大肠菌群最近似数测定中应注意的问题有哪些

2020-11-23 10:00:31 字数 6101 阅读 6132

1楼:打死青椒

1、选择正确的稀释度

2、培养时间要在范围之内,培养时间过短或过长都会影响发酵管数

3、确证实验要严谨

“大肠菌群近似数”是什么?

2楼:

大肠菌群近似数(大肠菌值mpn):一般采用乳糖发酵法,检验结果相当于100 g 或100 ml食品中大肠菌群的近似数来表示,简称大肠菌群近似数或大肠菌值。(单位:

个/100g 个/100ml)

3楼:對妳傾心

楼主是想问大肠杆菌在常温下标准数值?还是?

关于大肠杆菌的测定及查表

4楼:匿名用户

首先你的检样

必须按标准7.1的要求进行稀释,即称取检样25g(液体吸取25ml),用225ml灭菌生理盐水稀释成为1:10的均匀的稀释液。

再以1:10为基准液稀释成1:100、1:

1000……等稀释液。

国标的mpn表是用1:10液1ml,1:100液1ml和1:

1000液1ml各接种培养三支单料管的情况为基准的,如果你用1:10液10ml接种三支双料管,1:10液1ml和1:

100液1ml各接种三支单料管,那么查mpn表即得。

如果你用1:100液1ml、1:1000液1ml和1:10000液1ml各接种三支单料管,那么查mpn表后将表内数据乘以10即得。

另外,mpn表中的阳性管数是最终证实实验结果为阳性且革兰氏染色为阴性无芽孢杆菌的管数,而不是被发酵时产气的管数。证实试验要接的管数=初发酵产气的管数。

5楼:手机用户

yfhujyyfujhyj

有谁知道食品中大肠菌群最近似数测定的卫生学意义??谢谢(*^__^*)

6楼:善良的郭凯敏

一、对控制肠道传染病的发生与流行有利。

二、判断食品之中是不是受到粪便污染。

三、这也反应了食品在生产、加工、运输以及储存等过程中的卫生情况。

7楼:匿名用户

判断食品中是否受到粪便污染,也反应了食品在生产、加工、运输、储存等过程中的卫生状况。

大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一。大肠菌群分布较广,在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明,大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。

粪便中多以典型大肠杆菌为主,而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。

8楼:秋日掠影

1、有利于控制肠道传染病的发生和流行

2、判断食品中是否受到粪便污染

3、这也反应了食品在生产、加工、运输、储存等过程中的卫生状况

为什么选用大肠菌群作为检验水质质量的主要指标

9楼:匿名用户

因为大肠菌群主要来自于人畜粪便,而一般来说水体、食品中的大肠菌群来自于外界污染,因此大肠菌群可作为粪便污染指标来评价水体、食品等的卫生状况,即作为水体、食品等是否受到过人畜粪便污染的指示菌,从而推断食品中肠道致病菌污染的可能性。

ps:大肠菌群主要包括大肠杆菌及其近似的产气气杆菌和一些中间类型的杆菌,由于大肠杆菌和多数肠道病原菌在水中存活期基本相近,而且在人工条件下,大肠杆菌又易于培养和观察,所以这也是用它作为卫生检验指标菌的原因之一。

水中粪大肠菌群的测定

10楼:微生物研究所

化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测流程:

10g/ml样品+90ml灭菌生理盐水 →10ml+10ml双倍乳糖胆(含中和剂)培养基→粪大肠菌群 44.5℃,48h培养

注:在化妆品检测项目中,如果样品含有油脂性的成分,如精油,在样品前处理中需加入液体石蜡、吐温80、生理盐水进行均质,使样品能够均匀分散开来。

粪大肠菌群又是一个什么样的微生物呢?下面我们来详细介绍下:

大肠菌群:大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。

定义(gb2010):在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。

粪大肠菌群:大肠菌群的一种,又称耐热大肠菌群,培养温度:44.5±0.5℃,粪大肠菌群是化妆品检测项目中必检的微生物项目。

大肠埃希氏菌:((escherichia. coli )通常称为大肠杆菌。根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类:

