1楼：中国农业出版社
pcr扩增技术已广泛地用于分离目的基因。如果知道目的基因的全序列或其两侧的序列，可以通过合成一对与模板dna互补的引物，十分有效地扩增出含目的基因的dn**段，采用常规pcr技术扩增分离目的基因比较方便，但必须知道待扩增目的基因dn**段的核苷酸序列，或者至少要求dn**段两端长约20bp的序列是已知的，这样才能设计pcr引物进行有效做pcr扩增反应。
此外，利用常规pcr反应，允许扩增的dn**段长度一般在1kb以内，超过1kb时扩增效果显著下降。对于扩增未知核苷酸序列的目的基因，或是那些长达几千碱基对的大基因，则需要选择特殊类型的pcr策略，目前已采用的有套式pcr、反向pcr、不对称pcr、锚定pcr、长程pcr、反转录pcr、锅柄pcr和alupcr等。
利用pcr技术扩增目的基因，为什么是三次
2楼：匿名用户
pcr扩增就是循环步骤，一般进行20-40个循环。每次循环*2（不考虑扩增效率）。
你说的三次是什么意思？
最多这样（自己看图理解）：
至此，就是三个循环，卡住了一个大小区间（比如100bp），接下来 以此不断重复。
利用pcr扩增目的基因，那模板是和目的基因有关吗?
3楼：青山绿水
pcr合成的时候当然不只是需要引物，模板链也就是目的基因片段是必须的。
因为dna聚合酶合成dna时只能从一段已有的dn**段往上加脱氧核苷酸延伸子链，而不能从头合成，所以需要一段引物。引物就是目的基因在5'段的一小段序列，在于模板链结合后，taq酶对其延伸完成复制。
所以说模板不仅仅是和目的基因有关，应该其本身就是或含有目的基因。
超弱智的问题，pcr扩增产物长度是指目的基因的扩增长度还是指什么？为什么目的基因有700多，扩增产物长度
4楼：爱是地狱
pcr是扩增数目的。
目的基因有700多，扩增产物长度只有200. 这个就是引物选择的问题了。引物决定了扩增的起始位置，如果你选择的引物正好是500以后的位置，那么扩增产物长度就只有200了。
5楼：匿名用户
扩增产物长度是指你两个引物对应位点之间的长度。如果这个长度是700，你的扩增产物只有200，那就是非特异性扩增产物，不是你要的目的基因。
6楼：匿名用户
很可能是引物特异性的问题，一方面查查引物的属性，一方面升高温度（可以提高引物特异性）试试
pcr为什么要扩增，pcr的目的是获得目的基因片段
7楼：地球执剑人
pcr是用目的基因的一小段（引物)扩增出整个目的基因
利用pcr技术扩增目的基因，引物是什么？引物是什么
8楼：匿名用户
引物是人工设计合成的一对（两个）小片段dna，具有和目的基因两端互补的序列和人工设计的酶切位点，用于定位复制的起始位置和后续连接操作。
9楼：匿名用户
引领dna单链结合互补
pcr引物是什么？
10楼：点点星光带晨风
聚合酶链式反应简称pcr（polymerase chain reaction） (又称：多聚酶链式反应) pcr是体外酶促合成特异dn**段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的dna得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。
它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有dna，rna的地方。pcr又称无细胞分子克隆或特异性dna序列体外引物定向酶促扩增技术。
11楼：暴走少女
pcr引物又称为寡核苷酸引物，也就是rna，是由人工合成的，分为两种，引物1和引物2。由于dna聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制，也就是只能识别3'的尾端。
而且只能把核苷酸连到已经和dna模板互补产生的多核苷酸链上，所以引物1和2分别于双链dna的两条链的尾部（就是末尾是3'端的那一边）结合，为那些脱氧核苷酸提供3'的末端，就相当于开了个头。然后在dna聚合酶的作用下合成两条新链。而那段引物就成了新链的一部分。
