什么是免疫电泳,其原理是什么,什么是免疫固定电泳?

2020-11-22 05:19:57 字数 3644 阅读 3100

1楼:喵dva不爱你哟

免疫固定电泳技术( ife )是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。检测标本可以是血清、尿液、脑脊液或其它体液。免疫固定电泳技术( ife )已在医学研究、法医学、基因诊断和临床实验室操作中得到了广泛的应用。

免疫电泳

2楼:匿名用户

免疫电泳(immuneelectrophoresis)是将琼脂电泳和双向琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定性方法。先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳,然后在琼脂板**挖一横槽,加入已知相应的免疫血清,两者经一定时间相互扩散后,就会在抗原、抗体比例最适处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和外形,参照已知抗原、抗体形成的电泳图,即可分析样品中所含成分。

此方法样品用量少、特异性高、分辨力强。但所分析的物质必须有抗原性,而且抗血清必须含所有的抗体组分。近年来本法主要用于:

血清蛋白组分的分析,如多发性骨髓瘤、肝病、全身性红斑狼疮等;抗原、抗体的纯度的检测;抗体各组分的研究等。

什么是免疫固定电泳?

3楼:知识青年

免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清ife可检测igg、igm、iga等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳,分离后其上覆盖抗血清滤纸,滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链,或抗各类重链抗血清,

当抗体与某区带中的单克隆ig结合,可形成免疫复合物沉淀,即固定,再通过漂洗与染色,呈现浓而窄的着色区带,即可判别单ig的轻链和重链的类别。血清样本要求使用免疫项目蓝色管采集静脉血,避免溶血。

4楼:小雨手机用户

免疫固定电泳技术( ife )是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。检测标本可以是血清、尿液、脑脊液或其它体液。免疫固定电泳技术( ife )。

详细特点:

(1)采用水溶性涂料,以水为溶解介质,节省了大量有机溶剂,大大降低了大气污染和环境危害,安全卫生,同时避免了火灾的隐患;

(2)涂装效率高,涂料损失小,涂料的利用率可达90%~95%。

什么是电泳?电泳的原理是什么

5楼:墨陌沫默漠末

带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,原理是电泳涂料在阴阳两极,施加于电压作用下,带电荷的涂料离子移动到阴极,并与阴极表面所产生的碱性物质作用形成不溶解物,沉积于工件表面。

生物大分子如蛋白质,核酸,多糖等大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中,它们的静电荷取决于介质的h+浓度或与其他大分子的相互作用。在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移现象即所谓电泳。

如果把生物大分子的胶体溶液放在一个没有干扰的电场中,使颗粒具有恒定迁移速率的驱动力来自于颗粒上的有效电荷q和电位梯度e。它们与介质的摩擦阻力f抗衡。在自由溶液中这种抗衡服从stokes定律。

阳极电泳的特点是:原料**便宜(一般比阴极电泳便宜50%);设备较简单,投资少(一般比阴极电泳便宜30%);技术要求较低;涂层耐蚀性能较阴极电泳差(约为阴极电泳寿命的四分之一)。

阴极电泳涂层耐蚀性高的原因是:工件是阴极,不发生阳极溶解,工件表面及磷化膜不破坏;电泳涂料(一般为含氮树脂)对金属有保护作用,且所用漆价高质优。

在确定的条件下,带电粒子在单位电场强度作用下,单位时间内移动的距离(即迁移率)为常数,是该带电粒子的物化特征性常数。

不同带电粒子因所带电荷不同,或虽所带电荷相同但荷质比不同,在同一电场中电泳,经一定时间后,由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。

6楼:风儿lamp沙儿

带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳。

电泳是电泳涂料在阴阳两极,施加于电压作用下,带电荷的涂料离子移动到阴极,并与阴极表面所产生的碱性物质作用形成不溶解物,沉积于工件表面。它包括四个过程:

电解(分解)在阴极反应最初为电解反应,生成氢气及氢氧根离子oh ,此反应造成阴极面形成一高碱性边界层,当阳离子与氢氧根作用成为不溶于水的物质,涂膜沉积,方程式为:h2o→oh+h。

电泳动泳动、迁移)阳离子树脂及h+ 在电场作用下,向阴极移动,而阴离子向阳极移动过程。

电沉积(析出)在被涂工件表面,阳离子树脂与阴极表面碱性作用,中和而析出不沉积物,沉积于被涂工件上。

电渗(脱水)涂料固体与工件表面上的涂膜为半透明性的,具有多数毛细孔,水被从阴极涂膜中排渗出来,在电场作用下,引起涂膜脱水,而涂膜则吸附于工件表面,而完成整个电泳过程。

简述免疫固定电泳的原理及临床应用

7楼:

增强固有免疫是提高机体整个免疫力的一个重要方面。 特异性免疫特异性免疫又细菌的抗原有点象是电灯开关按钮,通过触发这些按钮启动相应的功能,但是你是

免疫pcr的基本原理和大致流程是什么

8楼:匿名用户

博凌科为-为你解答:免疫-pcr主要由两个部分组成。第一部分是类似于普通酶联免疫吸附实验(elisa)的抗原抗体反应。

第二部分即常规的pcr扩增和电泳检测。免 疫-pcr与elisa的区别就在于elisa是以碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶来标记抗体,用颜色反应来表明阳性或阴性结果,而免疫-pcr 则是以一段特定的双链或单链dna来标记抗体,用pcr扩增抗体所连接的dna,并进行电泳检测,因此可由pcr产物的量来反映抗原分子的量。由于pcr 的高扩增能力,只要存在着极微量的抗原抗体反应,pcr都能大量扩增抗体所连接的dna分子,再用电泳来表明实验结果。

免疫-pcr的关键之处就在于用一 个连接分子将一段特定的dna连接到抗体上,在抗原和dna之间建立相对应关系,从而将对蛋白质的检测转变为对核酸的检测。最初sano等人建立的免疫 -pcr实验流程如下:(1)再包被缓冲液稀释抗原bssa,并固定在微滴定板上。

(2)微滴定板上加入相应的已稀释的单克隆抗体,并洗去未结合的抗体分 子。(3)加入稀释的已与生物素化puc19的结合的链亲和素-蛋白a嵌合体(蛋白a能与抗体结合,而链亲和素可与生物素化puc19中的生物素结合), 并洗去未结合的嵌合蛋白-puc19复合物。(4)pcr扩增抗体所连接的puc19。

(5)琼脂糖凝胶电泳,eb 显色检测puc19. 运用这种方法,sano等人可检测到600个bsa抗原分子。与用碱性磷酸酶作为标记物的elisa方法相比,免疫-pcr的敏感度比 elisa高106。

在这免疫-pcr系统中,链亲和素-蛋白a嵌合体作为一个连接分子起着桥梁作用。它的两个独立结合位点蛋白a和链亲和素分别与igg 的fc段和生物素化dna中的生物素结合,从而在蛋白质和核酸之间建立对应关系,通过pcr扩增,将抗原抗体反应的特异性高度放大。因此,免疫-pcr结 合了抗原抗体反应的特异性和pcr的高度敏感性,成为一种极为敏感的抗体依赖的抗原检测技术。

什么叫抗原性,免疫电泳法90%以上

9楼:天马行空设计

抗原抗体在一定的ph溶液中带有电荷,在电场的作用下可发生定向移动。将抗原抗体加入ph8.6的琼脂凝胶中,抗体只带有微弱的负电荷,而且它的分子量又较大,所以泳动慢。

更重要的是抗体分子受电渗作用影响较大,也就是说电渗作用大于它本身的迁移率。在电泳时,抗体不但不能抵抗电渗作用向正极移动,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白带负电荷,将抗原置于负极,将抗体置于正极,电泳后则在两孔之间相遇,并在比例适当的部位形成肉眼可见的沉淀线。

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