1楼：听风
(一)实验目的
了解细菌生长曲线的持点及测定原理，学会用比浊法测定细菌的生长曲线。
(二)实验原理
将一定数量的细菌，接种于适宜的液体培养基中，在适温下培养，定时取样测数，以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标，作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定期及衰亡期四个时期，各时期的长短同菌种本身特征、培养基成分和培养条件不同而异。
比浊法是根据细菌悬液细胞数与混浊度成正比，与透光度成反比关系，利用光电比色计测定细胞悬液的光密度(即od值)，用于表示该菌在本实验条件下的相对生长量。
实验设正常生长、加酸抑制和加富培养等三种处理，以了解细菌在不同生长条件下的生长情况。
（三）实验器材
1. 活材料：大肠杆菌(e.coli)。
2. 培养基和试剂：牛肉膏蛋白胨液体培养基14支(每支10 ml)，浓缩5 倍的牛肉膏蛋白胨培养基1支。无菌酸溶液(甲酸：乙酸：乳酸=3：1：1)。
3. 器材：1 ml无菌吸管、摇床、冰箱、光电比色计、标签等。
（四）实验方法
方法一1. 接种：取13支装有牛肉膏蛋白胨培养液的试管，贴上标签(注明菌名、培养处理、培养时间、组号)。
按无菌操作法用吸管向每管准确加入0.2 ml的大肠杆菌培养液，接种后，轻轻摇荡，使菌体混匀。另一支不接种的培养管注明ck(对照)。
2. 培养：将接种后的培养管置于摇床上，在37 ℃下振荡培养。
其中9支培养管分别于培养的0、1．5、3、4、6、8、10、12和14 h后取山，放冰箱中贮存，待测定。加酸处理。取出经4 h培养的另二支培养管，按无菌操作法加入l ml无菌酸溶液，摇匀后放回摇床上，继续振荡培养，于培养8 h和14 h后取出放冰箱中贮存，待测定。
加富营养物处理。余下的二支培养管于培养6 h后取出，按无菌操作法加入浓缩5倍的牛肉膏蛋白胨培养液1 ml，摇匀后，继续进行振荡培养，于培养8 h和14 h后取出，放入冰箱中贮存，待测定。
3. 比浊：将培养不同时间、形成不同细胞浓度的细菌培养液进行适当稀释，使光密度值在0.
0-0.4范围内，以未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基调零点，在光电比色计上，选用400-440 nm波长的滤光片进行比浊，从最稀浓度的菌悬液开始，依次测定。
方法二将大肠杆菌接入装有牛肉膏蛋白胨培养液的小试管中(试管要能插入放比色杯的比色槽内)。37 ℃下振荡培养，分别在0、1.5 、3、4、6、8、10、12和14 h取出，以未接种培养液调零点，在光电比色计上比色。
比色时应自制一个暗盒将培养管和比色槽罩住，以形成一个暗室。
（五）绘制曲线
以细菌悬液的光密度值(od)为纵坐标，培养时间为横坐标，给出大肠杆菌在正常生长、加酸处理和加富培养三种条件下的生长曲线。
如果我们将上述培养0，1.5，3，4，6，8，10，12，14 h的细菌悬液用稀释平板测数法进行测数，测出不同时间的含菌数，以菌悬液比浊的光密度值为横坐标，以细菌的数量为纵坐标，绘制一标准曲线，这样在测得了任一培养时间的菌悬液光密度值后，就可以在此标淮曲线上查出含菌数。这种方法已在工业上广泛采用，它可以节省许多稀释平板测数的时间， 直接用比浊法测得的光密度值查标准曲线以了解各个培养时期的菌数消长情况。
比浊法单细胞菌生长曲线的测定应该注意哪些问题
2楼：匿名用户
以od600为例说明。
1、液体培养基配制时记得过滤，将不溶物去除。
2、培养基灭菌后可能还会有沉淀出现，无菌过滤。
3、灭菌后的空白培养基的颜色尽量浅，否则影响检测效果。
4、要设平行样。
5、培养基量要多，否则检测几次后就没了；
6、分光光度计要预热30分钟以上；
7、分光光度计要保持干燥。
8、od值不能超过1.0，所以要将样品适当稀释。
怎样测细菌的生长曲线
3楼：du知道君
用od值必须注意，只有透光率在20%~80%之间，浓度与od值的关系才是呈线形的。2、由于用比浊法不能分辨死菌活菌，所以要防止在生长后期死菌与活菌相混合导致od值假增高，我们采用的方法是：第一次测定生长曲线的时候，在测定od值的时候，同时采用台盼蓝染色法作活细胞计数，从而得到一个修正数据。
以后在发酵时就可以只测od值来监测生长状况了。另外，也有人采用同时接种平板的方法得到修正值的，我觉得太麻烦花时间的说。
怎样用分光光度法测菌体的生长曲线?要具体过程
4楼：华重楼
我们做过这个实验，我给你说点具体的（大肠杆菌为例）：
1 配置培养基，就是牛肉膏蛋白胨培养基，要液体的。
2 按一定量分装到试管里（需要13*3支，3支一组），灭菌。
3 冷却后取大肠杆菌悬液，用移液枪分别接种到试管培养基中4 把12组放入37度摇床培养，取一组马上测od值，三个值取平均数，偏差太大者舍去
5 在2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24小时后分别测其他组。如果无法在特定时间测，也要在那一时间将该组在摇床取出冷冻保存，能测时取出测量即可
6 将得到的值换算后画图即可
我做过了不是很难，数据比较**，但图作出来还是有正确的走势的，是个时期都能显示出来
5楼：匿名用户
细菌生长曲线的测定
一、目的要求
了解细菌生长曲线的特点及测定的原理