致病性大肠杆菌(epec)、

肠产毒性大肠杆菌(etec)、

肠侵袭性大肠杆菌(eiec)、

肠出血性大肠杆菌(ehec)、

肠黏附性大肠杆菌(eaec)。

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11楼:yuanhong的文档

最新有标准的:cj/t-2018 城镇污水水质标准检测方法 中有新增酶底物法检测粪大肠菌群

12楼:匿名用户

用新国标里规定的酶底物法检测就可以了,ht-2019酶底物法粪大肠菌群检测就省事多了。

13楼:吕俊露

1.小玻璃管是杜氏小管,倒置在试管中。在倒培养基的时候,要先将杜氏小管装满,然后再一起倒扣在试管中。

试管什么规格都可以。这样,培养菌的时候,如果杜氏小管中有气泡,也该菌是产气的。试管的支数是随你实验订的。

一般一个水样浓度做3支。

2.ec培养液最好按照试剂来配。

3.我们在实验室用棉花塞加牛皮纸包起来,用橡胶塞应该也可以。

14楼:人生如夕阳

1 卫生学意义

粪大肠菌群测定的卫生学意义:

一、与大肠菌群相比,粪大肠菌群在人和动物粪便中所占的比例较大,而且在自然界容易死亡。因此,粪大肠菌群的存在表明食品近期内可能直接或间接的受到了粪便的污染;

二、作为粪便污染指标评价食品的卫生状况,推断食品中肠道致病菌污染的可能性;

三、常用做贝类和贝类养殖用水的卫生指标 。

2 检验方法

2.1 术语与定义

一群在44.5℃培养24h-48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。

卫生学概念,又称为耐热大肠菌群,主要是大肠杆菌,但也包括克雷伯氏菌属等。

2.2 设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:

(1)恒温培养箱:36℃±1℃。

(2)冰箱:2℃~5℃。

(3)恒温水浴箱:46℃±1℃。

(4)天平:感量0.1g。

(5)无菌吸管:1ml(具0.01ml刻度)、10ml(具0.1ml刻度)或微量移液器及吸头。

(6)无菌锥形瓶:容量500ml。

(7)无菌培养皿:直径90mm。

(8)ph 计或ph 比色管或精密ph 试纸。

2.3 培养基和试剂

(1)月桂基硫酸盐胰蛋白胨(lauryl sulfate tryptose,lst)肉汤:

1)成分:胰蛋白胨或胰酪胨:20.

0g;氯化钠:5.0g;乳糖:

5.0g;磷酸氢二钾(k2hpo4):2.

75g;磷酸二氢钾(kh2po4):2.75g;月桂基硫酸钠:

0.1g;

蒸馏水:1000ml;ph:6.8±0.2

2)制法:将上述成分溶解于蒸馏水中,调节 ph。分装到有玻璃小倒管的试管中,每管10 ml。121 ℃高压灭菌15 min。

(2)ec肉汤(e.coli,bglb):

1)成分:胰蛋白胨或胰酪胨:20.

0 g;3号胆盐或混合胆盐:1.5 g;乳糖:

5.0g;磷酸氢二钾(k2hpo4):4.

0g;磷酸二氢钾(kh2po4):1.5g;氯化钠:

5.0g;

蒸馏水:1000ml;ph:6.9±0.1。

2)制法:将上述成分溶于约蒸馏水中,调节ph,分装到有玻璃小导管的试管中,每管8ml,121℃高温灭菌15min。

(3)无菌生理盐水:

1)成分:氯化钠:8.5 g;蒸馏水:1000ml;

2)制法:称取8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15min。

2.4 检验程序

2.5 操作步骤

(1)初发酵

选择适宜的三个连续稀释度的样品匀液。每个稀释度接种三管月桂基磺酸盐胰蛋白胨(lst)肉汤,每管接种1ml(如接种量需要超过1ml,则用双料lst肉汤)。36℃±1℃培养24h±2h,检查倒管内是否有气泡产生或轻摇试管时是否有密集连续的细小气泡从管底逸出,如未产气则继续培养至48h±2h。

记录在24h和48h内产气的lst肉汤管数。未产气者为粪大肠菌群阴性;对产气者,则进行**酵试验。

(2)**酵

用接种环从所有48h±2h内发酵产气的lst肉汤管中分别取培养物1环,移种于已提前预温至45℃的ec肉汤管中。将所有接种的ec肉汤管放入于带盖的44.5℃±0.

