全基因测序的原理和方法是什么?以测细菌基因组为例

2020-11-22 09:06:34 字数 5045 阅读 3078

1楼:year淡然做自己

不同的测序原理不一样,分别概述如下:第一代测序,1.1 sanger 测序 采用的是直接测序法;1.

2 连锁分析 采用的是间接测序法。新一代测序 (ngs)主 要 包 括 全 基 因 组 重 测 序 (whole-genomesequencing,wgs)、全外显子组测序

(whole-exomesequencing,wes) 和目标区域测序 (targeted

regionssequencing,trs),它们同属于新一代测序技术:1 目标区域测序 目前常用的是基因芯片技术;2 全外显子组测序 (wes) 外显子组是单个个体的基因组 dna 上所有蛋白质编码序列的总合,基因测序结果与ncbi的snp数据库、千人基因组数据库等国际权威数据库比对,最终确定是否为突变基因。

基因组测序的原理与方法及关进设备?

2楼:杨风游

全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。1986年, renato dulbecco是最早提出人类基因组定序的科学家之一。他认为如果能够知道所有人类基因的序列,对於癌症的研究将会很有帮助。

美国能源部(doe)与美国国家卫生研究院(nih),分别在1986年与1987年加入人类基因组计划。除了美国之外,日本在1981年就已经开始研究相关问题,但是并没有美国那样积极。到了1988年,詹姆士·华生(dna双螺旋结构发现者之一)成为nih的基因组部门主管。

1990年开始国际合作。1996年,多个国家召开百慕达会议,以2005年完成定序为目标,分配了各国负责的工作,并且宣布研究结果将会及时公布,并完全免费。

1998年,克莱格·凡特的塞雷拉基因组公司成立,而且宣布将在2001年完成定序工作。随后国际团队也将完成工作的期限提前。2000年6月26日,塞雷拉公司的代表凡特,以及国际合作团队的代表弗朗西斯·柯林斯(francis collins),在美国**柯林顿的陪同下发表演说,宣布人类基因组的概要已经完成。

2001年2月,国际团队与塞雷拉公司,分别将研究成果发表於《自然》与《科学》两份期刊。在基因组计划的研究过程中,塞雷拉基因组使用的是霰弹枪定序法(shotgun sequencing),这种方法较为迅速 ,但是仍需以传统定序来分析细节。全基因组测序技术主要包括第二代测序技术(ngs)和第三代测序技术。

第二代测序技术已经能够快速、低成本的进行全基因组测序,其设备**商主要是solexa (现被illumina公司合并),454(罗氏公司)和solid(ab公司)。第三代测序技术于2011年4月正式推广,其单分子实时(**rt)测序技术完全不同与第二代测序,它的序列读长高达3000 bp(pacific biosciences 公司研发)。

简化基因组测序和基因组测序的区别

3楼:匿名用户

一、16s测序原理16srdna基因存在于所有细菌的基因组中,具有高度保守性。然而该基因序列还包括9个高变区(v1-v9),通过特异性引物对某一段高变区(如v3区)或某几段高变区(如v3-v4区)进行扩增测序,然后与数据库比对,可特异性识别细菌种类。

二、宏基因组测序原理将基因组dna随机打断成若干条500bp的小片段(类似于拼图中的单个形状不一的模块),然后连接接头(双端120bp),在片段两端加通用引物进行pcr扩增测序。将reads进行组装拼接(类似于将众多模块拼成一副完整**),得到基因序列,众多基因构成完整的基因集。同时将获得的reads片段或组装好的基因序列与ncbi数据库进行比对,得到物种注释结果。

对于16s测序而言,任何一个高变区或几个高变区,尽管变异性再高,对于某些物种来说,这些高变区也可能十分相近,而能够区分它们的特异性序列片段有可能不在我们的扩增区域内。换言之,非全长的可变区序列覆盖范围不够导致无法鉴定到种。宏基因组在建库之前会先将基因组dna随机打断成若干小片段,而这些小片段中总有一些能够包含区分2个物种的基因差异序列。

由于测序深度足够深,相当于覆盖了整个基因组的信息,因此在与ncbi数据库比对时,就能够注释到相应的种水平的物种。

细菌全基因组测序请问现在全基因组测序完成后会的到

4楼:悠悠我心

目前已完成全基因组测序的物种主要可以分类三大类,模式物种、农作物和经济作物、有药用价值的物种。在模式物种这块,众所周知的,拟南芥、果蝇、斑马鱼、小鼠、大鼠等等;而农作物和经济作物大概有以下:水稻、玉米、大豆、甘蓝、白菜、高粱、黄瓜、西瓜、马铃薯、番茄、拟南芥、杨树、麻风树、苹果、桃、葡萄、花生;在药用这块,目前主要有一些真菌类,例如灵芝、茯苓等,以及一些药用植物,例如丹参、长春花等。

已经做完细菌的全基因组测序,怎么能够找到我要的某个基因的代谢路径呢? 50

5楼:匿名用户

代谢通路是kegg数据库里的pathway数据库。可以通过全基因组**了编码基因后,进行pathway数据库注释,从注释结果的功能信息中通过关键字查找。一般都能找到。

如果找不到,有可能是关键字不对或者基因组中没有这样的代谢通路功能基因。

一般现在的科技服务公司如果做了kegg pathway数据库注释的话,都会做代谢通路图的注释,可以从结果文件中的代谢通路图查找,找到想要的代谢通路图后,再分析哪些基因在基因组上存在。

dna测序的原理?基因组测序的原理?