学习用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
二、基本原理
少量的细菌，接种到一定体积的、合适的新鲜液体培养基中，在适宜的条件下进行培养，定时测定培养液中的菌量，以菌量的对数作纵坐标、生长时间作横坐标，绘制的曲线为生长曲线。一般生长曲线可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期(图8-4-1)，生长曲线是微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。不同的微生物其生长曲线不同，即使是同一种微生物，在不同的培养条件其生长曲线也不同，测定在一定条件下培养的微生物的生长曲线。
在科学研究及生产上是非常有意义的。
大肠杆菌是微生物学教学和科研常用菌种，也是某些生物制品的生产菌种，常需要了解在一定条件下其生长曲线的特征。测定微生物的数量如本章实验1-3所介绍有多种不同的方法，可以根据要求和实验室的条件选用。本实验用光电比色计进行比浊，测定od值的方法、此法所需仪器不多，操作简便、迅速。
三、实验材料
(一)仪器
光电比色计、试管、锥形瓶、移液管
(二)培养基和菌种
肉膏蛋白胨培养液、大肠杆菌菌种
四、实验内容
(1)预先将大肠杆菌接种到肉膏蛋白胨培养液中，37℃振荡培养18h备用。
(2)把光电比色计的波长调至420 nm，开机预热10-15min。
(3)以未接种的肉膏蛋白胨培养液校正比色计的零点(以后每次测定都要重新校正零点)。
(4)取盛有150 ml无菌肉膏蛋白胨培养液的500 ml锥形瓶6个，分为两组，分别编号为1、2、3号和4、5、6号。各瓶加入培养18h的大肠杆菌培养液10 ml，37℃下振荡培养。
(5)于接种后的第0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20 h，分别用无菌移液管从各瓶中吸取培养液5ml，在光电比色计上测定od420值。若菌液太浓时，作适当稀释，使od420值在0.0-0.
4之间较好。经稀释后测得od420值要乘以稀释倍数，才是培养液实际的od420值。
(6)于培养第8h取样测定后，向其中一组(1-3号)每瓶加入肉膏胨培养液的5倍浓缩液10 ml作补料；另一组(4-6号)每瓶加入10 ml无菌水。继续振荡培养和定时测定。
生长曲线怎么测定？
6楼：匿名用户
一：细菌生长曲线的测定
1 目的
1.1 了解细菌生长曲线特点及测定原理
1.2 学习用比浊法测定细菌的生长曲线
2 原理
将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，定时测定培养液中的菌量，以菌量的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。
这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。因此通过测定微生物的生长曲线，可了解各菌的生长规律，对于科研和生产都具有重要的指导意义。
测定微生物的数量有多种不同的方法，可根据要求和材料
3.1菌种
大肠杆菌
3.2培养基
肉膏蛋白胨培养基
3.3 仪器和器具
721分光光度计，比色杯，恒温摇床，无菌吸管，试管，三角瓶。
4 流程
种子液→标记→接种→培养→测定
5 方法
5.1种子液制备
取大肠杆菌斜面菌种1支，以无菌操作挑取1环菌苔，接入肉膏蛋白胨培养液中，静止培养18h作种子培养液。
5.2标记编号
取盛有50ml无菌肉膏蛋白胨培养液的250ml三角瓶11个，分别编号为0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20h。
5.3接种培养
用2ml无菌吸管分别准确吸取2ml种子液加入已编号的11个三角瓶中，于37℃下振荡培养。然后分别按对应时间将三角瓶取出，立即放冰箱中贮存，待培养结束时一同测定od值。
5.4生长量测定
将未接种的肉膏蛋白胨培养基倾倒入比色杯中，选用600nm波长分光光度计上调节零点，作为空白对照，并对不同时间培养液从0h起依次进行测定，对浓度大的菌悬液用未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定，使其od值在0.10.～0.
65以内，经稀释后测得的od值要乘以稀释倍数，才是培养液实际的od值。
6 结果
6.1 将测定的od值填入下表：
时 间(h) 对照 0 1.5 3 4 6 8 10 12 14 16 20
光密度值（od600）
6.2 以上述**中的时间为横坐标，od600 值为纵坐标，绘制大肠杆菌的生长曲线。
比浊法测生长曲线与活菌计数法有什么区别
7楼：欧阳侠
比浊法只能测定比较浓的菌液，通过吸光度值大概估算菌悬液中的菌量，并不是非常准确。活菌计数是通过培养后，计数细菌的菌落形成个数，要求菌液中的菌量比较低，否则培养后菌落长成一片就无法计数了。
为什么比浊法测定细菌的生长只表示细菌的相对生长状况
8楼：欧阳侠
是因为不同细菌所产生的浊度是不同的。
细菌的形态、排列、大小多种多样，某些细菌还能产生粘液，在比浊时都会对浊度产生比较大的影响，举个例子，金黄色葡萄球菌0.5个麦氏比浊度和大肠埃希菌0.5个麦氏比浊度，其中所含有的菌量是不同的，两者间没有可比性。
如果是同一种菌，那么不同的麦氏比浊度还是能说明一定问题的，较高浊度的，菌含量会更高。