测定酶活力时应遵循哪些基本原则,配合日粮时应遵循哪些基本原则?

2020-11-24 19:42:19 字数 5397 阅读 4586

1楼:邂逅

(1)酶促反应过程中,只有最初一段时间内反应速度与酶活性成正比,随着反应时间的延长,反应速度即逐渐降低。

(2)要规定一定的反应条件,如时间、温度、ph等,并在理酶测定过程中保持这些反应条件的恒定,如温度不得超过规定温度的士1℃,ph应恒定。

(3)配制的底物浓度应准确且足够大,底物液中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中,以防止底物被分解。

(4)标本要新鲜,由于绝大多数酶可因久置而活力降低,标本如无法及时测定,应保存于冰箱中。用血浆时,应考虑到抗凝剂对酶反应的影响。有些酶在血细胞、血小板中的浓度比血清高,为此在采血、分离血清时,应注意防止溶血和白细胞的破裂。

配合日粮时应遵循哪些基本原则?

2楼:中国农业出版社

(1)选用适合的饲养标准:根据猪的品种、年龄、生长发育阶段以及生产目的和水平,选用适当的饲养标准,确定营养需要量。

(2)饲料品种多样化,搭配合理:充分利用当地饲料资源,力求饲料品种多样化,至少要4~5种,精、青、粗饲料合理搭配,以发挥饲料相互促进、协作、互补、制约的生物学作用,提高利用率。

(3)保证饲料品质,注意适口性:要求采用的原料无毒害,不霉烂变质,不苦涩,无污染,无砂石杂质等,适口性好。

(4)注意日粮体积,控制粗纤维含量:要注意饲料干物质量,使饲料的体积与猪的消化道容积相适应,保证猪能吃得下、吃得饱,又能满足营养需要。应根据猪的消化生理特点,按饲料标准的限量,有区别地控制饲料中纤维含量,仔猪不超过4%,生长育肥猪不超过6%~8%,种公猪、种母猪不超过10%~12%。

(5)饲料要相对稳定,配合要均匀:改变饲料种类或比例要缓慢进行,骤变会造成消化不良,影响生长。饲料配合要均匀,特别是微量元素和维生素,在饲料配制中所占比例甚微,必须粉碎后与少量辅料混合均匀,然后再与更多辅料混合,再混入混合料中。

(6)要考虑经济原则:在满足猪营养需要的前提下,应尽量选用**低廉、**广泛的饲料,坚持因时、因地制宜,就地取材,充分利用当地饲料品种资源,节省运费,降低饲料成本,提高经济效益。

酶活测定方法有哪些原则?最好是详细的答案

3楼:匿名用户

一、原则

ph值和温度

体外测定酶活力时选择的测定条件应尽可能接近酶在动物体内的消化环境。

干扰成分

侧定酶活力时应尽可能的去除干扰成分。

底物在选择底物时一定要用纯度较高的底物,底物的反应浓度也不应太高。

酶样的稀释度

稀释度要适中,过高,酶活力与产物生成量的关系就会超出线性范围。

其他因素

酶促反应时间、反应体系的离子强度等因素也可以影 响酶活力的测定结果。因此,在酶活力体外测定时需要对这些 因素进行深人研究。

二、酶活测定方法

还原法酶与底物在特定的条件下反应,酶可以促使底物释放出还原性的基团。在此反应体系中添加化学试剂 ,酶促反应的产物可与该化学试剂发生反应,生成有色物质。通过在特定的波长下 比色 ,即可求 出还原产物的含量 ,从而计算出酶活力的大小 。

色原底物法

通过底物与特定的可溶性生色基团物质结合,合**工底物。该底物与酶发生反应后 ,生色基团可被释放出来 ,用分光光度法即可测定颜色的深浅,在与已知标准酶所做的曲线比较后 ,即可求出待测酶的活力。

粘度法该法常用于测定纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶 的活力。木聚糖和β-葡聚糖溶液通常情况下可形成极高的粘度,当酶作用于粘性底物时木聚糖和β-葡聚糖会被切割成较小的分子使其粘度大 为降低。基 于poiseuille定律我们知道 ,只要测定一定条件下溶剂和样品溶液的运动粘度,便可计算特性粘数,并以此来判断酶的活力。

高压液相色谱法

酶与其底物在特定的条件下充分反应后 ,在一定的色谱条件下从反应体系中提取溶液进行色谱分析,认真记录保留时间和色谱图,测量各个样的峰高和半峰高,计算出酶促反应生成物的含量 ,从而换算出酶活力的数值。

