜对于物体的定性、定量分析都是可以测定的。

总之荧光显微镜主要就是为了研究跟荧光物质有关的显微镜,一般的显微镜对于这类物质是观察不出来的。所以,大家一定要正确的认识荧光显微镜的作用,要辨别它和一般的显微镜的区别。

荧光显微镜的用途

2楼:匿名用户

荧光显微镜是用来看荧光标本的,它的波长短,普通显微镜是用普通可见光源看标本的。

原理:荧光镜检术是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光,然后观察。优点:

3楼:匿名用户

以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。

细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别:

1.照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上;

2.光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜;

3.有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人目。

4楼:匿名用户

体视荧光显微镜使用方法与注意事项

使用方法:

(1)将材料片放在载物台上。

(2)开启荧光显微镜稳压器.然后按下启动组点燃紫外灯15min内不得关闭,关闭后3min内不得再启动。

(3)将激发滤光片转至v,分色片调到v,选用495或475nm阻挡滤光片。

(4)选用uvfl40、uvfl100荧光接物镜镜检。

(5)在玻片上加无荧光油,先用40 x,再用100 x调焦镜检.呈现荧光。

(7)因荧光物质受紫外光照射时随时间的增长荧光逐渐变弱,因此镜检时应经常变换视野。

(8)亦可用uvfl10或uvfl20低倍镜镜检材料(用低倍镜时不加无荧光油)。

荧光图像的记录方法:

荧光显微镜所看到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标,即凭工作者目力观察。作为一般定性观察,基本上可靠的。

随着技术科学的发展,在不同程度上采用客观指标记录判断结果,如用细胞分光光度计,图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果,也必须结合主观的判断。

荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要,由于荧光很易褪色减弱,要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。只是需要采用高速感光胶片如asa200以上或24。

以上。因紫外光对荧光猝灭作用大,如fitc的标记物,在紫外光下照射30s,荧光亮度降低50%。所以,**速度太慢,就不能将荧光图像拍摄下来。

一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置。

注意事项:

(1)严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作,不要随意改变程序。

(2)应在暗室中进行检查。进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本。

(3)防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜。

(4)检查时间每次以1~2h为宜,超过90min,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后,荧光也明显减弱;所以,最多不得超过2~3h。

(5)荧光显微镜光源寿命有限,标本应集中检查,以节 省时间,保护光源。天热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时,须待灯泡充分冷却后才能点燃。

一天中应避免数次点燃光源。

(6)标本染色后立即观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延缓荧光减弱时间,防止封裱剂蒸发。

(7)荧光亮度的判断标准:一般分为四级,即“一”—无或可见微弱荧光。“+”—仅能见明确可见的荧光。“++”—可见有明亮

荧光显微镜的作用原理?

5楼:匿名用户

荧光的原理是某些物质会在高强度的短波长光线照射下,会发出波长稍长的发射光(荧光)。

而我们一般都是观察被激发荧光基团所发射出来的波长稍长的发射光(荧光)。

但是激发的光会很强,所以我们就需要把激发的光全部滤去,这样才可以看到荧光基团的发射光(荧光)。

荧光显微镜一般都用高强度的汞灯做激发光源。使用滤色片把不需要的光滤去,只留下激发荧光集团的高强度很纯的光线。这个单色的光线通过物镜照射到样本上之后,样本会被激发出发射光(荧光),荧光和激发光都会沿着物镜光路返回,这样的话,就需要用一个二相色镜把激发光滤去,只让我们需要看到的荧光透过。

这个荧光沿着显微镜的光路最后到达目镜下,然后进入我们的眼睛,我们就可以看到荧光基团所发出来的荧光了。

注:在荧光显微镜中,最核心的是 1 荧光光源,因为荧光需要高强度的光才可以被激发出来,我们一般都用汞灯,另外还有长寿命金属卤素灯,当然还有激光。2 激发块(几个滤色块组成的组件,一般有激发光滤色片、二相色镜、发射光滤色片),因为我们的荧光基团都是在特定波长的光线下才可以激发,并且被激发的发射光也具有特定波长。

所以需要选择合适的激发块(主要是选择激发光滤色片、二相色镜、发射光滤色片这三个的可以通过的光线波长等参数)。

另外物镜也对荧光显微镜有很大影响。因为只有高档次的物镜才可以提供完好的色差矫正。

6楼:匿名用户

某些物质在一定波长光(如紫外光)的照射下,在极短时间内所发出来的比照射光波长更长的可见光

7楼:匿名用户

用特殊波段的光照射标本片,以此来判断是否含有某类物质,或通过光的强弱来观察它们的变化!