2℃恒温水浴箱内,水浴的水面应高于肉汤培养基液面,培养24h±2h,记录ec肉汤管的产气情况。产气管为粪大肠菌群阳性,不产气为粪大肠菌群阴性。

注:ec肉汤管在接种之前要提前预温至45℃,因为这个温度是选择性生长的条件之一,如果不提前预温,那些能够在44.5度以下生长的非粪大肠菌群类细菌在培养基的升温阶段就可能已经生长并发酵乳糖产气了。

2.6 结果与报告

证实为粪大肠菌群的阳性管数,

群mpn值。

查(mpn)表, 报告每g(ml)样品中粪大肠菌。

15楼:匿名用户

1.管的规划不定,最好是带盖子的10-50ml的玻璃管,一般要最少做5个平行。

2.培养基都可以自己配的,建议用简单的lb培养基即可,药品为蛋白胨和nacl(固体用agar)。

3.塞子或盖子都可以,但一定要加。

4.需要超净台、高压灭菌锅、调温摇床这些必备仪器。

粪大肠菌群是生长于人和温血动物肠道中的一组肠道细菌,随粪便排出体外,约占粪便干重的1/3以上,故称为粪大肠菌群。粪大肠菌群不是细菌学上分类命名,而是根据卫生学方面的需要,而设定的一类与粪便污染有关的一组细菌,是能在44.5℃24h内发酵乳糖产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。

粪大肠菌群为一群需氧及兼性厌氧的菌群,呈革兰氏阴性反应,能在普通培养基上生长繁殖;其生化活动能力较强,能发酵多种糖类,产酸产气,其特点是能较快发酵乳糖,粪大肠菌群在乳糖培养基中于.37℃下进行培养,在24h内能使乳糖发酵产酸,还有甲酸解氢酶进行分解甲酸,生成氢气和二氧化碳,产生大量气体,这时,若加入伊红美兰指示剂,分解乳糖所产生的酸(带阳电荷)与伊红相染呈紫色且有金属光泽,故常用此特性来鉴定识别粪大肠菌群。

具体操作如下:

(1)发酵(产酸产气)试验 将试样液以无菌接种于双倍乳糖胆盐发酵管(其内放有倒置的小玻璃管,以收集气体)内,置44'e培养箱中培养24—48h,由于乳糖胆盐培养基是一种具有选择作用的培养基,其中胆盐具有抑制革兰氏阳性菌的作用,若观察到发酵管内不产酸(有酚红指示剂指示)不产气,则报告试样为粪大肠菌群阴性,未检出,检测结束。

若发酵管内产酸产气,则继续进行下列检测。

(2)鉴别培养 将有产酸产气的发酵管内试样培养液接种到伊红美兰琼脂培养基平皿上,置37℃培养18~24h;同时将该培养液接种到蛋白胨水中,置44℃培养24h。

(3)验证实验 菌落观察:在上述平皿培养基上,仔细观察菌落生长情况:大肠菌群在伊红美兰琼脂培养基上其典型菌落是呈深紫色、圆形、边缘整齐、表面光滑、湿润、常具有金属光泽,或呈紫黑色不带或略带金属光泽及粉紫色,中心较深的菌落。

革兰氏染色、镜检:将以上典型的(或近似的)大肠菌群菌落进行革兰氏染色、镜检,若革兰氏染色呈阳性(紫色)反应,则报告粪大肠菌群呈阴性,未检出。若革兰氏染色呈阴性,检测还需进行下一试验,以待进一步证实。

靛基质试验(吲哚试验):对前已培养好的蛋白胨水中,滴人靛基质试剂(对二甲基氨基苯甲醛试剂),进行靛基质反应,若液面呈玫瑰红色,呈阳性反应,则报告粪大肠菌群呈阳性,检出;若液面仍是棕黄色,则报告粪大肠菌群呈阴性,未检出。

(4)检测程序 将上述检测粪大肠菌群的操作步骤可归结为以下程序图示。

(5)检验报告 当发酵管内产酸产气,观察试液平皿上为典型粪大肠菌群菌落,并经革兰氏染色、检镜试验为阴性(—)及靛基质试验为阳性,则报告该试液经检测检出粪大肠菌群。其他结果均为未检出粪大肠菌群。