12楼：白色的妖精
通俗的讲，引物就是为了增幅目的dna而导入的短小dn**断，在pcr反应中，新合成的dna是要接在引物上才能继续按照模版dna复制。引物的设计因需要增幅的序列而不同。举个例子来说，你要增幅如下序列：
accctcccgccccccccgtat
(互补碱基不写了）
那么一般来说，你就要导入以accctc结尾的引物使得增幅继续下去，具体方法和注意事项楼主可以看gee_an大侠的资料。
查了一下测序公司的网页，如果要同定微生物，楼主需要准备如下东东：
1、待测菌体。试管或培养皿都可以，但必须是纯粹的待测菌体，不能含有其他的微生物。
2、提纯的dna。如果1有致病性或传染性，那么楼主就得自己提纯dna再交给测序公司。dna纯度要求可以做pcr。
ps:很佩服楼主充足的经费，我们这里同定一次要2800人民币……
13楼：匿名用户
pcr的目的是大量扩增你所需要的片断。换句话说，就是用人工的方法大量复制dna。而dna的复制是以一条链为模板，新合成链按照碱基互补配对进行的。
可是有一个问题，dna的合成必须是前端有一小段序列，他接着这段序列合成，而不能从无到有，凭空合成。它前面这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是dna也可以是rna，一般20多bp.
需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物
利用pcr技术扩增目的基因，引物是什么？
14楼：耽寂
引物本来就是单链的。书上画成双链才怪。
pcr所用的dna聚合酶只能顺着已经存在的一小段dna的尾巴来接着合成，它不会自己起头。引物就是这么一小段用来起头的dna。
dna本身很长很长，我们扩增时，只能扩增其中一小段基因。如何确定扩增哪一小段呢？就需要引物来帮忙了。
引物具有特殊的核苷酸序列，使它正好能与dna中某个特定的部位结合起来。你想一想，从直线上截取线段时是不是需要一左一右两个点呢？引物就相当与这两个点，所以pcr需要两个引物。
这两个引物，我们通常称之为一对引物，一个叫上游引物，一个叫下游引物。
15楼：匿名用户
一小段寡聚的dna，一般有两个（一对），分为上游引物和下游引物，分别指导dna两条链的聚合。它们主要作用有两个，一个是和模板特异性结合来指导taq聚合酶合成所要的片段。一个是提供一个3‘端的－oh末端，只有拥有一个－oh末端，dna聚合酶才能合成dna。
在体内是由小段的rna来提供的，在体外pcr试验中则用dna，因为dna比rna稳定易于储存。
pcr技术扩增目的基因中的引物有什么作用？
16楼：曜血
引物的功能是作为核苷酸聚合的起始点，引导dna的合成。
能设定循环次数，及控制复制次数。pcr循环次数主要取决于模板dna的浓度。一般的循环次数选在30～40次之间，循环次数越多，非特异性产物的量亦随之增多。
17楼：匿名用户
1.与dna复制中的作用类似，但是在细胞内有其他的酶进行这项工作。在pcr技术中，只加入了四种底物和taq酶，模板。dna聚合酶只能在有3‘端时才能复制下去。
2.决定扩增片段。扩增目的基因，就要根据目的基因两侧序列设计引物，这样只有目的基因扩增了，得到大量目的基因。这是pcr技术的一项重要应用。
18楼：霍文宣
没有引物，dna复制的起点就不确定了，用于dna复制的dna单链是很长的，不光是目的基因（和其他你所需要的），而在基因工程中我们需要的dn**段比较起来是很短的，也就是说只要一对引物（这个寡聚核苷酸片段）之间所夹的这一部分的dn**段，为了准确地合成这段所需基因，我们需要一对引物的参与。
19楼：匿名用户
引物可以做为dna复制开始时dna聚合酶的结合位点，在细胞外的条件下，只有通过引物，dna才可以开始进行复制。引物是已知序列的dna小片段。