8楼:南郊野人

利用特殊光线,将经过特殊材料染色的标本放在显微镜下,经行激发,已达到对比的效果。

荧光显微镜原理 15

9楼:千书仅剩

荧光显微镜是一种较为常用的的光学显微镜,其基本原理是利用一定波长的激发光对样品进行激发,使之产生一定波长的荧光,从而用于对样品结构或其组分进行定性、定位、定量观察检测。

荧光显微镜是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光,然后观察。荧光显微镜广泛应用于生物,医学等领域。

(1)荧光显微镜一般分为透射和落射式两种类型。

a.透射式:激发光来自被检物体的下方,聚光镜为暗视野聚光镜,使激发光不进入物镜,而使荧光进入物镜。

它在低倍情况下明亮,而高倍则暗,在油浸和调中时,较难操作,尤以低倍的照明范围难于确定,但能得到很暗的视野背景。透射式不使用于非透明的被检物体。

b.落射式:透射式目前几乎被淘汰,新型的荧光显微镜多为落射式,光源来自被检物体的上方,在光路中具有分光镜,所以对透明和不透明的被检物体都适用。

由于物镜起了聚光镜的作用,不仅便于操作,而且从低倍到高倍,可以实现整个视场的均匀照明。

优点:检出能力高

对细胞的刺激小

能进行多重染色

用途:物体构造的观察

荧光的有无、色调比较进行物质判别

发荧光量的测定对物质定性、定量分析

普通光学显微镜。荧光显微镜,相差显微镜,电子显微镜各有什么特点与用途?

10楼:匿名用户

xtb连续变倍体视显微镜操作规程

视度调节圈 目镜

变倍调节器

调焦手轮 反射照明器

物镜 止紧手轮 工作台

显微镜底座

透射光座 反射镜调节旋钮

xtb连续变倍体视显微镜外观图

1、显微镜的基本使用规则:

1、1转动显微镜上的变倍调节器,可以连续调节放大倍率,并从标记处读出变倍物镜的放大倍率

1、2放大倍率越大,显微镜的视野越小、焦距越小,可以通过调焦手轮向下调节物镜的焦距;反之亦然

1、3应根据观察事物的不同要求调节倍率,如果想要观察物体的某一个细节,可以将倍率调大、焦距调小;反之如果想要观察物体的全貌可以将倍率调小、焦距调大

2、根据待观察对象的性质选择是反射光还是透射光。如要观察粘箔片表面的污迹及气泡,可以使用反射光;要观察芯片的钻蚀情况,就要使用透射光

3、根据物体的颜色和使用反射光、透射光的情况,选择工作台(黑白、磨砂、透明玻璃),将其放入显微镜底座大圆孔内,并用压片压紧

4、如果观察者的双眼视力不同,可以通过调节左眼目镜的视度调节圈,使左右目镜观察的物体象同样清晰

5、根据观察者的双眼瞳孔距离,可以双手轻微扳动两目镜镜座,改变瞳孔距离以适应双眼观察(合适的观察为:双眼看到的同一物体景象重合)

6、通过调节反射照明器上的旋转镜头及反射镜调节旋钮可以使照明状态最佳(合适的光斑及亮度)

7、调节随机附带的灯光变压器上的旋钮,可以调节照明灯的亮度至合适为止

8、止紧手轮主要用于大范围调节焦距及维修时使用,平时一般不需要调整

9、目镜的放大倍率可以从目镜的刻度上读出,一般为10倍(10×),物镜的放大倍率可以从变倍调节器标记处读出,总的放大倍率=目镜的放大倍率×物镜的放大倍率

10、物镜的焦距指物镜与被观察对象之间的距离,如图中 所示

11楼:

http://bjhuazhuo.blog.163.***/edit/ 参考此博客。看是否对你有帮助。

荧光显微镜的两种滤光片各起什么作用?

12楼:超级酷乐猫

荧光显微镜(lwd300-38lft,lw300lft)的滤光片不止两种。

种类有以下几种及其作用:

1. 吸热滤光片

吸热滤光片是防止光源光谱中的热辐射线损伤光具组所必需的滤光片。

2.激发光滤光片

激发光滤光片可以选择性吸收长波谱线而吸通透紫外线,紫色,蓝色和绿色光线的滤光片为激发滤色片。

3.阻挡滤光片

阻挡滤光片是选择性吸收短波谱线和红外线而通透较长波长可视线的滤光片,其功能是使观察都能看到被检物体所激发出来的荧光,同时保护观察都的角膜免遭紫外线伤害

4.色光分离滤光片

色光分离滤光片是将激发光反射到被检物体上,使被检物体激发出荧光,再将荧光透射到目镜的滤光反射镜。这类滤我片只能用于落射光聚光器中,而透射光荧光显微镜不需要色光分离。

5.干涉滤光片

干涉滤光片是高性能激发滤光片的一种。它是将数张薄层金属膜叠放在抛光的两张玻璃片之间制成的滤光片。每张薄金属膜的折光系数都不相同,因此照明光源的各种不同波长的谱线在每张金属膜上反复进行反射,使得某些波长的谱线因相消干涉而抵消,另一些波长的谱线相加干涉而得以加强,并透射过去,这样得到透射波谱很窄、半波峰宽度只有6-20nm,透光度可达到60%-70%的滤光片。

显微镜对科学发展起了什么作用,扫描探针显微镜对现代科学的发展起了什么作用

1楼 匿名用户 起到了观察微小世界的作用 2楼 韩宁 起到了巨大的推动作用,特别是在细胞学 组织学上,是现在医学,动植物学的革命性工具,仿佛冷兵器向热兵器时代过渡的那杆枪! 3楼 恶魔小 起到了帮助观察微小世界的作用,对科学界起到了巨大的推动力 扫描探针显微镜对现代科学的发展起了什么作用 4楼 lo...