免疫学方法

常用 于酶活性分析的免疫学方法包括:免疫电泳法 、免疫凝胶扩散法。这两种方法都是根据酶与其抗体之间可发生特定的沉淀反应 ,通过待测酶和标准酶的比较,最终确定酶活力。

免疫学方法检侧度非常灵敏,可检侧出经过极度稀释后样品中的酶蛋白,但其缺点是不同厂家生产的酶产品需要有不同特定的抗体发生反应。

琼脂凝胶扩散法

将酶作用的底物与琼脂混合熔融后 ,倒入培养皿中或载波片上制成琼脂平板。用打孔器在琼脂平面上打出一个约4-5mm半径 的小孔。在点加酶样并培养24h以后 ,用染色剂显色或用剂显出水解区,利用水解直径和酶活力关系测定酶活力。

教学要遵循哪些基本原则?

4楼:demon陌

教学原则是有效进行教学必须遵循的基本要求和原理。它既指导教师的教,也指导学生的学,应贯彻于教学过程的各个方面和始终。我国中小学的教学原则主要有:

科学性和思想性统一原则,理论联系实际原则,直观性原则,启发性原则,循序渐进原则,巩固性原则,发展性原则,因材施教原则。

教学原则反映了人们对教学活动本质性特点和内在规律性的认识,是指导教学工作有效进行的指导性原理和行为准则。教学原则在教学活动中的正确和灵活运用,对提高教学质量和教学效率发挥着一种重要的保障性作用。

酶活力测定的注意事项有哪些

5楼:牙口竟品点

注意事项:

1.底物浓度 除选择适合的底物外,在实际应用中更多考虑的是底物浓度。由于[s]与反应速度v成双曲线关系,在酶活性测定时,要求[s]达到一定水平以保证酶活性与酶量成正比。[s]范围一般选择在10~20km为宜,此时反应速度基本达到最大反应速度,测定的误差在可接受范围。

2.酶浓度 在反应条件一定时,酶浓度与反应速度成正比。按照中间产物学说,只有[s]>>[e]时,酶才能被底物分子饱和,反应速度才能达到最大值。因此当标本酶活力过高时,应将标本适当稀释后再加以测定。

3.温度 不同的酶最适温度可以不同,多数酶的最适温度在37~40℃,高于或低于最适温度,酶活性都降低。目前,酶活性的测定温度尚未统一,但常规实验室多使用37℃。温度对酶促反应的影响程度通常用温度系数(q10)表示。

温度系数指温度每升高10℃,化学反应速度增加的倍数。q10通常为l~2。由温度系数得知,温度的变化对酶活性有着重要影响,因此要求酶活性测定要在恒温条件下进行,温度波动要控制在±1℃。

4.离子强度和ph值 在最适ph时,酶的活性最强,高于或低于最适ph,酶的活性都降低,多数酶的最适ph在5~8之间。在测定酶活性时,要求缓冲液具有足够的缓冲容量,以便使ph值保持稳定。血浆或血清标本含有多种缓冲溶质,具有较强的缓冲能力。

为了防止血浆或血清标本缓冲溶质对反应液酸碱度的影响,使ph不致偏离设定值,标本用量不宜过大,血浆或血清标本体积/反应液体积≤1/10为宜。

5 辅助因子 某些金属离子和维生素类辅酶是结合酶的辅助因子,例如zn2+是羧基肽酶的辅基,mo6+是黄嘌呤氧化酶的辅基,nadh是不需氧脱氢酶的辅酶。这些酶离开它们的辅基或辅酶就不能表现活性,因此在酶活性测定时,就要保证辅基或辅酶的供给。

6.激活剂 有些酶在有激活剂存在时才有活性或活性较高,例如mg2+是肌酸激酶的激活剂,cl-是淀粉酶的激活剂。因此在酶活性测定时,也要满足酶对激活剂的需要。

7.抑制剂 酶的抑制可分为不可逆抑制和可逆抑制,后者又可分为竞争性抑制和非竞争性抑制。重金属离子和砷化物对巯基酶的抑制、有机磷对羟基酶的抑制属于不可逆抑制;丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制、磺胺类药物对二氢叶酸合成酶的抑制属于竞争性抑制;哇巴因对na+,k+-atp酶的抑制属于非竞争性抑制。抑制剂使酶活性降低,在测定酶活性时,应避免抑制剂的影响。

综上所述,测定酶活性时,最适条件的选择应该遵循最适底物浓度、最适温度、最适ph值、满足辅助因子和激活剂、避免抑制剂的原则。

进行酶活力测定时应注意什么

6楼:匿名用户

测定酶活力时,必须注意以下几点:

(1)酶促反应过程中,只有最初一段时间内反应速度与酶浓度成正比,随着反应时间的延长,反应速度即逐渐降低。

(2)要规定一定的反应条件,如时间、温度、ph等,并在酶测定过程中保持这些反应条件的恒定,如温度不得超过规定温度的士1℃,ph应恒定。

(3)配制的底物浓度应准确且足够大,底物液中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中,以防止底物被分解。

(4)标本要新鲜,由于绝大多数酶可因久置而活力降低,标本如无法及时测定,应保存于冰箱中。用血浆时,应考虑到抗凝剂对酶反应的影响。有些酶在血细胞、血小板中的浓度比血清高,为此在采血、分离血清时,应注意防止溶血和白细胞的破裂。

(5)在测定过程中,所用仪器应绝对清洁,不应含有酶的抑制物,如酸、碱、蛋白沉淀剂等。

酶活力测定的注意事项有哪些?

7楼:匿名用户

1.底物浓度 除选择适合的底物外,在实际应用中更多考虑的是底物浓度。由于[s]与反应速度v成双曲线关系,在酶活性测定时,要求[s]达到一定水平以保证酶活性与酶量成正比。[s]范围一般选择在10~20km为宜,此时反应速度基本达到最大反应速度,测定的误差在可接受范围。

2.酶浓度 在反应条件一定时,酶浓度与反应速度成正比。按照中间产物学说,只有[s]>>[e]时,酶才能被底物分子饱和,反应速度才能达到最大值。因此当标本酶活力过高时,应将标本适当稀释后再加以测定。

3.温度 不同的酶最适温度可以不同,多数酶的最适温度在37~40℃,高于或低于最适温度,酶活性都降低。目前,酶活性的测定温度尚未统一,但常规实验室多使用37℃。温度对酶促反应的影响程度通常用温度系数(q10)表示。

温度系数指温度每升高10℃,化学反应速度增加的倍数。q10通常为l~2。由温度系数得知,温度的变化对酶活性有着重要影响,因此要求酶活性测定要在恒温条件下进行,温度波动要控制在±1℃。

4.离子强度和ph值 在最适ph时,酶的活性最强,高于或低于最适ph,酶的活性都降低,多数酶的最适ph在5~8之间。在测定酶活性时,要求缓冲液具有足够的缓冲容量,以便使ph值保持稳定。血浆或血清标本含有多种缓冲溶质,具有较强的缓冲能力。

为了防止血浆或血清标本缓冲溶质对反应液酸碱度的影响,使ph不致偏离设定值,标本用量不宜过大,血浆或血清标本体积/反应液体积≤1/10为宜。

5 辅助因子 某些金属离子和维生素类辅酶是结合酶的辅助因子,例如zn2+是羧基肽酶的辅基,mo6+是黄嘌呤氧化酶的辅基,nadh是不需氧脱氢酶的辅酶。这些酶离开它们的辅基或辅酶就不能表现活性,因此在酶活性测定时,就要保证辅基或辅酶的供给。

6.激活剂 有些酶在有激活剂存在时才有活性或活性较高,例如mg2+是肌酸激酶的激活剂,cl-是淀粉酶的激活剂。因此在酶活性测定时,也要满足酶对激活剂的需要。

7.抑制剂 酶的抑制可分为不可逆抑制和可逆抑制,后者又可分为竞争性抑制和非竞争性抑制。重金属离子和砷化物对巯基酶的抑制、有机磷对羟基酶的抑制属于不可逆抑制;丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制、磺胺类药物对二氢叶酸合成酶的抑制属于竞争性抑制;哇巴因对na+,k+-atp酶的抑制属于非竞争性抑制。抑制剂使酶活性降低,在测定酶活性时,应避免抑制剂的影响。

综上所述,测定酶活性时,最适条件的选择应该遵循最适底物浓度、最适温度、最适ph值、满足辅助因子和激活剂、避免抑制剂的原则。

艺术批评应遵循哪些基本原则

1楼 刚荣 艺术批评的方法以及批评标准应贯彻 百花齐放 百家争鸣 的方针,遵循实事求是的原则。 艺术批评的对象包括一切艺术现象,诸如艺术作品 艺术运动 艺术思潮 艺术流派 艺术风格 艺术家的创作以及艺术批评本身等。其中心是艺术作品。艺术批评既可以指一种活动,也可以指这种活动的结果。 画画分别有几种类...