6楼:匿名用户

我认为有的。

dna序列测定分手工测序和自动测序,手工测序包括sanger双脱氧链终止法和maxam-gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今dna序列分析的主流。自动化测序是在sanger法基础上发展而来的。

dna测序的原理,要答 maxam-gilbert化学降解法、sanger双脱氧链终止法和现在发展起来的焦磷酸化测序的原理。

如果说现在最常用的测序原理,应答自动化测序:采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司专利的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止物法),因此通过单引物pcr测序反应,生成的pcr产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链dna混合物,使得四种荧光染料的测序pcr产物可在一根毛细管内电泳,从而避免了泳道间迁移率差异的影响,大大提高了测序的精确度。由于分子大小不同,在毛细管电泳中的迁移率也不同,当其通过毛细管读数窗口段时,激光检测器窗口中的ccd(charge-coupled device)摄影机检测器就可对荧光分子逐个进行检测,激发的荧光经光栅分光,以区分代表不同碱基信息的不同颜色的荧光,并在ccd摄影机上同步成像,分析软件可自动将不同荧光转变为dna序列,从而达到dna测序的目的。

http://****biobars.**/article/view.asp?id=309

基因组测序的原理:则涉及到样品的制备、大规模的测序,以及序列分析等

参见http://****majorbio.***/teq/454-gs_flx.shtml

高通量基因组测序中,什么是测序深度和覆盖

7楼:匿名用户

简洁版:

深度即:测序得到的总碱基数/基因组碱基数 。也可以理解为将基因组测了几遍。

测序深度能减少假阳性和测序错误率。                        覆盖度原来是指基因/转录组上测序测到的部分占整个组的比例,但是现在很多人把coverage也直接当depth用了。

详细版:                                     depth嘛,就是被测基因组上单个碱基被测序的平均次数,比如某样本的测序深度为30x,那么就是说该样本的基因组上每一个单碱基平均被测序(或者说读取)了30次,注意,是平均。当然了,depth也有最大和最小值,这个都可以由信息分析得到。

coverage就好理解了,由于大片段拼接的gap、测序读长有限、重复序列等问题的存在,测序分析后组装得到的基因组序列通常无法完全覆盖所有区域,覆盖度就是最终得到的结果占整个基因组的比例。例如一个人的基因组测序,覆盖度为98.5%,那么说明该基因组还有1.

5%的区域通过我们的组装和分析无法得到。

至于什么算法之类的,太深了,应该不用了解吧~~偶也写不出来。。。:p

当然,转录组也同上,

8楼:豆颖环力学

可以简单理解为深度是一条链上一个碱基检测到的次数,

覆盖度是你检测到的这个样本的总碱基数的百分比

全基因组测序的意义是什么?

9楼:太阳_爱向日葵

全基因组测序的意义是使人类从根本上认知疾病发生的原因,做到正确的**疾病、尽早的预防疾病。

定义:全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。

发展历程:1986年, renato dulbecco是最早提出人类基因组定序的科学家之一。他认为如果能够知道所有人类基因的序列,对於癌症的研究将会很有帮助。

美国能源部(doe)与美国国家卫生研究院(nih),分别在1986年与1987年加入人类基因组计划。除了美国之外,日本在1981年就已经开始研究相关问题,但是并没有美国那样积极。到了1988年,詹姆士·华生(dna双螺旋结构发现者之一)成为nih的基因组部门主管。

1990年开始国际合作。1996年,多个国家召开百慕达会议,以2005年完成定序为目标,分配了各国负责的工作,并且宣布研究结果将会及时公布,并完全免费。

简介:每个人从受精卵开始就继承了父母的dna遗传信息,并且携带一生,不易改变。全基因组测序就是通过运用新一代高通量dna测序仪,进行10-20倍覆盖率的个人全基因组测序,然后与人类基因组精确图谱比较,得到完整的个人全基因组序列,破译个人全部的遗传信息的过程。

全基因组测序覆盖面广,能检测个体基因组中的全部遗传信息;准确性高,其准确率可高达99.99%。

全基因组测序揭示了人类生、老、病、死的奥秘,使人类从根本上认知疾病发生的原因,做到正确的**疾病、尽早的预防疾病。

技术:提取基因组dna,然后随机打断,电泳**所需长度的dn**段(0.2~5kb),加上接头,进行基因簇cluster制备或电子扩增e-pcr,最后利用paired-end(solexa)或者mate-pair(solid)的方法对插入片段进行测序。

然后对测得的序列组装成contig,通过paired-end的距离可进一步组装成scaffold,进而可组装成染色体等。组装效果与测序深度与覆盖度、测序质量等有关。目前常用的组装有:

soapdenovo、trimity、abyss等。